Standardization of a protocol to extract and analyze chlorophyll a and carotenoids in Gracilaria tenuistipitata Var. Liui. Zhang and Xia (Rhodophyta)

Chlorophyll a and carotenoids are important pigments in photosynthesis. Several studies have been published describing extraction and analysis protocols of these pigments, mainly in vascular plant species. This study standardizes an extraction and analysis protocol of these substances in Gracilaria tenuistipitata var. liui, a red seaweed. Apical portions grown in vitro were triturated in liquid nitrogen. Extracts were prepared in 1.5 mL solvent and centrifuged. Quantitative and qualitative analyses of pigments were performed by UV/visible light spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC) and HPLC coupled to mass spectrometry (HPLC-MS). The parameters assessed were: minimum biomass, best extraction solvent, and number of extraction steps. Methanol was the most efficient solvent, and 50 mg fresh biomass was the amount of sample indicated, submitted to one single extraction step. No significant differences were observed in levels of these pigments by UV-visible light spectrophotometry and HPLC. However, HPLC or HPLC-MS are required to identify the different carotenoids present in this seaweed species.Clorofila a e carotenoides são importantes pigmentos da fotossíntese. Na literatura são encontrados vários protocolos de extração e análise desses pigmentos utilizando, principalmente, plantas vasculares. O objetivo deste estudo foi padronizar uma metodologia de extração e análise dessas substâncias em uma macroalga vermelha, Gracilaria tenuistipitata var. liui. Amostras de talos gametofíticos cultivados in vitro foram trituradas em nitrogênio líquido, extraídas em 1,5 mL de solvente, centrifugadas e os pigmentos analisados quantitativamente e qualitativamente através de espectrofotometria de UV/visível, cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) e CLAE-acoplada a espectrometria de massas (CLAE-EM). Foram testados os parâmetros massa mínima, solvente para extração e número de extrações. Dentre os solventes testados, o metanol foi o mais eficiente, sendo 50mg de material fresco a massa mínima indicada para ser submetida a somente uma extração. Não foram encontradas diferenças significativas na quantificação desses pigmentos comparando-se os dados obtidos em espectrofotometria de UV/visível com os de CLAE. No entanto, para a identificação dos diferentes carotenoides e suas quantificações são necessárias CLAE ou CLAE-EM.The authors thank FAPESP (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) for their financial support (2010/02948-3), and CNPq (Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico) for PBT fellowship

STANDARDIZATION OF A PROTOCOL TO EXTRACT AND ANALYZE CHLOROPHYLL A AND CAROTENOIDS IN Gracilaria tenuistipitata VAR. LIUI. ZHANG AND XIA (RHODOPHYTA)

A B S T R A C T Chlorophyll a and carotenoids are important pigments in photosynthesis. Several studies have been published describing extraction and analysis protocols of these pigments, mainly in vascular plant species. This study standardizes an extraction and analysis protocol of these substances in Gracilaria tenuistipitata var. liui, a red seaweed. Apical portions grown in vitro were triturated in liquid nitrogen. Extracts were prepared in 1.5 mL solvent and centrifuged. Quantitative and qualitative analyses of pigments were performed by UV/visible light spectrophotometry and high performance liquid chromatography (HPLC) and HPLC coupled to mass spectrometry (HPLC-MS). The parameters assessed were: minimum biomass, best extraction solvent, and number of extraction steps. Methanol was the most efficient solvent, and 50 mg fresh biomass was the amount of sample indicated, submitted to one single extraction step. No significant differences were observed in levels of these pigments by UV-visible light spectrophotometry and HPLC. However, HPLC or HPLC-MS are required to identify the different carotenoids present in this seaweed species. R E S U M O Clorofila a e carotenoides são importantes pigmentos da fotossíntese. Na literatura são encontrados vários protocolos de extração e análise desses pigmentos utilizando, principalmente, plantas vasculares. O objetivo deste estudo foi padronizar uma metodologia de extração e análise dessas substâncias em uma macroalga vermelha, Gracilaria tenuistipitata var. liui. Amostras de talos gametofíticos cultivados in vitro foram trituradas em nitrogênio líquido, extraídas em 1,5 mL de solvente, centrifugadas e os pigmentos analisados quantitativamente e qualitativamente através de espectrofotometria de UV/visível, cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) e CLAE-acoplada a espectrometria de massas (CLAE-EM). Foram testados os parâmetros massa mínima, solvente para extração e número de extrações. Dentre os solventes testados, o metanol foi o mais eficiente, sendo 50mg de material fresco a massa mínima indicada para ser submetida a somente uma extração. Não foram encontradas diferenças significativas na quantificação desses pigmentos comparando-se os dados obtidos em espectrofotometria de UV/visível com os de CLAE. No entanto, para a identificação dos diferentes carotenoides e suas quantificações são necessárias CLAE ou CLAE-EM

O ensino dos sistemas fisiológicos por meio de uma abordagem integradora: um enfoque na interdisciplinaridade / The teaching of physiological systems through an integrative approach: a focus on interdisciplinarity

O assunto de fisiologia humana é um dos mais acometidos com a falta de metodologias integradoras, uma vez que seus conteúdos são tradicionalmente divididos em sistemas. No entanto, esse tipo de abordagem pode favorecer acompreensão contrária ao que se sabe atualmente no meio científico, ou seja, os discentes subentendem que o organismo funciona de forma segmentada, sem as devidas interações que garantem o bom funcionamento do mesmo. Soma-se a isso, o fato que muitos dos educandos apresentarem relativa dificuldade em associar os termos científicos presentes no assunto às suas funções. Tais dificuldades podem estar atreladas a falta de competências básicas de leitura e interpretação, comum a realidade de muitos educandos e que compromete o processo de ensino- aprendizagem dos mesmos. A fim de reverter este cenário, o presente trabalho buscou, através de metodologias lúdicas e de fácil associação, propiciar o ensino dos sistemas morfofisiológicos do corpo humano de forma integradora e estimular a leitura e interpretação dos alunos. Para tanto, foi aplicada uma sequência didática utilizando modelização e jogos, a fim de facilitar o entendimento, trazendo o conteúdo para perto da realidade do educando. Verificamos que a utilização de estratégias metodológicas diversificadas possibilitou trabalhar melhor os conteúdos de fisiologia humana, integrando os sistemas de forma a permitir que os discentes compreendam funcionamento dos sistemas do corpo humano de forma integrada

O ensino dos sistemas fisiológicos por meio de uma abordagem integradora: um enfoque na interdisciplinaridade / The teaching of physiological systems through an integrative approach: a focus on interdisciplinarity

O assunto de fisiologia humana é um dos mais acometidos com a falta de metodologias integradoras, uma vez que seus conteúdos são tradicionalmente divididos em sistemas. No entanto, esse tipo de abordagem pode favorecer acompreensão contrária ao que se sabe atualmente no meio científico, ou seja, os discentes subentendem que o organismo funciona de forma segmentada, sem as devidas interações que garantem o bom funcionamento do mesmo. Soma-se a isso, o fato que muitos dos educandos apresentarem relativa dificuldade em associar os termos científicos presentes no assunto às suas funções. Tais dificuldades podem estar atreladas a falta de competências básicas de leitura e interpretação, comum a realidade de muitos educandos e que compromete o processo de ensino- aprendizagem dos mesmos. A fim de reverter este cenário, o presente trabalho buscou, através de metodologias lúdicas e de fácil associação, propiciar o ensino dos sistemas morfofisiológicos do corpo humano de forma integradora e estimular a leitura e interpretação dos alunos. Para tanto, foi aplicada uma sequência didática utilizando modelização e jogos, a fim de facilitar o entendimento, trazendo o conteúdo para perto da realidade do educando. Verificamos que a utilização de estratégias metodológicas diversificadas possibilitou trabalhar melhor os conteúdos de fisiologia humana, integrando os sistemas de forma a permitir que os discentes compreendam funcionamento dos sistemas do corpo humano de forma integrada

Socio-demographic patterns of public, private and active travel in Latin America: cross-sectional findings from the ELANS study

Background: Active travel such as walking or cycling has been associated with more favorable health outcomes. However, evidence on patterns of transportation in Latin America is scarce. Therefore, the aim of this study was to quantify and characterise socio-demographic patterns of public, private and active travel in Latin American countries. Methods: Data from the Latin American Study of Nutrition and Health, a population-based, cross-sectional survey conducted in eight Latin American countries including Argentina, Brazil, Chile, Colombia, Costa Rica, Ecuador, Peru and Venezuela (n = 9218; age range: 15–65 years). Transportation modes include public (bus, taxi, subway and train), private (car and motorcycle) and active (walking and/or cycling). Outcomes for this study include time spent in different modes of transportation. We performed overall and country-specific descriptive analyses to examine differences by sex, age, socioeconomic and education level. Results: For the overall cohort, public transport represent 34.9% of the total travel time, whereas private, walking and cycling represent 48.2%, 10.6% and 6.3% of the total travel time. Time spent using public travel was highest in Venezuela (48.4%); Peru had the highest proportions of private travel (52.5%); Time spent walking and cycling was highest in Costa Rica (14.8% and 12.2%, respectively). The average travel time spent in public and private transport were 299.5 min/week (95% CI: 292.4307.0) and 379.6 min/week (95% CI: 368.0, 391.5) respectively; figures for walking and cycling were 186.9 min/week (95% CI: 181.8, 191.9) and 201.1 min/week (95% CI: 187.8, 216.9). Conclusions: Public and private transport were the most common forms of travel in Latin America. Active travel (walking or cycling) represent 17% of total physical activity, therefore, promoting and providing the right infrastructure for active commuting could translate in increasing the population overall levels of physical activity in Latin America

Erythrina velutina Willd. alkaloids : piecing biosynthesis together from transcriptome analysis and metabolite profiling of seeds and leaves

Introduction: Natural products of pharmaceutical interest often do not reach the drug market due to the associated low yields and difficult extraction. Knowledge of biosynthetic pathways is a key element in the development of biotechnological strategies for plant specialized metabolite production. Erythrina species are mainly used as central nervous system depressants in folk medicine and are important sources of bioactive tetracyclic benzylisoquinoline alkaloids (BIAs), which can act on several pathology-related biological targets. Objectives: In this sense, in an unprecedented approach used with a non-model Fabaceae species grown in its unique arid natural habitat, a combined transcriptome and metabolome analyses (seeds and leaves) is presented. Methods: The Next Generation Sequencing-based transcriptome (de novo RNA sequencing) was carried out in a NextSeq 500 platform. Regarding metabolite profiling, the High-resolution Liquid Chromatography was coupled to DAD and a micrOTOF-QII mass spectrometer by using electrospray ionization (ESI) and Time of Flight (TOF) analyzer. The tandem MS/MS data were processed and analyzed through Molecular Networking approach. Results: This detailed macro and micromolecular approach applied to seeds and leaves of E. velutina revealed 42 alkaloids, several of them unique. Based on the combined evidence, 24 gene candidates were put together in a putative pathway leading to the singular alkaloid diversity of this species. Conclusion: Overall, these results could contribute by indicating potential biotechnological targets formodulation of erythrina alkaloids biosynthesis as well as improve molecular databases with omic data from a non-model medicinal plant, and reveal an interesting chemical diversity of Erythrina BIA harvested in Caatinga

O uso de tecnologias alternativas para implantação de horta agroecológica na escola de governo cardeal Dom Eugênio de Araújo Sales / RN / The use of alternative technologies for implantation of agroecological garden in Cardinal Dom Eugênio de Araújo Sales School Sales / RN

O uso de tecnologias alternativas capazes de viabilizar a produção de uma horta livre de agrotóxicos, ou seja, de base agroecológica, utilizando defensivos alternativos, é um método exequível que beneficia não só o meio ambiente, como também o ser humano, uma vez que propicia uma alimentação saudável, baseada em orgânicos. O cultivo orgânico é um sistema de produção agrícola ecológico e sustentável, baseado na preservação e no respeito à terra, ao meio ambiente e ao homem.  Esta prática é capaz, ainda, de promover terapia ocupacional para os servidores, considerando que suas mentes podem correlacionar o ato de mexer diretamente com a terra e o plantio de hortaliças a algo agradável, principalmente quando observam os frutos, o que por sua vez, podem levá-los a desenvolver o hábito de consumir aquilo que plantam, acrescentando-lhes uma boa qualidade de vida a partir do valor nutricional encontrada nesses alimentos. Diante disso, este projeto foi desenvolvido na Escola de Governo Cardeal Dom Eugênio de Araújo Sales, no Estado do Rio Grande do Norte, com a finalidade de promover a educação ambiental e ressaltar a necessidade de conscientizar as pessoas à produzir de maneira sustentável, utilizando os recursos de forma que não prejudique o meio ambiente, além de proporcionar uma boa alimentação, considerando a qualidade nutricional dos alimentos e ainda, dispor de um espaço favorecendo a terapia ocupacional dos mesmo. Para isso, foi apresentado duas palestras com os temas Educação Ambiental e Produção de Horta Agroecológica, respectivamente

Erythrina velutina Willd. alkaloids: Piecing biosynthesis together from transcriptome analysis and metabolite profiling of seeds and leaves

Introduction: Natural products of pharmaceutical interest often do not reach the drug market due to the associated low yields and difficult extraction. Knowledge of biosynthetic pathways is a key element in the development of biotechnological strategies for plant specialized metabolite production. The scarce studies regarding non-model plants impair advances in this field. Erythrina spp. are mainly used as central nervous system depressants in folk medicine and are important sources of bioactive tetracyclic benzylisoquinoline alkaloids, which can act on several pathology-related biological targets. Objective: Herein the purpose is to employ combined transcriptome and metabolome analyses (seeds and leaves) of a non-model medicinal Fabaceae species grown in its unique arid natural habitat. The study tries to propose a putative biosynthetic pathway for the bioactive alkaloids by using an omic integrated approach. Methods: The Next Generation Sequencing-based transcriptome (de novo RNA sequencing) was carried out in a Illumina NextSeq 500 platform. Regarding the targeted metabolite profiling, Nuclear Magnetic Resonance and the High-Performance Liquid Chromatography coupled to a micrOTOF-QII, High Resolution Mass Spectrometer, were used. Results: This detailed macro and micromolecular approach applied to seeds and leaves of E. velutina revealed 42 alkaloids by metabolome tools. Based on the combined evidence, 24 gene candidates were put together in a putative pathway leading to the singular alkaloid diversity of this species. Conclusion: These results contribute by indicating potential biotechnological targets Erythrina alkaloids biosynthesis as well as to improve molecular databases with omic data from a non-model medicinal plant. Furthermore, they reveal an interesting chemical diversity in Erythrina velutina harvested in Caatinga. Last, but not least, this data may also contribute to tap Brazilian biodiversity in a rational and sustainable fashion, promoting adequate public policies for preservation and protection of sensitive areas within the Caatinga

Association between Zika virus infection and microcephaly in Brazil, January to May, 2016: preliminary report of a case-control study.

BACKGROUND: The microcephaly epidemic, which started in Brazil in 2015, was declared a Public Health Emergency of International Concern by WHO in 2016. We report the preliminary results of a case-control study investigating the association between microcephaly and Zika virus infection during pregnancy. METHODS: We did this case-control study in eight public hospitals in Recife, Brazil. Cases were neonates with microcephaly. Two controls (neonates without microcephaly), matched by expected date of delivery and area of residence, were selected for each case. Serum samples of cases and controls and cerebrospinal fluid samples of cases were tested for Zika virus-specific IgM and by quantitative RT-PCR. Laboratory-confirmed Zika virus infection during pregnancy was defined as detection of Zika virus-specific IgM or a positive RT-PCR result in neonates. Maternal serum samples were tested by plaque reduction neutralisation assay for Zika virus and dengue virus. We estimated crude odds ratios (ORs) and 95% CIs using a median unbiased estimator for binary data in an unconditional logistic regression model. We estimated ORs separately for cases with and without radiological evidence of brain abnormalities. FINDINGS: Between Jan 15, 2016, and May 2, 2016, we prospectively recruited 32 cases and 62 controls. 24 (80%) of 30 mothers of cases had Zika virus infection compared with 39 (64%) of 61 mothers of controls (p=0·12). 13 (41%) of 32 cases and none of 62 controls had laboratory-confirmed Zika virus infection; crude overall OR 55·5 (95% CI 8·6-∞); OR 113·3 (95% CI 14·5-∞) for seven cases with brain abnormalities; and OR 24·7 (95% CI 2·9-∞) for four cases without brain abnormalities. INTERPRETATION: Our data suggest that the microcephaly epidemic is a result of congenital Zika virus infection. We await further data from this ongoing study to assess other potential risk factors and to confirm the strength of association in a larger sample size. FUNDING: Brazilian Ministry of Health, Pan American Health Organization, and Enhancing Research Activity in Epidemic Situations

DOENÇA TROFOBLÁSTICA GESTACIONAL: ASPECTOS FISIOPATOLÓGICOS E TRATAMENTO

In this literature review, the general objective is to provide a comprehensive and updated analysis of the pathophysiological aspects and treatment of Gestational Trophoblastic Disease (GTD). The specific objectives seek to present a critical discussion of the results found to inform health professionals and contribute to more effective approaches in the management of this clinical condition, in addition to increasing awareness about GTD and improving emotional and psychosocial support for women facing this disease. GTD is a rare but serious condition that requires accurate diagnosis and a multidisciplinary approach. The main initial detection methods are serum hCG measurement and ultrasound, with histopathological analysis of endometrial biopsy necessary for diagnostic confirmation. The type of DTG identified is crucial in determining the most appropriate therapeutic approach. Treatment involves surgery to remove the molar placenta in complete hydatidiform moles and chemotherapy for choriocarcinoma and trophoblastic tumor of the placental site, generally presenting positive results with high remission and cure rates, although long-term follow-up is essential to detect recurrences. and complications. In addition to the pathophysiological and therapeutic aspects, emotional and psychological support is essential throughout the treatment and recovery process, considering the significant impact on patients' emotional health. Knowledge gaps were identified in the reviewed literature, highlighting the need for additional research to deepen the understanding of GTD, including risk factors, pathogenesis, more accurate biomarkers and new therapeutic approaches, in order to improve the management and prognosis of the disease. In conclusion, this bibliographical review contributes to the knowledge of GTD, highlighting its characteristics, diagnosis and treatment, and emphasizes the importance of a multidisciplinary approach to ensure adequate care, considering clinical, emotional and practical aspects of patients, in addition to encouraging new research to improve the care of these women facing this complex condition.Neste trabalho de revisão bibliográfica, o objetivo geral é fornecer uma análise abrangente e atualizada dos aspectos fisiopatológicos e tratamento da Doença Trofoblástica Gestacional (DTG). Os objetivos específicos buscam apresentar uma discussão crítica dos resultados encontrados para informar profissionais de saúde e contribuir com abordagens mais eficazes no manejo dessa condição clínica, além de aumentar a conscientização sobre a DTG e melhorar o suporte emocional e psicossocial às mulheres enfrentando essa doença. A DTG é uma condição rara, mas grave, que requer diagnóstico preciso e abordagem multidisciplinar. Os principais métodos de detecção inicial são a dosagem sérica de hCG e a ultrassonografia, sendo a análise histopatológica de biópsia endometrial necessária para confirmação diagnóstica. O tipo de DTG identificado é crucial para determinar a abordagem terapêutica mais adequada. O tratamento envolve cirurgia para remoção da placenta molar em molas hidatiformes completas e quimioterapia para o coriocarcinoma e o tumor trofoblástico do sítio placentário, apresentando geralmente resultados positivos com altas taxas de remissão e cura, embora o acompanhamento a longo prazo seja essencial para detecção de recorrências e complicações. Além dos aspectos fisiopatológicos e terapêuticos, o suporte emocional e psicológico é fundamental durante todo o processo de tratamento e recuperação, considerando o impacto significativo na saúde emocional das pacientes. Identificaram-se lacunas de conhecimento na literatura revisada, ressaltando a necessidade de pesquisas adicionais para aprofundar a compreensão da DTG, incluindo fatores de risco, patogênese, biomarcadores mais precisos e novas abordagens terapêuticas, a fim de melhorar o manejo e o prognóstico da doença. Em conclusão, esta revisão bibliográfica contribui para o conhecimento da DTG, destacando suas características, diagnóstico e tratamento, e enfatiza a importância de uma abordagem multidisciplinar para garantir cuidado adequado, considerando aspectos clínicos, emocionais e práticos das pacientes, além de incentivar novas pesquisas para aprimorar o cuidado dessas mulheres enfrentando essa condição complexa