305 research outputs found

    Desenvolvimento de um método rápido, eficiente e de baixo custo para extração de DNA de artrópodos.

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    Aqui, é apresentado um método rápido e eficiente para obtenção de DNA de boa qualidade a partir de pequenas amostras de tecidos de artrópodos, gerando pequenas quantidades de resíduos perigosos. Comparamos a eficiência do método com outro protocolo caseiro utilizando fenol e com dois kits comerciais. A qualidade do DNA obtido foi verificada em espectrofotômetro e avaliada por um ensaio de AFLP. Foi obtido DNA pouco fragmentado a partir de todas as amostras, mas as melhores leituras foram obtidas para o DNA extraído com o novo método. O ensaio de AFLP indicou que os DNAs obtidos estavam adequados para uso em técnicas de biologia molecular sensíveis a contaminantes. Porém, os protocolos caseiros foram mais eficientes em extrair DNA do que kits comerciais, sem perder nenhuma qualidade na pureza das amostras. Além disso, eles foram mais rápidos e baratos, chegando a custar dez vezes menos que os kits comerciais. O protocolo mais rápido, menos poluente e mais barato foi o descrito aqui (USD 0,52 por amostra)

    Identificação varietal e genotipagem: serviços oferecidos pelo Laboratório de Biologia Molecular da Embrapa Uva e Vinho.

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    bitstream/CNPUV/8148/1/cot064.pd

    Captação de Fucsina ácida em gemas de macieira em diferentes estádios de dormência.

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    No presente trabalho, avaliou-se a fucsina como indicadora do estádio de dormência, objetivando otimizar um método para aplicação e avaliação do corante nos tecidos, paralelamente com a obtenção de resultados de brotação forçada.Resumo

    Estudo estrutural e funcional do gene VvAGL11 e seu papel na morfogênese de sementes de Vitis vinifera.

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    O objetivo deste trabalho foi caracterizar estruturalmente a sequência codificadora de VvAGL11 e avaliar sua funcionalidade na morfogênese de sementes, por meio da complementação do mutante 'Seedstick' (stk) de Arabidopsis thaliana

    Thermoconditional modulation of the pleiotropic sensitivity phenotype by the Saccharomyces cerevisiae PRP19 mutant allele pso4-1

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    The conditionally-lethal pso4-1 mutant allele of the spliceosomal-associated PRP19 gene allowed us to study this gene’s influence on pre-mRNA processing, DNA repair and sporulation. Phenotypes related to intron-containing genes were correlated to temperature. Splicing reporter systems and RT–PCR showed splicing efficiency in pso4-1 to be inversely correlated to growth temperature. A single amino acid substitution, replacing leucine with serine, was identified within the N-terminal region of the pso4-1 allele and was shown to affect the interacting properties of Pso4-1p. Amongst 24 interacting clones isolated in a two-hybrid screening, seven could be identified as parts of the RAD2, RLF2 and DBR1 genes. RAD2 encodes an endonuclease indispensable for nucleotide excision repair (NER), RLF2 encodes the major subunit of the chromatin assembly factor I, whose deletion results in sensitivity to UVC radiation, while DBR1 encodes the lariat RNA splicing debranching enzyme, which degrades intron lariat structures during splicing. Characterization of mutagen-sensitive phenotypes of rad2{Delta}, rlf2{Delta} and pso4-1 single and double mutant strains showed enhanced sensitivity for the rad2{Delta} pso4-1 and rlf2{Delta} pso4-1 double mutants, suggesting a functional interference of these proteins in DNA repair processes in Saccharomyces cerevisiae
    corecore