Métodos matemáticos y modelos estadísticos aplicados a la estimación de la curva de dosis - respuesta en un estudio de exposición oral de cerdos gnotobióticos a Norovirus humano

Fil: Parreño, Viviana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Escuela para Graduados; Argentina.Los modelos animales son utilizados en estudios pre-clínicos para reproducir las infecciones por patógenos humanos. En el proceso de estandarización de estos modelos resulta indispensable conocer cómo se producen la infección y enfermedad a medida que aumenta la dosis del patógeno. Los modelos dosis-respuesta son funciones matemáticas que permiten describir la relación entre la dosis de un patógeno y la severidad de la infección y enfermedad que genera en un hospedador dado. Los métodos aplicados a la estimación de los parámetros de estas curvas se han desarrollado desde hace varios decenios. Inicialmente se empleaban métodos de interpolación matemática, como el método de Reed-Muench y el método de Dragstedt-Beherens, que permiten estimar la dosis de una suspensión viral dada que causa infección o enfermedad en la mitad de los individuos desafiados y denominada dosis efectiva 50%. Si bien estos métodos siguen utilizándose en la actualidad, carecen de base estadística. Más tarde, se desarrolló el método no paramétrico de Spearman-Karber, que es el que se emplea actualmente a nivel de las agencias regulatorias. Con el advenimiento de nuevas herramientas estadísticas y la capacidad computacional surgieron los modelos lineales generalizados o GLM (por ejemplo, el modelo de la regresión logística). Estos modelos permiten realizar inferencia sobre estadísticos importantes como la dosis efectiva 50% teniendo en cuenta su variabilidad e incertidumbre. Recientemente, y partir de un conocimiento más cabal de la biología detrás de una infección y el desarrollo posterior de una enfermedad, se han desarrollado modelos con base mecanicista. Estos últimos modelos resultan muy valiosos para el estudio de análisis de riesgo asociado a la contaminación de agua y alimentos con agentes virales, como, por ejemplo, Norovirus humano. El presente trabajo de tesis de maestría se propuso emplear los métodos de interpolación matemática clásicos de Reed-Muench y Dragstedt-Beheren, el método no paramétrico de Spearman-Kaber, un modelo lineal generalizado, la regresión logística, y los modelos de regresión no lineal log-logístico y mecanicistas Exponencial y Beta-Poisson para estimar la dosis de infección (DI50%) y enfermedad (DD50%) 50% en un ensayo de dosis-respuesta en cerdos gnotobióticos desafiados con una cepa de Norovirus humano. Todos estos modelos utilizan la condición infectado/no infectado o enferno/sano o bien la proporción de individuos afectados dentro del grupo que recibió la misma dosis como variable respuesta. Como alternativa novedosa, la tesis exploró también la estimación de la DI50% y DD50% ajustando una regresión log-logística sobre el área de la curva de excreción viral y score fecal, dos variables continuas que reflejan la severidad de la infección y del cuadro clínico de diarrea. Los parámetros de los diferentes modelos estadísticos se estimaron por máxima verosimilitud y su incertidumbre se evaluó mediante la estimación de intervalos de confianza aplicando diferentes métodos. La bondad de ajuste y performance relativa de cada modelo se evaluó mediante el criterio de información de Akaike. Los resultados obtenidos de aplicar los diferentes modelos a los datos de proporciones de animales infectados y enfermos indicaron que la DI50% se encontró alrededor de las 2500 copias de genoma viral y la DD50% alrededor de las 21000 copias. Independientemente del método empleado, las estimaciones obtenidas arrojaron valores similares. Los modelos mecanicistas Exponencial y Beta-Poisson fueron los que mejor ajustaron los datos de infección. Por su parte, para los datos de enfermedad fue el modelo Beta-Poisson el que arrojó el mejor ajuste. Llamativamente, el ajuste del modelo de regresión log-logístico sobre las variables continuas de área bajo la curva de excreción viral y severidad del cuadro clínico arrojó valores para la DI50% y la DD50% que se encuentran en el mismo orden que los calculados en base a los datos discretos, lo que sugiere que este enfoque también podría comenzar a considerarse para estimar las dosis infecciosas y enfermedad 50% para un patógeno viral. Los métodos contemporáneos ofrecen mayor precisión Viviana Parreño - Master Biometría – FAUBA Abstract Page 14 of 112 y exactitud que los métodos clásicos para estimar las dosis efectivas 50%. A su vez, permiten el análisis de datos generados utilizando diluciones no equidistantes y con un número desbalanceado de unidades experimentales entre dosis. La dosis de desafío de la cepa de NoVhumano Genogrupo II.2, Cin-2, evaluada en este estudio quedó establecida en 2 x 105 copias de genoma viral, la cual logra reproducir en cerdos gnotobióticos los tiempos de incubación, duración y severidad de la infección y diarrea por NoV que ocurren en voluntarios humanos experimentalmente desafiados con cepas del genogrupo I y II. Estimaciones precisas de los parámetros de infección y enfermedad bajo análisis estadísticos robustos contribuyen a la correcta estandarización del cerdo gnotobiótico como un modelo animal adecuado para estudios pre-clínicos de pruebas de vacunas y otras estrategias antivirales contra Norovirus humanos.112 p. : tbls., grafs.Maestría en Biometría y Mejoramient

Rotavirus species tropism: new insights on P-type classification

To study the aminoacid regions that are involved in the VP8 pocket in order to find a molecular fingerprint for the virus species tropism.Instituto de VirologíaFil: Miño, Samuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Aduriz Guerrero, Matías. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

Worldwide evolution of equine RVA: four voices, one story

In this work, we used a Bayesian approach, together with all the information that was available in databases, to study the evolution of equine RVA.Instituto de VirologíaFil: Miño, Samuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Barrandeguy, Maria Edith. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

Inmunidad pasiva en el control de la diarrea por coronavirus bovino en un rodeo lechero de Argentina

El coronavirus bovino (Bovine coronavirus, BCoV) es un enteropatógeno viral asociado a la diarrea neonatal del ternero. El objetivo del presente trabajo fue estudiar si los anticuerpos IgG1 anti-BCoV adquiridos pasivamente mediante el calostro modulan la infección por BCoV en terneros de un rodeo lechero de Argentina. Se monitorearon 30 terneros raza Holstein durante los primeros 60 días de vida. Estos animales fueron clasificados en dos grupos según sus niveles de IgG1 anti-BCoV maternales: grupo con transferencia de inmunidad pasiva aceptable (APT) y grupo con fallas en la transferencia pasiva (FPT). Este último grupo tenía un título de IgG1 significativamente menor comparado con el primer grupo (log10 1,98 vs. 3,38, respectivamente; p < 0,0001). La misma diferencia se observó cuando se compararon los niveles de proteínas séricas totales (p = 0,0081). Además, el 71% (5/7) de los terneros del grupo FPT mostró seroconversión de IgG1, mientras que el 29,4% (5/17) de los terneros del grupo APT la mostró. Con respecto a la circulación viral, se detectó BCoV en el 10% (3/30) de los terneros así como también seroconversión de IgG1 en el 42% del total de los animales, lo que evidencia que aproximadamente la mitad de los terneros se infectaron con BCoV. Este estudio mostró que los terneros con altos títulos de IgG1 específica (≥ 1.024) estuvieron mayormente protegidos contra la infección con BCoV, mientras que los animales con títulos bajos de IgG1 (< 1.024) estuvieron predispuestos a la infección. Esto confirma que los anticuerpos IgG1 calostrales son críticos para la prevención de la infección por este agente viral.Bovine coronavirus (BCoV) is a viral enteric pathogen associated with calf diarrhea worldwide being, in Argentina, mostly detected in dairy husbandry systems. The aim of the present work was to study if maternal IgG1 antibodies (Abs) to BCoV acquired by colostrum intake modulate the development of BCoV infection in calves reared in a dairy farm in Argentina. Thirty Holstein calves were monitored during their first 60 days of age. Animals were classified into two groups depending on their initial BCoV IgG1 Ab titers. The “failure of passive transfer” (FPT) group had significantly lower IgG1 Abs to BCoV than the “acceptable passive transfer” (APT) group of calves (log10 1.98 vs. 3.38 respectively) (p < 0.0001). These differences were also observed when the total protein levels in both groups were compared (p = 0.0081). Moreover, 71% (5/7) of calves from the FPT group showed IgG1 seroconversion to BCoV compared to 29.4% (5/17) of animals from the APT group. Regarding viral circulation, BCoV was detected in 10% (3/30) of all calves and BCoV IgG1 Ab seroconversion was detected in 42% of the total animals showing that almost half of the calves were infected with BCoV. In conclusion, calves with high titers of specific BCoV IgG1 (≥1024) were mostly protected against viral infection, while animals with low titers of IgG1 (<1024) were mostly infected with BCoV. IgG1 Abs from colostrum origin are critical for prevention of BCoV infection.Fil: Bok, Marina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Allassia, Martín. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Frank, Flavia. AproAgro S.A.; ArgentinaFil: Vega, Celina Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Wigdorovitz, Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; Argentin

Antibodies to Pathogenic Livestock Viruses in a Wild Vicuña (Vicugna vicugna) Population in the Argentinean Andean Altiplano

Serum samples from 128 wild vicuñas (Vicugna vicugna) were tested for antibodies (Ab) to Rotavirus (RV), Parainfluenza-3 virus (PI-3V), Bovine Herpesvirus-1 (BHV-1), Bovine Viral Diarrhea virus (BVDV-1), Foot-and-mouth disease virus (FMDV), Bluetongue virus (BTV), Equine Herpesvirus-1 (EHV-1) and Equine Influenza A virus (EIV). The samples were collected in Cieneguillas Province of Jujuy, in northern Argentina. Feces from forty-four vicuñas were also collected to investigate RV shedding. Llamas (Lama glama) and domestic cattle (Bos taurus) from the area studied were sampled for serological evidence of the same viral infections. Antibodies (Ab) against RV (100%) and PI-3V (37%) were detected in the vicuñas sampled. No RV antigen was detected in any of the fecal samples tested. One vicuña was positive for Ab to BHV-1 (0.78%) and another for BVDV-1 (0.78%). The Ab prevalences detected in llamas were: 100% (16/16) for RV, 47% (8/17) for PI-3V, 17.6% (3/17) for BHV-1 and 5.88% (1/17) for BVDV-1. However, domestic cattle showed high seroprevalences for RV and PI-3V, 100% (13/13) and 73.3% (11/15), respectively, but were negative for Ab to BHV-1 and BVDV. No Ab against FMDV, BTV, EHV-1 or EIV were detected in wild vicuñas or domestic species. Since no data of viral circulation on wild vicuñas were available, this report represents the first evidence of viral infection in wild vicuñas from the Argentinean Andean Puna and it will be an approach for future serological studies.Fil: Marcoppido, Gisela Ariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vila, Bibiana Leonor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Luján; Argentin

Study of the kinetics of antibodies titres against viral pathogens and detection of rotavirus and parainfluenza 3 infections in captive crias of guanacos (Lama guanicoe)

A longitudinal study was conducted to investigate the presence of antibodies (Ab) to Rotavirus (RV), Parainfluenza-3 virus (PI-3), Bovine Herpesvirus-1 (BoHV-1), Bovine Viral Diarrhoea virus (BVDV-1) and Bluetongue virus (BTV) in eleven guanaco's crias (chulengos) relocated from Rio Negro to Buenos Aires Province (Argentina) and reared in captivity for a year in an experimental field. Serum samples were collected periodically to detect the evidence of viral infections. Faecal samples were collected to investigate RV shedding. We detected the evidence of Ab to RV from the beginning of the experience, suggesting the presence of maternal Ab against the virus. RV infection was detected in seven of the eleven chulengos, by seroconversion (4), virus shedding in stools (1) or both (2). In all cases, the RV strain was typed as [P1]G8, the same G/P type combination detected in captive chulengos with acute diarrhoea sampled in Rio Negro, in 2001. In contrast, we could not detect antibodies against PI-3, BoHV-1, BVDV or BT in any of initial samples. No Abs against BoHV-1, BVDV or BTV were detected in the chulengos throughout the study. However, all the chulengos became asymptomatically seropositive to PI-3 by the 7 month after arrival. This study suggest that wild-born guanacos raised in captivity can be relatively susceptible to common livestock viral infections, such as RV and PI-3, which are easily spread among chulengos.Fil: Marcoppido, G.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Olivera, Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Bok, Karin. Dirección Nacional de Instituto de Investigación.Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud "Dr. Carlos G. Malbrán"; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Comparación in vitro de aciclovir, ganciclovir y cidofovir contra alfa-herpesvirus equino 3 y evaluación de la eficacia de los mismos frente a 6 aislamientos de campo del virus

El alfa-herpesvirus equino 3 (EHV3) es el agente etiológico del exantema coital equino (ECE), enfermedad venérea, altamente contagiosa y caracterizada por la aparición de pápulas, vesículas, pústulas y úlceras en los genitales externos de yeguas y padrillos. Luego de la primo-infección, el EHV3 se mantiene en el animal en un estado de latencia a partir del cual puede reactivar y excretarse, generalmente de manera subclínica. No existen vacunas, por lo que la prevención se basa en la detección de las lesiones clínicas previo al servicio, y la segregación de estos animales. Sin embargo, este abordaje no previene la infección del padrillo por parte de yeguas que excretan el virus de manera subclínica, y por lo tanto existe la necesidad de un tratamiento específico contra el EHV3. En la actualidad, existen varios compuestos antivirales de probada eficacia contra herpesvirus humanos y veterinarios. El objetivo de este trabajo es comparar la eficacia de 3 compuestos antivirales, aciclovir, ganciclovir y cidofovir, contra EHV3 in vitro, y evaluar la eficacia de los mismos contra 6 cepas de campo argentinas de EHV3. Para determinar la eficacia de los compuestos in vitro se evaluaron 3 parámetros: reducción del número de placas de lisis, reducción del tamaño de placas de lisis y reducción de la producción de virus. Adicionalmente, la efectividad de los compuestos en una concentración óptima, previamente determinada en este estudio, fue determinada para 6 cepas de campo argentinas de EHV3. De acuerdo con los resultados obtenidos, ganciclovir fue el compuesto más potente en reducir la replicación del EHV3 in vitro, y por lo tanto podría considerarse un potencial candidato para el tratamiento y la prevención del ECE en yeguas y padrillos.Equid alphaherpesvirus 3 (EHV3) is the etiological agent of equine coital exanthema (ECE), which is a venereal, highly contagious disease, characterized by the formation of papules, vesicles, pustules and ulcers on the external genitalia of mares and stallions. EHV3 remains in a latent state after a successful infection and there are latently infected animals in which the virus is reactivated and generally re-excreted subclinically. There are no available vaccines for this condition and prevention is based on the clinical examination of mares prior to mating, which allows to segregate those showing clinical signs. As this approach does not eliminate the risk of contagion in stallions from subclinically infected mares, there is a need for a specific EHV3 treatment. Nowadays, there exist various antiviral compounds of proven effectiveness for other alphaherpesviruses affecting humans and animals. The aim of the present study was to compare the efficacy of three antiviral compounds, acyclovir, ganciclovir and cidofovir against EHV3 in vitro, and to assess their efficacy against six EHV3 Argentinian field isolates. To determine the efficacy of these compounds in vitro, three parameters were analyzed: reduction of plaque number, reduction of plaque size and reduction of viral production. Additionally, the effectiveness of the three compounds at an optimum concentration previously determined in this study was investigated for the EHV3 field isolates. Based on our results, ganciclovir was the most potent antiviral compound to reduce EHV3 replication in vitro and may thus be a valuable candidate for treatment and prevention of ECE in mares and stallions.Fil: Vissani, María Aldana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Zabal, Osvaldo Alfredo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Universidad del Salvador; ArgentinaFil: Tordoya, María S.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Thiry, Etienne. Université de Liège; BélgicaFil: Barrandeguy, María. Universidad del Salvador; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires; Argentin

Evolution of Animal South American RVA Told by the NSP4 Gene E12 Genotype

Rotavirus A (RVA) possesses a genome of 11 double-stranded (ds) RNA segments, and each segment encodes one protein, with the exception of segment 11. NSP4 is a non-structural multifunctional protein encoded by segment 10 that defines the E-genotype. From the 31 E-genotypes described, genotype E12 has been described in Argentina, Uruguay, Paraguay, and Brazil in RVA strains infecting different animal species and humans. In this work, we studied the evolutionary relationships of RVA strains carrying the E12 genotype in South America using phylogenetic and phylodynamic approaches. We found that the E12 genotype has a South American origin, with a guanaco (Lama guanicoe) strain as natural host. Interestingly, all the other reported RVA strains carrying the E12 genotype in equine, bovine, caprine, and human strains are related to RVA strains of camelid origin. The evolutionary path and genetic footprint of the E12 genotype were reconstructed starting with the introduction of non-native livestock species into the American continent with the Spanish conquest in the 16th century. The imported animal species were in close contact with South American camelids, and the offspring were exposed to the native RVA strains brought from Europe and the new RVA circulating in guanacos, resulting in the emergence of new RVA strains in the current lineages’ strongly species-specific adaption. In conclusion, we proposed the NSP4 E12 genotype as a genetic geographic marker in the RVA strains circulating in different animal species in South America.EEA Cerro AzulFil: Miño, Samuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Cerro Azul; Argentina.Fil: Badaracco, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Montecarlo; ArgentinaFil: Louge Uriarte, Enrique Leopoldo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Ciarlet, Max. Icosavax. Clinical Development; Estados UnidosFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

Egg yolk IgY antibodies: A therapeutic intervention against group A rotavirus in calves

Bovine group A rotavirus (RVA) is considered the major cause of diarrhea in intensively reared neonatal calves. Chicken egg yolk antibodies (IgY) are efficient in protecting neonatal calves from RVA diarrhea; however, the value of this intervention in calves once diarrhea has appeared is unclear. The aim of the present study was to evaluate the application of RVA-specific IgY as a passive treatment in those cases. The experimental groups were: G1 = RVA-specific IgY treatment; G2 = no Ab treatment; and G3 = colostrum deprived + no Ab treatment. IgY treatment significantly reduced virus shedding, diarrhea duration and severity compared to G2 and G3 calves. However, it caused a partial suppression of systemic Ab responses to RVA that could be associated with less severe diarrhea. The oral treatment with IgY for 7 days was associated with significantly higher antibody secreting cell responses in the calves compared with other groups of animals.Fil: Vega, Celina Guadalupe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Bok, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Saif, L.. Ohio State University; Estados UnidosFil: Fernandez, F.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentin

Molecular characterization of equine rotaviruses circulating in Argentinean foals during a 17-year surveillance period (1992-2008)

P[12]G3 and P[12]G14 equine rotaviruses (ERVs) are epidemiologically important in horses. In Argentina, the prevalent ERV strains have been historically P[12]G3. The aim of this study was the detection and characterization of ERV strains circulating in foals in Argentina during a 17-year study (1992-2008). Additionally, the gene sequences of VP7, VP4 and NSP4 encoding genes of representative Argentinean ERV strains were determined and phylogenetic analyses were performed to elucidate the evolutionary relationships of the ERV strains in Argentina. ERVs were detected in 165 (21%) out of 771 diarrheic stool samples, which corresponded to 45 (39%) of 116 outbreaks from the surveyed thoroughbred horse farms. From the positive cases, 51% (n= 23) were G3, 33% (n= 15) were G14, 4% (n= 2) represented a G3. +. G14 mixed infection and 11% (n= 5) of the cases could not be characterized. G3 ERV was detected during the entire period, while G14 ERV was first detected in 2000 and increased its incidence specially in 2006 and 2007. All the analyzed strains belonged to the VP4 P[12] genotype, except for one G3 case which belonged to the P[3] genotype, constituting the first report of a P[3]G3 ERV strain. Phylogenetic analysis of VP7 protein revealed that the G3 Argentinean ERV strains clustered with ERVs from Ireland, while the G14 Argentinean ERV strains formed a distinct cluster within the G14 genotype. The VP4 of the P[12] ERV strains clustered with P[12] strains from Ireland and France. The NSP4 of the Argentinean ERV strains clustered with the NSP4 genotype E12, along with those of guanaco and bovine strains from Argentina, suggesting the a close evolutionary relationship among these Argentinean strains. The results of this study showed changes in the incidence of G3 and G14 during the studied period. The increase in the frequency of G14 ERV, not included in the vaccine, in the second half of the period, may have implications for vaccine design.Fil: Garaicoechea, Lorena Laura. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miño, Samuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Ciarlet, Max. No especifíca;Fil: Fernández, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Barrandeguy, María. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin