Alteraciones neuroinmunes inducidas por exposición a estrés prenatal. Participación de citoquinas y neurotrofinas. Influencia del sexo de la cría

Tesis para obtener el grado de Doctor en área de Ciencias Biológicas, de la Universidad de Buenos Aires, en 2015.En el presente trabajo estudiamos el efecto del estrés prenatal (EP) en la respuesta neuroinmune en animales adultos. Observamos que machos y hembras respondieron diferente ante el EP, tanto a nivel inmunológico como comportamental. Los machos presentan una mayor respuesta inmune innata en relación a una mayor secreción de IFN-γ. Las hembras presentan algunos trastornos conductuales asociados posiblemente a una disminución de BDNF así como también a un aumento central y periférico de IL-4 y a una disminución periférica de IFN-γ. Ante nuevas situaciones de estrés en la adultez observamos que, las hembras EP tienen una respuesta inmune desmejorada ante situaciones de estrés agudo y un peor desempeño en aquellas pruebas que evalúan la memoria espacial al ser expuestas a estrés crónico. Las alteraciones inmunológicas podrían estar relacionadas con una disminución del balance Th1/Th2 y un mayor efecto inhibitorio de los glucocorticoides. Los trastornos conductuales podrían estar asociados a una disminución del BNDF y a un aumento de los receptores a GC en hipocampo inducidos por EP. Los machos EP expuestos a estrés en la adultez presentan un aumento en la respuesta inmune innata que estaría relacionado con un aumento en los niveles de IFN-γ. Sin embargo, tienen una disminución en la inmunidad adaptativa, que al igual que las hembras, tendría relación con el mayor efecto inhibitorio ejercido por la corticosterona. Por otro lado, en los machos tanto controles como EP, la exposición a estrés agudo o crónico no indujo alteraciones importantes en las pruebas comportamentales realizadas. Los resultados encontrados nos permiten concluir que el estrés materno induce cambios neuroinmunes en las crías que se pondrían especialmente en evidencia cuando estos individuos deben enfrentarse a nuevas situaciones de estrés en la adultez, siendo las hembras más sensibles que los machos. Además, hallamos que los cambios inducidos por exposición a EP se dan paralelamente en el hipocampo y en las células del sistema inmune. Podría entonces sugerirse que estas células pueden ser indicadores periféricos de una mayor susceptibilidad a padecer trastornos al ser expuestos a nuevas situaciones de estrés en la adultez.In the present work we studied the effect of prenatal stress (PS) in the neuroimmune response in adult animals. We observed a different response to PS between male and female, regarding immune and behaviour parameters. Male mice showed higher innate immune response evidenced by the increase in NK activity, possibly because of a higher release of IFN-γ. Female mice presented some behavioural disorders associated to a decrease in BDNF, as well as to an increase in central and peripheric IL-4 and to a peripherical decrease of IFN-γ. In a new stressful situation in adult life, female PS present a reduced immune response caused by acute stress and a worse performance in spatial memory test caused by chronic stress. Immunologic alterations could be related to a decrease in the Th1/Th2 balance and to a higher inhibitory effect of glucocorticoids. Behavioural disorders could be associated to a decrease in BDNF and to a increase of hippocampal GC receptors induced by PS. PS male mice exposed to adult stress showed an increase in innate immune response which could be related to an increase in IFN-γ levels. However, they have a reduction in adaptative immune response, which as in the female, could be related to the higher corticosterone inhibitory effect. Also, in control and PS males no changes in behaviour tasks were caused by acute or chronic stress. In conclusion, prenatal stress induce neuroimmune changes in the offspring that could be evidenced specially when the individuals are exposed to a new stressful situation in the adult life, being female more vulnerable than male mice. Furthermore, we found that changes induced by PS exposure occur simoultaneusly in hippocampus and in immune cells. We could suggest that these cells could be peripheral markers of susceptibility to deletereous effects of stress exposure in the adult life.Instituto de GenéticaFil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Genetic analysis of environmental strains of the plant pathogen Phytophthora capsici reveals heterogeneous repertoire of effectors and possible effector evolution via genomic island

Phytophthora capsici is a virulent oomycete pathogen of many vegetable crops. Recently, it has been demonstrated that the recognition of the RXLR effector AVR3a1 of P. capsici (PcAVR3a1) triggers a hypersensitive response and plays a critical role in mediating non-host resistance. Here, we analyzed the occurrence of PcAVR3a1 in 57 isolates of P. capsici derived from globe squash, eggplant, tomato and bell pepper cocultivated in a small geographical area. The occurrence of PcAVR3a1 in environmental strains of P. capsici was confirmed by PCR in only 21 of these pathogen isolates. To understand the presence-absence pattern of PcAVR3a1 in environmental strains, the flanking region of this gene was sequenced. PcAVR3a1 was found within a genetic element that we named PcAVR3a1-GI (PcAVR3a1 genomic island). PcAVR3a1-GI was flanked by a 22-bp direct repeat, which is related to its site-specific recombination site. In addition to the PcAVR3a1 gene, PcAVR3a1-GI also encoded a phage integrase probably associated with the excision and integration of this mobile element. Exposure to plant induced the presence of an episomal circular intermediate of PcAVR3a1-GI, indicating that this mobile element is functional. Collectively, these findings provide evidence of PcAVR3a1 evolution via mobile elements in environmental strains of Phytophthora.Instituto de GenéticaFil: Iribarren, Maria Josefina. Universidad Nacional de Luján; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Gabriela Cinthia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ayub, Nicolás Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Stress induced cognitive deficit is differentially modulated in BALB/c and C57Bl/6 mice. Correlation with Th1/Th2 balance after stress exposure

Stress and balance of Th1/Th2 immunity has been implicated in psychiatric disorders. In addition, two genetically different inbred strains of mice, C57BL/6 and BALB/c, which have different balance of Th1/Th2 immunity show distinct behavioral responses, neurodevelopment and neurochemistry parameters. Here, we perform a comparative study on chronic mild stress (CMS) effects upon learning and memory and immunity in both strains. Stressed BALB/c, but not C57Bl/6 mice, showed a poor learning performance in both open field and Y-maze. Also, CMS induced a decrease in number of neurons and thickness on hippocampus of BALB/c mice, but not produces morphological changes in C57BL/6 hippocampus. Oxidative stress, evaluated by reactive oxygen species (ROS) production was increased in hippocampus of CMS-exposed BALB/c but not in stressed C57BL/6. Concerning to immune system, stressed BALB/c mice showed a diminished mitogeninduced T cell proliferation and an increase of B cell proliferation. Moreover, lymphocytes from CMSexposed BALB/c mice showed an increased Th2-type cytokines production (IL-4 and IL-10). On the contrary, lymphocytes from CMS-exposed C57BL/6 mice had an increase in T cell proliferation without changes in B cell proliferation. Also, these lymphocytes showed a higher Th1-type cytokine release (INF- and IL-2). These results suggest a differential effect of stress, being BALB/c more vulnerable to cognitive deficit  associated to stress exposition than C57BL/6 mice. This effect could be related to a differential regulation of Th1/ Th2 cytokine balance, suggesting a better learning performance in individuals that produce Th1 type cytokine after stress exposition.Fil: Palumbo, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Canzobre, Mariela Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Rios, Hugo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Wald, Miriam Ruth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Genaro, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentin

Elimination of GlnKAmtB affects serine biosynthesis and improves growth and stress tolerance of Escherichia coli under nutrient-rich conditions

Nitrogen is a most important nutrient resource for Escherichia coli and other bacteria that harbor the glnKamtB operon, a high-affinity ammonium uptake system highly interconnected with cellular metabolism. Although this system confers an advantage to bacteria when growing under nitrogen-limiting conditions, little is known about the impact of these genes on microbial fitness under nutrient-rich conditions. Here, the genetically tractable E. coli BW25113 strain and its glnKamtB-null mutant (JW0441) were used to analyze the impact of GlnK-AmtB on growth rates and oxidative stress tolerance. Strain JW0441 showed a shorter initial lag phase, higher growth rate, higher citrate synthase activity, higher oxidative stress tolerance and lower expression of serA than strain BW25113 under nutrient-rich conditions, suggesting a fitness cost to increase metabolic plasticity associated with serine metabolism. The overexpression of serA in strain JW0441 resulted in a decreased growth rate and stress tolerance in nutrient-rich conditions similar to that of strain BW25113, suggesting that the negative influence on bacterial fitness imposed by GlnK-AmtB can be traced to the control of serine biosynthesis. Finally, we discuss the potential applications of glnKamtB mutants in bioproduction processes.Fil: Frare, Romina Alejandra. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; ArgentinaFil: Stritzler, Margarita. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; ArgentinaFil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; ArgentinaFil: Liebrenz, Karen Ivana. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; ArgentinaFil: Galindo Sotomonte, Luisa. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; ArgentinaFil: Soto, Gabriela Cynthia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; ArgentinaFil: Nikel, Pablo Iván. Technical University of Denmark; DinamarcaFil: Ayub, Nicolas Daniel. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo | Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. Grupo Vinculado Instituto de Genetica "ewald A. Favret" Al Iabimo.; Argentin

Neuroimmune alterations induced by prenatal stress exposure. Involvement of cytokines and neurotrophins. Influence of offspring gender

En el presente trabajo estudiamos el efecto del estrés prenatal (EP) en la respuesta neuroinmune en animales adultos. Observamos que machos y hembras respondieron diferente ante el EP, tanto a nivel inmunológico como comportamental. Los machos presentan una mayor respuesta inmune innata en relación a una mayor secreción de IFN-γ. Las hembras presentan algunos trastornos conductuales asociados posiblemente a una disminución de BDNF así como también a un aumento central y periférico de IL-4 y a una disminución periférica de IFN-γ. Ante nuevas situaciones de estrés en la adultez observamos que, las hembras EP tienen una respuesta inmune desmejorada ante situaciones de estrés agudo y un peor desempeño en aquellas pruebas que evalúan la memoria espacial al ser expuestas a estrés crónico. Las alteraciones inmunológicas podrían estar relacionadas con una disminución del balance Th1/Th2 y un mayor efecto inhibitorio de los glucocorticoides. Los trastornos conductuales podrían estar asociados a una disminución del BNDF y a un aumento de los receptores a GC en hipocampo inducidos por EP. Los machos EP expuestos a estrés en la adultez presentan un aumento en la respuesta inmune innata que estaría relacionado con un aumento en los niveles de IFN-γ. Sin embargo, tienen una disminución en la inmunidad adaptativa, que al igual que las hembras, tendría relación con el mayor efecto inhibitorio ejercido por la corticosterona. Por otro lado, en los machos tanto controles como EP, la exposición a estrés agudo o crónico no indujo alteraciones importantes en las pruebas comportamentales realizadas. Los resultados encontrados nos permiten concluir que el estrés materno induce cambios neuroinmunes en las crías que se pondrían especialmente en evidencia cuando estos individuos deben enfrentarse a nuevas situaciones de estrés en la adultez, siendo las hembras más sensibles que los machos. Además, hallamos que los cambios inducidos por exposición a EP se dan paralelamente en el hipocampo y en las células del sistema inmune. Podría entonces sugerirse que estas células pueden ser indicadores periféricos de una mayor susceptibilidad a padecer trastornos al ser expuestos a nuevas situaciones de estrés en la adultez.In the present work we studied the effect of prenatal stress (PS) in the neuroimmune response in adult animals. We observed a different response to PS between male and female, regarding immune and behaviour parameters. Male mice showed higher innate immune response evidenced by the increase in NK activity, possibly because of a higher release of IFN-γ. Female mice presented some behavioural disorders associated to a decrease in BDNF, as well as to an increase in central and peripheric IL-4 and to a peripherical decrease of IFN-γ. In a new stressful situation in adult life, female PS present a reduced immune response caused by acute stress and a worse performance in spatial memory test caused by chronic stress. Immunologic alterations could be related to a decrease in the Th1/Th2 balance and to a higher inhibitory effect of glucocorticoids. Behavioural disorders could be associated to a decrease in BDNF and to a increase of hippocampal GC receptors induced by PS. PS male mice exposed to adult stress showed an increase in innate immune response which could be related to an increase in IFN-γ levels. However, they have a reduction in adaptative immune response, which as in the female, could be related to the higher corticosterone inhibitory effect. Also, in control and PS males no changes in behaviour tasks were caused by acute or chronic stress. In conclusion, prenatal stress induce neuroimmune changes in the offspring that could be evidenced specially when the individuals are exposed to a new stressful situation in the adult life, being female more vulnerable than male mice. Furthermore, we found that changes induced by PS exposure occur simoultaneusly in hippocampus and in immune cells. We could suggest that these cells could be peripheral markers of susceptibility to deletereous effects of stress exposure in the adult life.Fil:Pascuan, Cecilia Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Exploring the ancestral mechanisms of regulation of horizontally acquired nitrogenases

The vast majority of Pseudomonas species are unable to fix atmospheric nitrogen. Although several studies have demonstrated that some strains belonging to the genus Pseudomonas sensu stricto do have the ability to fix nitrogen by the expression of horizontally acquired nitrogenase, little is known about the mechanisms of nitrogenase adaptation to the new bacterial host. Recently, we transferred the nitrogen fixation island from Pseudomonas stutzeri A1501 to the non-nitrogen-fixing bacterium Pseudomonas protegens Pf-5, and interestingly, the resulting recombinant strain Pf-5 X940 showed an uncommon phenotype of constitutive nitrogenase activity. Here, we integrated evolutionary and functional approaches to elucidate this unusual phenotype. Phylogenetic analysis showed that polyhydroxybutyrate (PHB) biosynthesis genes from natural nitrogen-fixing Pseudomonas strains have been acquired by horizontal transfer. Contrary to Pf-5 X940, its derived PHB-producing strain Pf-5 X940-PHB exhibited the inhibition of nitrogenase activity under nitrogen-excess conditions, and displayed the typical switch-on phenotype observed in natural nitrogen-fixing strains after nitrogen deficiency. This indicates a competition between PHB production and nitrogen fixation. Therefore, we propose that horizontal transfer of PHB biosynthesis genes could be an ancestral mechanism of regulation of horizontally acquired nitrogenases in the genus Pseudomonas.Instituto de GenéticaFil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fox, Ana Romina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Gabriela Cinthia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ayub, Nicolás Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Prenatal stress induces up-regulation of glucocorticoid receptors on lymphoid cells modifying the T-cell response after acute stress exposure in the adult life

It has been demonstrated that a short-duration stress (acute stress) may result in immunopreparatory or immunoenhancing physiological conditions. The aim of the present study was to investigate whether exposure to prenatal restraint stress (PRS) influences the impact of acute stress on the T-cell response in the adult life. We found that female mice exposed to PRS (PS mice) did not exhibit changes in the T-cell-dependent IgG antibody production with respect to prenatally non-stressed mice (no-PS mice). However, no-PS mice exposed to acute stress showed an increase of antibody production after antigen stimulation. In contrast, PS mice exhibited a decreased response after an acute situation. Spleen catecholamines and plasma corticosterone levels were increased in acute stress in both PS and no-PS mice. Nevertheless, lymphocyte response to hormones was altered in PS mice. Particularly, inhibitory effect of corticosterone was higher on lymphocytes from PS mice. In addition, an increase in protein levels and mRNA expression of glucocorticoid receptor was found in lymphoid cells from PS mice. These results show that prenatal stress alters the immune intrinsic regulatory mechanism that in turn induces an increased vulnerability to any stressful situation able to modify immune homeostasis.Fil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Rubinstein Guichon, Mara Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Palumbo, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Genaro, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; Argentin

Involvement of nitric oxide in improving stress-induced behavioural alteration by glatiramer acetate treatment in female BALB/c mice

Rationale: Oxidative stress and neurotrophins are among the most important factors involved in several pathophysiological brain processes. In addition, long-term exposure to stressful situations has deleterious effects on behaviour. We have previously shown that stressed female BALB/c mice show poor learning performance and that this behaviour is reversed by glatiramer acetate (GA) treatment. Objectives: We investigated the involvement of the hippocampal oxidative status and neurotrophin levels in cognitive deficit and the improvement of this deficit by GA treatment in chronic stressed BALB/c mice. Methods: Female BALB/c mice were exposed to a chronic mild stress (CMS) model for 9 weeks. During the last 3 weeks of the stress exposure, one group of mice was subcutaneously injected four times with 100 μg GA/mouse. Following this period, behavioural studies were performed. The mice were then sacrificed, and biochemical studies were performed on the hippocampus. Results: The stressed mice exhibited a significant decline in their performance in the open-field and in object-in-place tasks. This decline was accompanied by an increase in reactive oxygen species (ROS) and a decrease in nitric oxide (NO) production by neuronal nitric oxide synthase (nNOS). Neither antioxidant defences nor neurotrophin protein levels were involved in this process. Interestingly, the administration of GA re-established the normal levels of ROS, restored nNOS activity and improved learning performance. Conclusions: The GA treatment improved learning and memory in female BALB/c mice under chronic stress through a mechanism that involves the regulation of NO production, which in turn modulates the ROS levels.Fil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; ArgentinaFil: Simon, Elias Hugo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Genaro, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Palumbo, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; Argentin

pBAR–H3.2, a native-optimized binary vector to bypass transgene silencing in alfalfa

Alfalfa is the main forage worldwide due to its high biomass production, excellent nutritional qualities and adaptation to a wide range of environments (Singer et al. 2018). Besides, due to its ability to grow without nitrogen fertilizers derived from fossil fuels and conditions of long-duration perennial crop, alfalfa is a natural candidate for large production of renewable raw materials and vaccines at extremely low cost (Aguirreburualde et al. 2013; Saruul et al. 2002). However, the potential impact of alfalfa in agroindustrial processes is limited by strong transgene silencing. In the absence of genetic tools to bypass this constraint, the identification of alfalfa events with suitable transgene expression for commercial uses (e.g., high expression of transgenic traits) requires the production and analysis of a large number (e.g., 2000–3000) of transgenic events (Barros et al. 2019; Jozefkowicz et al. 2018; McCaslin et al. 2002). Naturally, this is an expensive empirical approach restricted to projects with high budget.Instituto de GenéticaFil: Pascuan, Cecilia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética e Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Bottero, Ana Emilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética e Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Kapros, Tamas. University of Missouri-Kansas City. School of Biological and Chemical Sciences; Estados UnidosFil: Ayub, Nicolás Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética e Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Soto, Gabriela Cynthia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Genética e Instituto de Biotecnología; Argentin