Efeito da dose resposta de Paracoccidioides brasiliensis no modelo experimental de artrite

A paracoccidioidomicose (PCM) é causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis (Pb) e corresponde à micose sistêmica de maior prevalência na América Latina. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a dose resposta de leveduras do fungo para padronização do modelo experimental de artrite séptica. Os experimentos foram realizados com grupos de 14 ratos que receberam doses de 103, 104 ou 105 células de P. brasiliensis (Pb18). Os fungos foram injetados em 50 µL de solução salina em tampão fosfatado (PBS) diretamente na articulação do joelho dos animais. Os seguintes parâmetros foram analisados neste trabalho: a formação de edema nos joelhos infundidos com as células das leveduras e alterações radiológicas, anatopalógicas além de titulação de anticorpos por Elisa. Após 15 dias de infecção, os sinais de inflamação foram evidentes. Aos 45 dias, algumas características de dano e necrose foram observadas na cartilagem articular. A disseminação sistêmica do fungo foi observada em 11% dos animais inoculados, concluiu-se que o modelo experimental é capaz de mimetizar a PCM articular em humanos e que a dose de 105 leveduras representa a dose padrão para o desenvolvimento do modelo.Paracoccidioidomycosis (PCM) is caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb) and corresponds to prevalent systemic mycosis in Latin America. The aim of the present work was to evaluate the dose response effect of the fungal yeast phase for the standardization of an experimental model of septic arthritis. The experiments were performed with groups of 14 rats that received doses of 103, 104 or 105 P. brasiliensis (Pb18) cells. The fungi were injected in 50 µL of phosphate-buffered saline (PBS) directly into the knee joints of the animals. The following parameters were analyzed in this work: the formation of swelling in knees infused with yeast cells and the radiological and anatomopathological alterations, besides antibody titer by ELISA. After 15 days of infection, signs of inflammation were evident. At 45 days, some features of damage and necrosis were observed in the articular cartilage. The systemic dissemination of the fungus was observed in 11% of the inoculated animals, and it was concluded that the experimental model is able to mimic articular PCM in humans and that the dose of 105 yeast cells can be used as standard in this model

EXPERIMENTAL PARACOCCIDIOIDOMYCOSIS IN PREGNANT RATS

Paracoccidioidomycosis (PCM), caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb), is the most prevalent systemic mycosis in Latin America. There are few reports in the literature about the disease damages during pregnancy and the consequences to the fetuses and breeding. This study evaluated the implications of PCM during pregnancy on offspring and mothers in Wistar rats. Groups of rats were submitted to systemic Pb infection, by intraperitoneal infusion, and mated 30 days after the infection date. Immediately after birth, rats and neonates were sacrificed to obtain organs for standard histological examination, morphometric analysis, fungi recovery by plating (CFU) and dosing of anti-Pb antibodies by ELISA. There were no stillbirths or miscarriages, however, the fetuses from infected pregnant rats had lower body and organ weight but the fertility rate was 100%. The largest number of CFU was recovered from the organ of pregnant rats, the pathological examination revealed more severe infection in the same group, further on the largest number of granulomas and fungal field. It can be concluded that the PCM was more severe in the group of pregnant rats, with implications to the weight of offspring

Versão brasileira do Richards-Campbel sleep questionnaire e sleep in the sleep in the intensive care unit questionnaire : estudo de tradução, validação e confiabilidade

Orientadora: Profª Drª Silvia Regina Valderramas.Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna e Ciências da Saúde. Defesa : Curitiba, 26/03/2019.Inclui referênciasResumo: Os transtornos do sono prevalecem em mais de 50% dos pacientes críticos, decorrentes de estímulos ambientais, intervenções médicas e de cuidados, além da própria doença aguda. Medidas objetivas como a polissonografia (PSG), são usadas para a investigação dos transtornos do sono, apesar de ser padrão-ouro, sua utilização na Unidade de Terapia Intensiva (UTI) torna-se impraticável. Instrumentos para medidas subjetivas, como os questionários, são utilizados tanto na rotina clínica quanto em protocolos de pesquisa. O Richards-Campbell Sleep Questionnaire (RCSQ) e o Sleep in the Intensive Care Unit Questionnaire (SICUQ) foram formulados na língua inglesa e direcionados para suas respectivas populações. O presente estudo teve o objetivo de traduzir, adaptar culturalmente, validar e verificar a confiabilidade do RCSQ e do SICUQ em pacientes críticos internados em UTI no Brasil. O processo de tradução e adaptação transcultural seguiu critérios metodológicos recomendados pela literatura, composto pelas seguintes etapas: tradução da versão original para a língua portuguesa; síntese das versões; retrotradução para a língua inglesa; revisão por um comitê de especialistas; versão pré-teste. O estudo ocorreu na UTI Adulto do HC/UFPR, composta por pacientes clínicos e cirúrgicos no período entre junho de 2017 a janeiro de 2018. Executou-se um estudo piloto com 11 pacientes, estabelecendo as versões finais na língua portuguesa, denominadas: Questionário de Sono Richards-Campbell (QSRC) e Questionário de Sono na UTI (QS-UTI). Os instrumentos foram utilizados por dois pesquisadores previamente treinados. Foram avaliadas a praticidade e aceitabilidade dos instrumentos, efeito piso e teto, validade de construto, consistência interna e confiabilidade interavaliadores. O estudo incluiu 50 pacientes que preencheram os critérios de inclusão. A maioria da amostra (54%) foi composta por indivíduos do sexo feminino, com média de idade em 47,7±17,5 anos e maior prevalência de internação por doenças oncológicas. Os questionários demandaram pouco tempo de aplicação (média de 85 segundos para QSRC e média de 272 segundos para o QS-UTI), sendo que todos os pacientes responderam 100% dos itens. Observou-se um efeito piso acima de 15% no QSRC (32,3%) e nos itens 6 e 7 do QS-UTI (25%); e efeito teto acima de 15% nos itens de 1 a 5 do QS-UTI (25,6%). Para a validação de construto, o grau de correlação entre os dois questionários foi de magnitude moderada (r = 0,41; p = 0,00). Os instrumentos mostraram alta consistência interna (a > 0,70) e obteve-se uma boa confiabilidade interavaliadores, com coeficiente de correlação intraclasse (CCI) de 0,84 (IC 95% 0,71 - 0,90) para o QSRC; CCI = 0,75 (IC 95% 0,55 - 0,86) para itens de 1 a 5 e CCI = 0,86 (IC 95% 0,76 - 0,92) para os itens 6 e 7 no QS-UTI. Constatou-se um baixo viés interavaliadores no QSRC e no QS-UTI (-0,77 ± 4,14 e -0,03 ± 0,64, respectivamente). Os limites de 95% de concordância variaram de -8,88 a 7,35 para o QSRC e de -1,02 a 0,83 para o QS-UTI. Conclui-se que os questionários são instrumentos válidos e confiáveis para a avaliação subjetiva da qualidade do sono em pacientes criticamente doentes internados em UTI no Brasil.Abstract: Sleep disorders prevail in more than 50% of critical patients, due to environmental stimuli, medical and care interventions, and acute illness itself. Objective measures such as polysomnography (PSG) are used for the investigation of sleep disorders, although it is a gold standard, its use in the Intensive Care Unit (ICU) becomes impractical. Instruments for subjective measures, such as questionnaires, are used both in clinical routine and in research protocols. The Richards-Campbell Sleep Questionnaire (RCSQ) and Sleep in the Intensive Care Unit Questionnaire (SICUQ) were formulated in English and targeted to their respective populations. The purpose of this study was to translate, culturally adapt, validate and verify the reliability of the RCSQ and the SICUQ in critically ill ICU patients in Brazil. The process of translation and cross-cultural adaptation followed methodological criteria recommended by the literature, composed of the following steps: translation of the original Portuguese version; synthesis of the versions; back-translation into the English language; review by a committee of experts; version. The study was carried out in the HC / UFPR Adult ICU, composed of clinical and surgical patients between June 2017 and January 2018. A pilot study was carried out with 11 patients, establishing the final Portuguese language versions, called: Richards-Campbell Sleep (QSRC) and ICU Sleep Questionnaire (QS-UTI). The instruments were used by two previously trained researchers. The practicality and acceptability of the instruments, floor and ceiling effect, construct validity, internal consistency and interrater reliability were evaluated. The study included 50 patients who met the inclusion criteria. The majority of the sample (54%) was composed of female individuals, with mean age of 47.7 ± 17.5 years and higher prevalence of hospitalization for oncological diseases. The questionnaires demanded little time of application (average of 85 seconds for QSRC and average of 272 seconds for QS-UTI), and all patients answered 100% of the items. There was a tread effect above 15% in the QSRC (32.3%) and in the items 6 and 7 of the QS-ICU (25%); and ceiling effect above 15% in items 1 to 5 of the QS-ICU (25.6%). For construct validation, the degree of correlation between the two questionnaires was of moderate magnitude (r = 0.41, p = 0.00). The instruments showed high internal consistency (a> 0.70) and a good inter-rater reliability, with an intraclass correlation coefficient (ICC) of 0.84 (IC 95% 0.71 - 0.90) was obtained for the QSRC; CCI = 0.75 (95% CI 0.55-0.86) for items from 1 to 5 and ICC = 0.86 (95% CI 0.76-0.92) for items 6 and 7 in QS- ICU. We found a low bias inter-evaluators in QSRC and QS-UTI (-0.77 ± 4.14 and -0.03 ± 0.64, respectively). The 95% agreement limits ranged from -8.88 to 7.35 for the QSRC and from -1.29 to 1.22 for the QS-ICU. It is concluded that the questionnaires are valid and reliable instruments for the subjective evaluation of sleep quality in critically ill patients hospitalized in ICUs in Brazil

EXPERIMENTAL PARACOCCIDIOIDOMYCOSIS IN PREGNANT RATS

Paracoccidioidomicose (PCM), causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis (Pb) é a micose sistêmica de maior prevalência na América Latina. Há poucos relatos na literatura sobre os danos da doença durante a gestação e as alterações para os conceptos e reprodutoras. O estudo avaliou as implicações da PCM durante o período gestacional sobre a prole e genitora em ratas Wistar. Grupos de ratas foram submetidos à infecção sistêmica por Pb, por meio de infusão intraperitoneal e acasaladas, 30 dias após a data da infecção. Imediatamente após o nascimento, as ratas e neonatos foram sacrificados para obtenção dos órgãos para exames histológicos padrão, análise de morfometria, recuperação de fungos por plaqueamento (UFC) e dosagem de anticorpos anti-Pb por ELISA. Não houve natimortos ou abortos, porém, os conceptos advindos de prenhas infectadas apresentaram menor peso corporal e dos órgãos, entre os grupos e a taxa de fecundidade foi de 100%. O maior número de UFC foi recuperado dos órgãos das ratas prenhas, o exame anátomo-patológico revelou infeção mais grave, no mesmo grupo, além do maior número de granulomas e fungos por campo. Pode-se concluir que a PCM ocorreu de modo mais grave no grupo de ratas prenhas, com implicações sobre o peso da prole.Paracoccidioidomycosis (PCM), caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb), is the most prevalent systemic mycosis in Latin America. There are few reports in the literature about the disease damages during pregnancy and the consequences to the fetuses and breeding. This study evaluated the implications of PCM during pregnancy on offspring and mothers in Wistar rats. Groups of rats were submitted to systemic Pb infection, by intraperitoneal infusion, and mated 30 days after the infection date. Immediately after birth, rats and neonates were sacrificed to obtain organs for standard histological examination, morphometric analysis, fungi recovery by plating (CFU) and dosing of anti-Pb antibodies by ELISA. There were no stillbirths or miscarriages, however, the fetuses from infected pregnant rats had lower body and organ weight but the fertility rate was 100%. The largest number of CFU was recovered from the organ of pregnant rats, the pathological examination revealed more severe infection in the same group, further on the largest number of granulomas and fungal field. It can be concluded that the PCM was more severe in the group of pregnant rats, with implications to the weight of offspring

Efeito da dose resposta de Paracoccidioides brasiliensis no modelo experimental de artrite

Paracoccidioidomycosis (PCM) is caused by the dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis (Pb) and corresponds to prevalent systemic mycosis in Latin America. The aim of the present work was to evaluate the dose response effect of the fungal yeast phase for the standardization of an experimental model of septic arthritis. The experiments were performed with groups of 14 rats that received doses of 103, 104 or 105 P. brasiliensis (Pb18) cells. The fungi were injected in 50 µL of phosphate-buffered saline (PBS) directly into the knee joints of the animals. The following parameters were analyzed in this work: the formation of swelling in knees infused with yeast cells and the radiological and anatomopathological alterations, besides antibody titer by ELISA. After 15 days of infection, signs of inflammation were evident. At 45 days, some features of damage and necrosis were observed in the articular cartilage. The systemic dissemination of the fungus was observed in 11% of the inoculated animals, and it was concluded that the experimental model is able to mimic articular PCM in humans and that the dose of 105 yeast cells can be used as standard in this model.A paracoccidioidomicose (PCM) é causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis (Pb) e corresponde à micose sistêmica de maior prevalência na América Latina. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a dose resposta de leveduras do fungo para padronização do modelo experimental de artrite séptica. Os experimentos foram realizados com grupos de 14 ratos que receberam doses de 103, 104 ou 105 células de P. brasiliensis (Pb18). Os fungos foram injetados em 50 µL de solução salina em tampão fosfatado (PBS) diretamente na articulação do joelho dos animais. Os seguintes parâmetros foram analisados neste trabalho: a formação de edema nos joelhos infundidos com as células das leveduras e alterações radiológicas, anatopalógicas além de titulação de anticorpos por Elisa. Após 15 dias de infecção, os sinais de inflamação foram evidentes. Aos 45 dias, algumas características de dano e necrose foram observadas na cartilagem articular. A disseminação sistêmica do fungo foi observada em 11% dos animais inoculados, concluiu-se que o modelo experimental é capaz de mimetizar a PCM articular em humanos e que a dose de 105 leveduras representa a dose padrão para o desenvolvimento do modelo.Universidade Estadual do Oeste do Paraná Centro de Ciências Biológicas e da SaúdeUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Imunologia e Parasitologia Departamento de MicrobiologiaUniversidade Estadual do Oeste do Paraná Hospital Universitário do Oeste do Paraná Centro de Ciências Médicas e FarmacêuticasUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de PatologiaUNIFESP, Imunologia e Parasitologia Depto. de MicrobiologiaUNIFESP, Depto. de PatologiaSciEL