Caracterização de unigenes na interação Musa acuminata-Mycosphaerella musicola : desenvolvimento de marcadores microssatélites e análise de expressão gênica

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013.Musa acuminata (AA), espécie selvagem, cujo cruzamento com Musa balbisiana (BB) deu origem as bananas comestíveis atuais, é uma potencial doadora de genes de resistência a estresses bióticos, como a Sigatoka amarela causada pelo fungo Mycosphaerella musicola. O objetivo deste estudo foi identificar locos microssatélites (SSR) identificados em genes envolvidos com resposta de defesa a doenças em bananeira, caracterizar os SSRs quanto ao polimorfismo e analisar os genes quanto a expressão diferencial durante a interação com o patógeno M. musicola. Foram construídas quatro bibliotecas de cDNA a partir do RNA total de 36 amostras de folha de M. acuminata Calcutta 4 e M. acuminata subgrupo Cavendish Grande Naine inoculadas e não inoculadas com M. musicola. As bibliotecas foram submetidas a sequenciamento 454 e aproximadamente 36.000 unigenes para cada genótipo foram identificados e anotados por BLASTX e KOG. A partir desses dados foi realizada uma busca de SSRs gênicos e foram desenhados pares de primers flanqueando os SSR utilizando o software Primer3 plus. Um total de 4.068 locos SSR foram identificados em Calcutta 4 e 4.095 em Cavendish Grande Naine. Destes, foram selecionados 95 locos SSR derivados de genes- candidatos envolvidos em resposta de defesa que foram caracterizados em 22 genótipos de M. acuminata contrastantes para a resistência as Sigatokas Negra e Amarela. Um total de 14 locos SSRs gênicos apresentaram polimorfismo (3 a 8 alelos/ loco) e PIC médio de 0,63 e foram utilizados para a análise fenética dos 22 genótipos de M. acuminata pelo método UPGMA. Os 14 locos SSR não foram suficientes para agrupar todos os genótipos quanto a resistência, no entanto houveram agrupamentos de genótipos resistentes com alta similaridade. A partir do subconjunto de 95 genes, foram desenhados 26 pares de primers específicos para a análise de expressão gênica diferencial por RT-qPCR. Os dados de expressão foram analisados no Miner e Rest para calcular a eficiência dos primers e expressão gênica diferencial. Vinte e dois pares de primers apresentaram especificidade e foram analisados por RT-qPCR em quatro pools de cDNA sintetizados com as amostras do bioensaio. Dos 22 genes analisados, sete foram selecionados para análise de cinetica de expressão diferencial em Calcutta 4 que é um genótipo resistente. Seis genes apresentaram regulação negativa. Os marcadores SSR gênicos identificados serão importantes ferramentas para uso em programas de melhoramento genético de bananeira e seleção assistida por marcadores. A análise da expressão de genes- candidatos envolvidos com defesa no patossistema Musa-Mycosphaerella é de grande importância para estudos futuros de transformação genética de bananeira visando a resistência a doenças em cultivares. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACTMusa acuminata (AA), a wild species, which, through crossing with Musa balbisiana (BB) is responsible for today´s edible bananas, is also a potential donor of resistance genes for biotic stresses such as Yellow Sigatoka caused by Mycosphaerella musicola. The objective of this study was to identify microsatellite loci (SSR) from unigenes related to defense and response to biotic stress, to characterize the SSRs for polymorphism and analyze the genes for differential expression during interaction with the pathogen M. musicola. Four cDNA libraries were constructed from total RNA from leaf samples of 36 M. acuminata Calcutta 4 and M. acuminata Cavendish Grande Naine plants, both non-inoculated and inoculated with M. musicola. The cDNA libraries were subjected to 454 sequencing and approximately 36.000 unigenes for each genotype were identified and annotated by BLASTX and KOG. From these data, a search of genic SSRs was performed and primer pairs were designed flanking the SSRs using the software Primer3 plus. A total of 4.068 SSR loci were identified in Calcutta 4 and 4.095 in Cavendish Grande Naine. Of these, 95 SSR loci were selected from candidate genes involved in defense responses and characterized in 22 M. acuminata genotypes contrasting in resistance to Black and Yellow Sigatokas. A total of 14 loci SSRs presented polymorphism (3-8 alleles / locus) and an average PIC value of 0.63. Employed in UPGMA phenetic analysis of the 22 M. acuminata genotypes, the 14 SSR loci were not sufficient to group all genotypes based upon disease resistance, although clusters with high similarity of resistant genotypes were observed. From the subset of 95 genes, 26 specific primer pairs were designed for analysis of differential gene expression by RT-qPCR. The expression data were analyzed with Rest and Miner to calculate primer efficiency and differential gene expression.Twenty-two primer pairs showed specificity and were analyzed by RT-qPCR in four pools of cDNA synthesized with the samples of the bioassay. Of the 22 genes analyzed, seven were selected for analysis of kinetics of differential expression in Calcutta 4 which is a resistant genotype. Six genes showed down regulation. The SSR gene markers identified will be important tools for use in banana breeding programs and marker assisted selection. Analysis of expression of resistance gene candidates in the pathosystem M. acuminata- M. musicola is of great importance for future studies on using genetic transformation for disease resistance development in cultivars

Assessoria de imprensa e relacionamento com a mídia: um estudo sobre a atividade em instituições públicas reconhecidas pelas estratégias desenvolvidas na área

As assessorias de imprensa desempenham papel cada vez mais relevante dentro das organizações, apoiando as instituições no alcance de seus objetivos. Diante desse cenário, este estudo propõe uma análise do panorama de assessorias de imprensa de órgãos do Poder Judiciário e do Tribunal de Contas reconhecidas pelos resultados obtidos a partir das estratégias desenvolvidas pelos profissionais atuantes na área. Buscou-se conhecer a estrutura, o processo de trabalho e os canais de relacionamento das assessorias de imprensa, além de descrever os processos e as técnicas utilizadas para a mensuração de resultados. Para o alcance dos objetivos propostos, foram identificadas e contatadas instituições premiadas pelas estratégias voltadas ao relacionamento com a mídia. Após essa etapa, foi realizada entrevista em profundidade e aplicado questionário junto a profissionais de seis instituições públicas. Entre os resultados obtidos, destacam-se, como boas práticas: a importância de valorizar a assessoria de imprensa como área estratégica da instituição; a necessidade de o assessor de imprensa atuar com transparência; a estratégia de relacionamento entre a área, os assessorados e os jornalistas de redação; e, como pontos críticos: a falta de recursos humanos; a abrangência e a peculiaridade dos serviços oferecidos pela área e a dificuldade de mensuração dos resultados obtidos pela assessoria

UMA ANÁLISE MULTIVARIADA DA ATIVIDADE ECONÔMICA, DE SAÚDE E DE EDUCAÇÃO DOS MUNICÍPIOS BRASILEIROS QUE POSSUEM ATÉ CINCO MIL HABITANTES

Este estudo realiza uma análise multivariada dos indicadores de atividade econômica, saúde e educação dos municípios brasileiros com até cinco mil habitantes para compreender as suas características, bem como compará-los aos municípios que possuem mais de cinco mil habitantes. Foram levantados indicadores disponíveis em bases públicas, com duas etapas principais: i. análise multivariada descritiva e comparativa por indicador entre municípios com até cinco mil habitantes e aqueles com maior faixa populacional; e ii. análise de agrupamento. Dentre os resultados da pesquisa, foi possível constatar que os municípios até cinco mil habitantes possuem melhores indicadores em relação a variáveis como PIB per capita municipal, taxas de aprovação e abandono escolar, qualidade do ensino nos anos iniciais do Ensino Fundamental e taxa de mortalidade infantil. Também foi possível separar os municípios até cinco mil habitantes em três clusters, sendo que o 3º, composto por 248 municípios, apresenta médias melhores no que se refere ao PIB per capita, mas resultados significativamente piores na saúde. Em educação, as médias entre os clusters são mais próximas. Os resultados da pesquisa podem oferecer importante subsídio para a discussão sobre a situação dos municípios brasileiros e contribuir para futuros estudos sobre o tema

Comprehensive approach of nursing: possibility of interpretation based on alfred schutz

Objective: To reflect about the comprehensive approach of nursing based on the theoretical framework of Alfred Schutz. Method: A theoretical essay from the comprehensive phenomenological sociology of Alfred Schutz. Results: Reflections are made on the interpretation of nursing care based on the key concepts of Schutz, with special reference to the care based on the other's typification, which recognizes the everyday lives of individuals, seeking intersubjectivity and establishing a face to face relationship. It reflects, still, about the reasons-for and reasons-why of nursing practice. Conclusion: It is concluded that the typification of nursing practices is reflected in the understanding of an essentially complex profession that is based on care as the main element of its practices

Universo em descoberta: Palestras e noites de observação celeste no Campus Regional de Goioerê

Anais do 35º Seminário de Extensão Universitária da Região Sul - Área temática: ComunicaçãoO projeto busca através de visitas às escolas da região, e praças do município, para população em geral, divulgar e exemplificar o ensino da astronomia. O projeto de extensão Universo em Descoberta, vinculado ao Campus Regional da Universidade Estadual de Maringá em Goioerê/PR. tem como objetivos: estimular alunos e professores, de todos os níveis de ensino, a desenvolverem atividades que despertem o interesse pela busca do conhecimento científico; aproximar a universidade e a comunidade, fornecendo acesso a informações teóricas; e incentivar a participação em noites de observação celeste realizadas no Campus. Atualmente alunos da rede pública e particular de ensino são atendidos com palestras, participações em noite de observações celestes, feira de ciências e muitas outras atividades, além da divulgação das ciências e tecnologia. Dessa forma pretende-se compartilhar e evidenciar que atividades envolvendo as ciências e a Física em espaços diferentes do tradicionalismo de uma sala de aula são de fundamental importância, tanto para despertar interesse pela Ciência como para oportunizar a interação escola-universidade-comunidad

Atividade Online como Dispositivo Formativo em EaD: um Exemplo do Experimento de Titulação

A experimentação é uma etapa fundamental na formação dos futuros profissionais ligados as ciências da natureza, visto que ela permite confrontar conceitos prévios com resultados experimentais. No entanto, no caso dos cursos em EaD essa vivência pode acabar sendo um pouco prejudicada e buscar soluções é fundamental. Nesse sentido, o uso das simulações de experimentos pode ser um grande aliado na no processo de ensino-aprendizagem dos temas presentes nas diversas disciplinas das grades. Dentro dessa perspectiva, nesse trabalho são apresentadas as etapas necessárias para a utilização dessas simulações como elemento de apoio aos alunos dessa modaliade de ensino e as discussões sobre a aplicação destas. Deixando claro, que mesmo um atividade virtual, a necessidade de contrução de roteiros para a realização da atividade e de perguntas norteadoras que motivem aos alunos a fazerem seu uso. Online Activity as a Training Device in EaD: an Example of Titration Experiment Abstract Experimentation is a fundamental step in the training of future professionals related to the natural sciences, since it allows confronting previous concepts with experimental results. However, in the case of the courses in EaD, this experience can end up being a bit impaired and seeking solutions is fundamental. In this sense, the use of simulations of experiments can be a great ally in the teaching-learning process of the themes present in the various disciplines of grids. In this perspective, this work presents the necessary steps for the use of these simulations as an element of support to the students of this modality of teaching and the discussions on the application of these simulations. Making it clear that even a virtual activity, the need to build scripts to carry out the activity and guiding questions that motivate students to make use of it. Keywords: Applets, Chemistry, Distance educatio

Fatigue Effects in Daily Life Activities of Kidney Transplant Recipients

After undergoing kidney transplantation, some patients still face one symptom that continues after the dialysis sessions: fatigue (physical and mental tiredness that does not get better after resting). Fatigue effects in the everyday lives of kidney transplant patients can be beneficially modified early by changing this scenario. This is a quantitative study about the intensity and impacts of fatigue in kidney transplant patients admitted to the Hypertension and Kidney Hospital from October 2011 to March 2012. the fatigue pictogram was used to evaluate the level of fatigue interference in the daily life activities of kidney transplant patients. the sample consists of 39 patients, and was developed in 2 phases: data collection and attendance after and before the transplantation until hospital discharge. Descriptive statistical analyses were used. in the group at issue, we have noticed the following profile of the sample: 84.3% of transplantations with live donors, most were men, average age 36.5 years old, average hospitalization time 11.1 days, average time of renal failure 66.4 months, systemic arterial hypertension prevalence 66.7%, and the prevalence of at least 1.8 diseases in each individual. the self-referred causes of chronic renal failure were uncontrolled systemic arterial hypertension, glomerulonephritis, and overuse of anti-inflammatory drugs, among others. the study shows that fatigue is directly related to the level of activities of daily living, causing less ability to perform activities in the higher level of fatigue, which is in the immediate postoperative period and only settling fully on the 9th postoperative day.Universidade Federal de São Paulo, Nursing Sch São Paulo, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Kidney & Hypertens Hosp, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Nursing Sch São Paulo, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Kidney & Hypertens Hosp, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Hepatite B na Amazônia ocidental brasileira: conhecimento e medidas de biossegurança entre profissionais de enfermagem

Justificativa e objetivos: A biossegurança é de extrema importância para os profissionais de enfermagem, principalmente em áreas de elevado padrão endêmico para agravos como a infecção por vírus da hepatite B. Nesse sentido, o estudo teve como objetivo descrever aspectos relacionados às medidas de biossegurança e à infecção por vírus da hepatite B entre profissionais de enfermagem na Amazônia ocidental brasileira. Métodos: Estudo transversal, descritivo, realizado com profissionais de enfermagem atuantes no centro obstétrico de um hospital materno infantil. Resultados: 30 profissionais participaram da pesquisa, sendo 33,3% enfermeiros e 66,7% técnicos de enfermagem. A maioria foi do sexo feminino (70%) com média de idade de 40,9 anos. Para toda a amostra, 86,7% dos profissionais declararam esquema vacinal completo contra a hepatite B. Entre os técnicos de enfermagem, 15% declararam não ter realizado o anti-HBs. Quanto ao uso de equipamentos de proteção individual, 60% dos profissionais declararam uso esporádico. Para 80% dos enfermeiros e 60% dos técnicos de enfermagem, não houve oferta de treinamento em biossegurança. Sobre acidentes, 70% dos enfermeiros e 35% dos técnicos de enfermagem declararam ter sofrido algum tipo de exposição. Entre os enfermeiros, 85,7% afirmaram não ter notificado o evento. Entre os que sofreram acidente, 42,9% o relacionaram à carga horária excessiva. Conclusão: Os profissionais de enfermagem reconhecem a hepatite B como uma condição de alta incidência na região amazônica, o que exige medidas mais rígidas de biossegurança devido aos riscos. No entanto, apesar dos grupos investigados, em sua maioria, declararem um esquema completo de vacinação para a doença, foi observado relatos de falta de treinamento, uso esporádico de equipamentos de proteção individual, limitações nos testes de imunização (anti-HBs) e subnotificação de acidentes com risco biológico