Caracterización molecular de Mycobacterium tuberculosis multidrogoresistente en la República de Panamá años : 2002-2004

Introducción: La tuberculosis (TB) ha reaparecido como una de las principales causas de muerte en todo el mundo con casi 3 millones de decesos anuales. La utilización de marcadores biológicos para el estudio de la epidemiología de las enfermedades infecciosas constituye una herramienta importante para la comprensión de la dinámica de transmisión del M tuberculosis. En nuestro estudio caracterizamos aislados de TB MDR durante el período 2002 2004 por DRE PCR. Metodología: En el presente estudio fueron analizados 231 aislados de Mycobacterium tuberculosis y se les realizó la prueba de sensibilidad a los antifimicos de acuerdo al método de las proporciones (Canetti et al). Una vez hecho esto fueron seleccionados los aislados resistentes al menos a Rifampicina e Isoniazida (MDR). El DNA fue purificado por el método de CTA13/NaC1 y posteriormente cuantificado por espectrofotometría a 260nm. El DNA extraido de las cepas de TB-MDR, fue analizado utilizando un protocolo de DRE PCR modificado (Friedman et al Montoro el al). Los patrones moleculares y los grupos o clusters fueron confirmados por L56110 RFLP (Van Embden et al). Resultados: Los estudios de sensibilidad mostraron que 37 de 231 aislados (16%) resultaron resistentes a lsoniazida (INH) y a Rifampicina (RFP) o a más drogas del tratamiento. El 405% de los pacientes con TB-MDR en el estudio presentaron el perfil de resistencia INII, RFP y SM. Por medio de la caracterización molecular fueron obtenidos 15 diferentes patrones de DRE PCR agrupados en 6 grupos o clusters de 2-8 bandas en promedio. El 91 8% (34/37) de los aislados fue agrupado dentro de un cluster mientras que solo el 12% (3/37) presento patrones unicos. Los patrones obtenidos por DRE-PCR fueron confirmados por la técnica de Referencia 196110-RFLP a excepción del cluster A donde 2 aislados miembros de éste cluster pasaron a formar parte de un nuevo cluster. Por otro lado el patrón unico G por DRE PCFt, fue identificado como miembro del cluster E por 156110 RFLP Conclusión: Existe un alto porcentaje de agrupamiento o clustering entre los aislados de MDR TB en Panamá. Por medio del DRE PCFt, pudimos confirmar nexos epidemiológicos entre algunos pacientes que son miembros de un cluster. Demostramos la utilidad del DRE-PCR como herramienta adicional para estudios epidemiológicos del Mycobacternan tuberculosis MDR en Panamá