Doses intermitentes de estatina em pacientes em hemodiálise com LDL-colesterol espontaneamente baixo

Background:Mortality in dialysis patients remains high and is due mainly to cardiovascular causes. Inflammation has a role in the genesis ofaccelerated atherosclerosis, vascular calcification, malnutrition and anemia, and a huge impact on the survival of these patients. The pleiotropic effects of statins can be a therapeutic option for reducing chronic inflammatory processes of patients undergoing hemodialysis.Objective:To evaluate the effects of low doses of simvastatin on inflammatory markers, hematimetric and nutritional parameters of patientsundergoing hemodialysis.Methods:Clinically-stable patients undergoing hemodialysis were classified according to their baseline LDL-cholesterol levels in two groups:those with levels below 100mg/dl (Group 1) and those with levels equal to or greater than 100mg/dl (Group-2), and were treated withsimvastatin during eight weeks. Group 1 received 20mg only after each session of hemodialysis (intermittent dose), whereas Group 2 received 20mg/daily. Laboratory data, erythropoietin resistance index and nutritional parameters were obtained before and after treatment.Results:A significant and equivalent reduction in C-reactive protein levels in both groups was observed (35.97±49.23% vs 38.32±32.69%, p=0.86). In group 1, there was also a tendency towards reduced resistance to erythropoietin (228.6±16.2 vs 208.9±16.2, p=0.058) and improvement of hematimetric parameters (hematocrit: 33.1±5.9% vs 36.1±4.5%, p=0.021).Conclusion:Intermittent doses proved to be as effective as the usual dose in reducing C-reactive protein levels and resistance to erythropoietin, besides improving the hematimetric parameters, indicating an important reduction of the cardiovascular risk evaluated by these parameters. (Arq Bras Cardiol 2008;90(2):104-111)FUNDAMENTO: A mortalidade na diálise continua elevada e ocorre principalmente por causas cardiovasculares. A inflamação participa da gênese da aterosclerose acelerada, calcificação vascular, desnutrição e anemia, e tem enorme impacto na sobrevida destes pacientes. As estatinas, através dos seus efeitos pleiotrópicos, podem representar uma opção terapêutica para atenuação do processo inflamatório crônico dos pacientes em hemodiálise. OBJETIVO: Avaliar os efeitos de uma baixa dose de sinvastatina sobre marcadores inflamatórios, parâmetros hematimétricos e nutricionais de pacientes em hemodiálise. MÉTODOS: Pacientes em hemodiálise clinicamente estáveis foram divididos, segundo os níveis basais de LDL-colesterol, em um grupo com níveis abaixo (Grupo 1) e outro com níveis iguais ou superiores a 100 mg/dl (Grupo 2) e tratados com sinvastatina por oito semanas. O Grupo 1 recebeu apenas 20 mg após cada sessão de diálise (dose intermitente), enquanto o Grupo 2 recebeu 20 mg/dia. Dados laboratoriais, índice de resistência a eritropoetina e parâmetros nutricionais foram obtidos antes e após o tratamento. RESULTADOS: Houve redução significativa e equivalente dos níveis de proteína C-reativa em ambos os grupos (35,97±49,23% vs 38,32±32,69%, p=0,86). No Grupo 1 também houve tendência a queda da resistência a eritropoetina (228,6±16,2 vs 208,9±16,2, p=0,058) e melhora dos parâmetros hematimétricos (hematócrito: 33,1±5,9% vs 36,1±4,5%, p=0,021). CONCLUSÃO: A dose intermitente mostrou-se tão eficaz quanto a dose usual em reduzir os níveis de proteína C-reativa e resistência a eritropoetina, além de melhorar os parâmetros hematimétricos, apontando para uma importante redução do risco cardiovascular avaliado por esses parâmetros. (Arq Bras Cardiol 2008; 90(2): 114-121

Standardization of renal function evaluation in Wistar rats (Rattus norvegicus) from the Federal University of Juiz de Fora's colony

Introduction:There is great interest in the use of animal models in the study of renal pathophysiology requires standardization of parameters. Objective:Standardize assessment of renal function in rats from in the Center for Reproductive Biology of Federal University of Juiz de Fora's colony. Methods:Thirty Wistar rats were used and performed measurements of creatinine (serum and urine), serum urea and proteinuria. Were evaluated: the urine collection interval in metabolic cages (24 hours or 12 hours), the need for 12-hour fast, the need of urine and serum deproteinization for creatinine measurement, need of serum deproteinization in animals with acute kidney injury to a spectrophotometer and ELISA, and the comparison of 24-hour proteinuria (PT 24 hours) with the protein/creatinine ratio (rP/C). Means were compared by the Student's t test, Pearson correlation, Bland-Altman plot for agreement and linear regression model to estimate PT 24 hours from rP/C. Results:The 24 hours urine output was greater than 12 hours, interfering with the creatinine clearance calculation. In the fasting group showed less water intake and lower urinary creatinine. There was great variability for the deproteinized whey and readings performed in the two devices were similar. There was a strong correlation between PT 24 hours and rP/C and the equation was generated: PT 24 hours = (8.6113 x rP/C) + 1.0869. Conclusion:Was standardized: 24-hour urine collection without fasting. The deproteinization showed no benefit. The measurements were performed with spectrophotometer reliability. It generated a practical formula for estimating PT 24 hours through rP/C.Introdução:Há grande interesse na utilização de modelos animais na pesquisa da fisiopatologia renal, que requer padronização dos parâmetros analisados. Objetivo:Padronizar avaliação da função renal de ratos da colônia do biotério do Centro de Biologia da Reprodução da Universidade Federal de Juiz de Fora. Métodos:Foram utilizados 30 ratos Wistar e realizadas dosagens de creatinina (sérica e urinária), ureia sérica e proteinúria. Foram avaliados: o intervalo de coleta de urina nas gaiolas metabólicas (24 horas ou 12 horas); a necessidade de jejum de 12 horas; a necessidade de desproteinização das amostras de urina e soro para dosagens de creatinina; necessidade de desproteinização do soro de animais com injúria renal aguda (IRA) para leitura em espectrofotômetro e ELISA, além da comparação da proteinúria de 24 horas (PT 24 horas) com a relação proteína/creatinina (rP/C). Os resultados foram comparados pelos teste t de Student, correlação de Pearson, gráfico de Bland-Altman para concordância e modelo de regressão linear para estimar a PT 24 horas a partir da rP/C. Resultados:A diurese de 24 horas foi maior do que a de 12 horas, interferindo na depuração da creatinina. No grupo em jejum, houve menor ingestão hídrica e menor creatinina urinária. Houve grande variabilidade para o soro desproteinizado e as leituras realizadas nos dois equipamentos foram semelhantes. Houve forte correlação entre PT 24 horas e rP/C e foi gerada a equação: PT 24 horas = (8,6113 x rP/C) + 1,0869. Conclusão:Foi padronizada: coleta de urina em 24 horas sem jejum. A desproteinização não mostrou benefício. As dosagens foram realizadas com confiabilidade em espectrofotômetro. Foi gerada uma fórmula prática para estimar PT 24 horas por meio da rP/C.Universidade Federal de Juiz de ForaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Fundação Oswaldo Ramos Hospital do Rim e HipertensãoUNIFESPSciEL

Padronização da avaliação da função renal de ratos (Rattus norvegicus) Wistar do biotério da Universidade Federal de Juiz de Fora

-Introdução: Há grande interesse na utilização de modelos animais na pesquisa da fisiopatologia renal, que requer padronização dos parâmetros analisados. Objetivo: Padronizar avaliação da função renal de ratos da colônia do biotério do Centro de Biologia da Reprodução da Universidade Federal de Juiz de Fora. Métodos: Foram utilizados 30 ratos Wistar e realizadas dosagens de creatinina (sérica e urinária), ureia sérica e proteinúria. Foram avaliados: o intervalo de coleta de urina nas gaiolas metabólicas (24 horas ou 12 horas); a necessidade de jejum de 12 horas; a necessidade de desproteinização das amostras de urina e soro para dosagens de creatinina; necessidade de desproteinização do soro de animais com injúria renal aguda (IRA) para leitura em espectrofotômetro e ELISA, além da comparação da proteinúria de 24 horas (PT 24 horas) com a relação proteína/creatinina (rP/C). Os resultados foram comparados pelos teste t de Student, correlação de Pearson, gráfico de Bland-Altman para concordância e modelo de regressão linear para estimar a PT 24 horas a partir da rP/C. Resultados: A diurese de 24 horas foi maior do que a de 12 horas, interferindo na depuração da creatinina. No grupo em jejum, houve menor ingestão hídrica e menor creatinina urinária. Houve grande variabilidade para o soro desproteinizado e as leituras realizadas nos dois equipamentos foram semelhantes. Houve forte correlação entre PT 24 horas e rP/C e foi gerada a equação: PT 24 horas = (8,6113 x rP/C) + 1,0869. Conclusão: Foi padronizada: coleta de urina em 24 horas sem jejum. A desproteinização não mostrou benefício. As dosagens foram realizadas com confiabilidade em espectrofotômetro. Foi gerada uma fórmula prática para estimar PT 24 horas por meio da rP/C

Efeito de baixas doses de sinvastatina sobre marcadores inflamatórios e nutricionais de pacientes em hemodiálise

BACKGROUND: The traditional cardiovascular risk factors and the Chronic Kidney Disease (CKD) related risk factors contribute to the extremely high rate of cardiovascular mortality seems in dialysis population. The coexistence of malnutrition, inflammation, accelerated atherosclerosis, vascular calcification and anemia has an enormous impact in the life span of these patients. As in the general population, statins reduce cardiovascular mortality in dialysis population through lipid lowering and its pleiotropic effects, mainly by the chronic inflammatory process reduction capacity, shown up by the high-sensitive C-reactive protein levels (CRP-hs) reduction. The group of dialysis patients with low LDL-cholesterol (LDL-c), elevated CRP-hs levels and anemia present the highest cardiovascular risk and there are no definite evidences of benefit with statins use. OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of a low dose of simvastatin that aims only pleiotropic effects in comparison with a standard dose in CRP-hs levels reduction, hematimetric parameters, erythropoietin resistance (EPO-RI), body mass index (BMI) and inflammation score (MIS). METHODS: Forty-two stable dialysis patients with more than six months on maintenance dialysis program, with more than 18 years old and without inflammation evidence were divided based on LDL-c basal levels. The patients with LDL-c 100mg/dl (group-2) received 20mg/day during eight weeks follow-up phase. Before and after the statin use, the CRP-hs levels and hematimetric parameters was measured and calculated the EPO-RI, BMI and MIS. The data were analyzed with the SPSS statistic program, through. Was considered significant p100mg/dl (grupo-2) receberam 20mg/dia durante oito semanas. Antes e após o tratamento foram medidos os níveis de PCR-us, hemoglobina (Hb), hematócrito (Hct) e calculado o IR-EPO, IMC e MIS. Os dados foram analisados com o programa estatístico SPSS. Foi considerado significante p<0.05. RESULTADOS: Houve redução significativa dos níveis de LDL-c e PCR-us em ambos os grupos, sendo a redução do LDL-c significantemente maior no grupo-2 (16,26±17,51% vs 37,73±11,73%, p<0,0001) enquanto a redução da PCR-us foi equivalente em ambos os grupos (35,97±49,23% vs 38,32±32,69%, p=0,86). Houve também queda da IR-EPO e melhora dos parâmetros hematimétricos. Não houve mudança no IMC ou MIS. CONCLUSÃO: A baixa dose de sinvastatina mostrou-se tão eficaz quando a dose usual em reduzir os níveis de PCR-us, a IR-EPO e melhorar os parâmetros hematimétricos, apontando para uma importante redução do risco cardiovascular nestes pacientes

“Avaliação do efeito da reposição de αklotho recombinante sobre a remodelação miocárdica em modelo experimental de doença renal crônica”

ntroduction: Chronic Kidney Disease (CKD) related cardiomyopathy - Uremic Cardiomyopathy - is the underlying reason that makes Sudden Cardiac Death the main mortality cause on dialysis. Among the mechanisms involved in its pathophysiology, the Bone and Mineral Disorder of CKD (BMD-CKD) stands out doe to the presence of hyperphosphatemia, elevated levels of FGF23 and low levels of αKlotho. Evidence suggests that αKlotho replacement would have a protective effect on the myocardium, but the mechanisms are still poorly understood. Objective: To evaluate, in an experimental model of CKD, the effect of recombinant αKlotho replacement on cardiac remodeling and potential pathophysiological mechanisms involved. Methods: We studied 46 male Wistar rats with 12 weeks, divided into 3 groups: Control (sham), DRC and DRC + KL. The animals were submitted to surgery (sham or nephrectomy 5/6) and treated from the 4th to 8th week with recombinant αKlotho (0.01mg / kg, SC, 48 / 48h) or vehicle. At week 8, echocardiography and creatinine, urea, calcium, phosphorus, PTHi, FGF23, FGF21 and sKlotho were measured. Myocardial remodeling was evaluated by cardiac mass, echocardiographic parameters and myocardial histomorphometry. Myocardial expression of MHCβ and αSMA were assessed by immunohistochemistry (IHC) and qRT-PCR, while the effect on myocardial expression of TRPC6 and FGF21 was determined by IHC, westernblot and qRT-PCR. Results: There was an increase in creatinine (Control: 0.24 ± 0.04 vs CKD: 0.58 ± 0.07 and CKD+KL: 0.62 ± 0.06mg / dl, p <0.0001) and drop in its clearance (Control: 2.0 ± 0.5 vs CKD: 1.1 ± 0.13 and CKD+KL: 1.0 ± 0.13 ml / min / 100g; p <0.0001) in the groups with CKD. In the CKD groups, there was an increase in the excreted fraction of phosphorus (Control: 8.9 ± 1.6 vs CKD: 20.08 ± 3.8 and CKD+KL: 24.2 ± 5.3%, p < 0.0001); (P <0.05) and FGF23 (Control: 129.9 ± 28.7 vs. CKD: 208.8 ± 33.9 and CKD+KL: 200.5 ± 32.0 mg / dL, p <0.05), and reduction of serum αKlotho levels (Control: 188.4 ± 29.67 vs. CKD: 36.2 ± 21.3 and CKD+KL: 49.2 ± 25.6 pM, p <0.0001). In the assessment of myocardial remodeling, an increase in the heart weight/tibia length ratio (Control: 16.7 ± 1.0 vs. CKD: 20.2 ± 1.0 mg / mm, p <0.0001) and LV walls thickness: septum (Control: 1.41 ± 0.1 vs CKD: 1.58 ± 0.11 mm, p = 0.006), posterior wall (Control: 1.45 ± 0.1 vs CKD: 1.54 ± 0.1mm ; p = 0.01) and estimated LV mass (Control: 736.5 ± 123.4 vs CKD: 883.1 ± 128.4 mg; p = 0.005) in the CKD group, but with a reduction in the αKlotho treated group: heart/tibia (CKD: 20.2 ± 1.0 vs CKD+KL: 17.8 ± 0.9 mg/mm, p <0.0001), septum (CKD: 1.58 ± 0.11 vs. CKD+KL: 1.42 ± 0.10 mm, p = 0.006), posterior wall (CKD: 1.54 ± 0.1 vs CKD+KL: 1.42 ± 0.1mm, p = 0.01) and mass of VE (CKD: 883.1 ± 128.4 vs. CKD+KL: 750.4 ± 114.8mg, p = 0.005). It was also observed a reduction of cardiomyocyte diameter (CKD: 21.4 ± 0.8 vs. CKD+KL: 17.7 ± 1.0 μm, p <0.0001) and of interstitial fibrosis area (CKD: 4, 0 ± 0.53 vs. CKD+KL: 2.35 ± 0.3%, p <0.0001) in the treated group compared to untreated CKD group, as well as reduction in expression of MHCβ (IHC) (CKD: 28, 4 ± 2.4 vs. CKD+KL: 22.8 ± 4.0%, p = 0.002) and αSMA (IHC) (CKD: 7.2 ± 2.7 vs. CKD+KL: 2.6 ± 0.4 %, p = 0.0001). There was a reduction in the treated group of TRPC6 expression on cardiomyocyte membrane surface (CKD: 15.5 ± 3.72 vs. CKD+KL: 9.77 ± 1.84% area; p = 0.001) and increased FGF21 myocardial expression at mRNA (CKD: 0.73 ± 0.19 vs. CKD+KL: 0.96 ± 0.26; 2ΔΔCT, p = 0.03) and at protein level (CKD: 1.25 ± 0.11 vs. CKD+KL: 1.46 ± 0.22, UA, p = 0.03) in relation to the untreated CKD group. Conclusion: We conclude that, in an experimental model of CKD with moderate loss of renal function and cardiac hypertrophy, the replacement of rKlotho, at the dose and route used and therapeutic rationale, showed cardioprotective effect, attenuating myocardial remodeling. The mechanism of this effect involved not only the reduction of TRPC6 expression in the cardiomyocyte membrane, but also an increase in the myocardial expression of FGF21, which suggests the existence of an effect of sKlotho on its expression.Introdução: A miocardiopatia relacionada à Doença Renal Crônica - Miocardiopatia Urêmica – é a causa subjacente que faz da Morte Súbita Cardíaca a principal causa de óbito na diálise. Dentre os mecanismos envolvidos na sua fisiopatologia, destacase o Distúrbio Mineral e Ósseo da DRC (DMO-DRC) através da presença de hiperfosfatemia, níveis elevados de FGF23 e baixos níveis de αKlotho. Evidências sugerem que a reposição de αKlotho teria efeito protetor sobre o miocárdio, porém por mecanismos ainda pouco compreendidos. Objetivo: Avaliar, em um modelo experimental de DRC, o efeito da reposição de αKlotho recombinante sobre a remodelação cardíaca e potenciais mecanismos envolvidos na sua fisiopatologia. Métodos: Estudamos 46 ratos Wistar machos com 12 semanas, divididos em 3 grupos: Controle (sham), DRC e DRC+KL. Os animais foram submetidos à cirurgia (sham ou nefrectomia 5/6) e tratados da 4ª a 8ª semana com αKlotho recombinante (0.01mg/kg, SC, 48/48h) ou veículo. Na 8ª semana, foram realizados ecocardiograma e dosagem de creatinina, ureia, cálcio, fósforo, PTHi, FGF23, FGF21 e sKlotho. A remodelação miocárdica foi avaliada pela massa cardíaca, por parâmetros ecocardiográficos e de histomorfometria miocárdica. A expressão miocárdica de MHCβ e αSMA foram avaliadas por imuno-histoquímica (IHC) e qRT-PCR, enquanto o efeito sobre a expressão miocárdica de TRPC6 e FGF21 por IHC, westernblot e qRT-PCR. Resultados: Houve aumento da creatinina (Controle: 0,24±0,04 vs DRC: 0,58±0,07 e DRC+KL: 0,62±0,06mg/dl; p<0,0001) e queda de sua depuração (Controle: 2,0±0,5 vs DRC: 1,1±0,13 e DRC+KL: 1,0±0,13ml/min/100g; p<0,0001) nos grupos com DRC. Observamos também, nos grupos com DRC, aumento da fração excretada de fósforo (Controle: 8,9±1,6 vs DRC: 20,08±3,8 e DRC+KL: 24,2±5,3%; p<0,0001); de PTHi (Controle: 464,8±155,1 vs DRC: 1059,0±315,3 e DRC+KL: 1113,0±353,9pg/ml; p<0,05) e FGF23 (Controle: 129,9±28,7 vs DRC: 208,8±33,9 e DRC+KL: 200,5±32,0mg/dl; p<0,05), e redução dos níveis séricos de αKlotho (Controle: 188,4±29,67 vs DRC: 36,2±21,3 e DRC+KL: 49,2±25,6 pM; p<0,0001). Na avaliação da remodelação miocárdica, foi observado aumento da razão peso coração/tíbia (Controle: 16,7±1,0 vs DRC: 20,2±1,0mg/mm; p<0,0001) e espessura das paredes do VE: septo (Controle: 1,41±0,1 vs DRC: 1,58±0,11mm; p=0,006), parede posterior (Controle: 1,45±0,1 vs DRC: 1,54±0,1mm; p=0,01) e massa estimada do VE (Controle: 736,5±123,4 vs DRC: 883,1±128,4mg; p=0,005) nos grupos com DRC, porém com redução no grupo tratado com αKlotho: coração/tíbia (DRC: 20,2±1,0 vs DRC+KL: 17,8±0,9 mg/mm; p<0,0001), septo (DRC: 1,58±0,11 vs DRC+KL: 1,42±0,10mm; p=0,006), parede posterior (DRC: 1,54±0,1 vs DRC+KL: 1,42±0,1mm; p=0,01) e massa de VE (DRC: 883,1±128,4 vs DRC+KL: 750,4±114,8mg; p=0,005). Observou-se também redução do diâmetro dos cardiomiócitos (DRC: 21,4±0,8 vs DRC+KL: 17,7±1,0 μm; p<0,0001) e da área de fibrose intersticial (DRC: 4,0±0,53 vs DRC+KL: 2,35±0,3 %; p<0,0001) no grupo tratado em relação ao DRC sem tratamento, assim como redução na expressão de MHCβ(IHC) (DRC: 28,4±2,4 vs DRC+KL: 22,8±4,0%; p=0,002) e αSMA(IHC) (DRC: 7,2±2,7 vs DRC+KL: 2,6±0,4%; p=0,0001). Houve redução no grupo tratado da expressão de TRPC6 na membrana dos cardiomiócitos (DRC: 15,5±3,72 vs DRC+KL: 9,77±1,84 %área; p=0,001) e aumento da expressão miocárdica de FGF21 tanto a nível de mRNA (DRC: 0,73±0,19 vs DRC+KL: 0,96±0,26; 2ΔΔCT, p=0,03) como proteico (DRC: 1,25±0,11 vs DRC+KL: 1,46±0,22; UA, p=0,03) em relação ao grupo DRC sem tratamento. Conclusão: Concluímos que, em modelo experimental de DRC com perda moderada de função renal e hipertrofia cardíaca, a reposição de rKlotho, na dose e via utilizados e com racional terapêutico, apresentou efeito cardioprotetor, atenuando a remodelação miocárdica. O mecanismo deste efeito envolveu não só a redução da expressão de TRPC6 na membrana dos cardiomiócitos, como aumento da expressão miocárdica de FGF21, o que sugere a existência de um efeito do sKlotho sobre sua expressão