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    Purificaci贸n y caracterizaci贸n de lipopolisac谩ridos de eikenella corrodens 23834 y porphyromonas gingivalis w83

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    T铆tulo corto: Metodolog铆a para el aislamiento e identificaci贸n聽 de LPS de periodonto-pat贸genosT铆tulo en ingl茅s: Purification and characterization of lipopolysaccharide from Eikenella corrodens 23834 and Porphyromonas gingivalis W83Resumen:聽La purificaci贸n de lipopolisac谩ridos (LPS) o endotoxinas y su caracterizaci贸n es un aspecto esencial para estudios que buscan aclarar el papel de estas biomol茅culas de bacterias Gram negativas presentes en la cavidad oral y su relaci贸n con enfermedades locales periodontales y sist茅micas. Este estudio implementa una metodolog铆a para la extracci贸n, purificaci贸n y caracterizaci贸n de LPS a partir de bacteria completa de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83,聽 utilizando t茅cnicas previamente descritas. La extracci贸n cruda de LPS se realiz贸 con fenol-agua caliente; la purificaci贸n se realiz贸 con tratamiento enzim谩tico con nucleasas y proteasa, seguido de cromatograf铆a de exclusi贸n por tama帽o (Sephacryl S-200 HR) con deoxicolato de sodio como fase m贸vil. La caracterizaci贸n de los extractos purificados se realiz贸 por barrido espectrofotom茅trico, pruebas bioqu铆micas de electroforesis SDS-PAGE, ensayo Purpald y la prueba cromog茅nica de LAL. Como control para la identificaci贸n y caracterizaci贸n de los extractos purificados se utilizaron LPS comerciales de Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Rodobacter sphaeroides y Porphyromonas gingivalis. La metodolog铆a implementada permiti贸 la obtenci贸n de LPS de elevada pureza con la identificaci贸n de KDO o heptosas, un quimiotipo de LPS-S (liso) para E. corrodens y LPS-SR (semi-rugoso) para P. gingivalis W83. Ambos LPS purificados mostraron capacidad endot贸xica a bajas concentraciones. La metodolog铆a implementada en este estudio para la purificaci贸n y caracterizaci贸n de LPS a partir de bacteria completa聽 fue eficiente al compararla con los LPS comerciales.Palabras clave: endotoxinas, cromatograf铆a, 谩cido 2-ceto-3-desoxioctulos贸nico (KDO), test LAL, periodontitis.Abstract:聽Purification of lipopolysaccharide (LPS) or endotoxins and its characterization is an important aspect for studies aimed at clarify the role of these biomolecules from Gram negative bacteria present in the oral cavity and its relationship with periodontal and systemic diseases. This study describes an extraction, purification and characterization method of LPS from Eikenella corrodens 23834 and Porphyromonas gingivalis W83. LPS extraction was performed by using hot phenol-water; the purification was done with nuclease and protease enzymatic treatment, followed by size-exclusion chromatography (Sephacryl S-200 HR) with sodium deoxycholate as mobile phase. The characterization of the purified extracts was performed by spectrophotometric scanning, SDS-PAGE biochemical tests, Purpald assay and chromogenic LAL test. As control, commercial LPS from Escherichia coli, Salmonella typhimurium, P. gingivalis, and Rodobacter sphaeroides were used. The methodology mentioned above had allowed obtaining high purity LPS by identifying KDO or heptoses, a chemotype S-LPS (smooth) to E. corrodens; SR-LPS (semi-rough) for P. gingivalis W83. Both purified LPS showed endotoxic capacity at low concentrations. The methodology used in this study for purification and characterization of LPS from the whole bacteria was efficient when it was compared with commercial LPS.Key words: endotoxin, 2-keto-3-deoxyoctonate (KDO), Chromatography, Limulus test (LAL), periodontitis

    Antibody prevalence againts Trypanosoma cruzi in domestic and wild reservoirs in Amalfi, antioquia

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    ABSTRACT: The prevalence of Trypanosoma cruzi in domestic and wild reseroirs in nine localities of the Amalfi town, (Antioquia, Colombia), was determined. Blood samples were tested by hemoculture, xenodiagnosis, and thick smears to determine the percentage of Trypanosoma infection and to evaluate the presence of antibodies against the parasite in these species. Vector activity was previusly reported in households of this minicipality in 1994, followed by the confirmation of presence of the parasite in the vectors. Sixty-three samples from canines and 33 of several other wild animal species like Didelphis marsupialis, Proechymis semiespinosus, Phylander spp., Among other ere collected. The percentage of animals with antibodies against the parasite, measured by ELISA, was 47.6% for dogs and 20% for other wild animals. The parasite was isolated once from a canine blood simple and the identification confirmed by morphology and IFI. In this paper we discuss the results and we suggest the realization of additional studies regarding these aspects.RESUMEN: Se realiz贸 un muestreo mensual durante un a帽o, en nueve veredas del Municipio de Amalfi, Antioquia en reservorios dom茅sticos y silvestres de Trypanosoma cruzi (T. cruzi), con el fin de determinar el porcentaje de infecci贸n natural por los m茅todos de hemocultivo, xenodiagn贸stico y gota gruesa; y la presencia de anticuerpos contra el parasito mediante pruebas serol贸gicas en cada una de las especies evaluadas. En este Municipio ya se hab铆a reportado, desde 1994, la presencia de vectores llegando a las casas, los cuales fueron encontrados infectados con T. cruzi. Para el presente trabajo se procesaron 63 muestras de perros y 33 de varias especies de animales silvestres como Didelphis marsupialis, Proechymis semiespinosus, Phylander spp., entre otros. El porcentaje de animales con anticuerpos para el parasito, medidos por la t茅cnica de ELISA, fue de 47,6% y 20% para animales dom茅sticos y silvestres respectivamente. De las pruebas parasitol贸gicas realizadas se obtuvo solamente la muestra de un perro positiva por hemocultivo, de la cual se aislaron par谩sitos que se determinaron por morfolog铆a y se prob贸 la presencia de anticuerpos en el suero por las t茅cnicas de ELISA e IFI. Se discuten los resultados y se proponen nuevos estudios

    Seminario de Investigaci贸n Aplicada 2017 鈥 I

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    Este trabajo tiene como objetivo mostrar la internacionalizaci贸n y la importancia de cada uno de los temas a tratar en este libro que se llev贸 a cabo en el seminario de investigaci贸n aplicada que tomo por nombre de gesti贸n financiera y contable bajo est谩ndares internacionales. Colombia al ser uno de los 煤ltimos pa铆ses de am茅rica latina en implementar las normas de informaci贸n financiera 鈥 NIIF busca la necesidad de llevar a cabo esta nueva normatividad logrando aplicar el decreto 1314 del 2009, por ende los estudiantes de 煤ltimo semestre del programa de contadur铆a p煤blica de la Universidad Piloto de Colombia Seccional Alto Magdalena quienes tomaron por opci贸n de grado el seminario de investigaci贸n aplicada, buscan consolidar por medio de varias problem谩ticas que se presentan actualmente en la mayor铆a de empresas tanto de personas naturales como jur铆dicas, obteniendo de esta manera aclarar dudas e inquietudes que se generan por medio de un trabajo realizado como una monograf铆a de grado
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