Detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis and other mycobacteria in retail milk and dairy products in Argentina

Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the etiologic agent of paratuberculosis or Johne’s disease (JD), a chronic enteritis disease that affects cattle and other animal species and has been linked to Crohn’s disease, a chronic inflammatory bowel disease in humans. MAP could resist pasteurization conditions and has been isolated from retail milk in several countries. The aims were to identify MAP and other mycobacteria in retail milk and dairy products in Argentina and to assess the product quality through Mesophilic Total Aerobic Bacteria (TAB) count. Three hundred and eighty-four samples of retail milk were tested for 24 months. All samples were negative for mycobacteria growth. However, 1.56% of the samples were positive for MAP identification by IS900-PCR. The TAB count was higher than the limits established by the Alimentary Argentinian Code (AAC) in 4.95% of the samples. Mycobacteria other than MAP were not detected either by culture or PCR. The MAP positive PCR from retail milk samples would indicate that they could come from dairy farms with JD and suggests that pasteurized milk or dairy products are not significant sources of human exposure to MAP in Argentina. Some milk samples exceeded the limits established by the AAC for TAB counts, indicating that commercialized milk could be processed and stored incorrectly.Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis (MAP) es el agente etiológico de la paratuberculosis o la enfermedad de Johne (JD), una enteritis crónica que afecta al ganado vacuno y otras especies animales que se la vincula con la enfermedad de Crohn, una afección intestinal inflamatoria crónica en humanos. MAP podría resistir las condiciones de pasteurización y se lo aisló de la leche al por menor en varios países. Los objetivos fueron identificar MAP y otras micobacterias en leche y productos lácteos al por menor en Argentina y evaluar la calidad de estos a través del conteo de bacterias aerobias totales mesófilas (TAB). Se analizaron 384 muestras de leche de venta minorista durante 24 meses. Todas las muestras resultaron negativas en cuanto al crecimiento de micobacterias. Sin embargo, el 1.56% de las muestras dieron positivas en la identificación de MAP por IS900-PCR. El recuento de TAB superó los límites establecidos por el Código Alimentario Argentino (CAA) en el 4.95% de las muestras. No se detectaron micobacterias distintas de MAP ni por cultivo ni por PCR. La PCR positiva en MAP resultante de muestras de leche al por menor indicaría que podrían provenir de granjas lecheras con JD y sugiere que la leche pasteurizada o los productos lácteos no son fuentes significativas de exposición humana a MAP en Argentina. Algunas muestras de leche excedieron los límites establecidos por la AAC para los recuentos de TAB, lo cual indica que la leche comercializada podría procesarse y almacenarse incorrectamente.EEA BalcarceFil: Cirone, Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Cirone, Karina Mariela. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Morsella, Claudia Graciela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Mendez, Laura Luján. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Paolicchi, Fernando. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina

Evidência de infecção intra-uterina por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis usando Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis:: primeiro relato na Argentina

Uma novilha prenha em estado clínico avançado de paratuberculose foi observada em um rebanho bovino na Argentina. O animal foi eutanasiado e foram colhidas amostras dos seus órgãos e dos órgãos feto as quais foram cultivadas para bacteriologia em meio específico. Os tecidos foram examinados por histopatologia (coloração de hematoxilina-eosina e Ziehl-Neelsen). Na histopatologia das amostras colhidas da novilha foram observadas lesões compatíveis com paratuberculose e a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes, nos tecidos fetais não foram observadas lesões, porém a coloração de Ziehl-Neelsen revelou a presença de bacilos álcool-ácido resistentes. Após o crescimento em meio específico, as colônias foram positivas para o teste IS900-PCR nos tecidos de ambos, vaca e feto, confirmando a presença de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Por fim, os isolados foram tipados por Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis, confirmando a relação epidemiológicaentre eles. Este estudo relata a primeira detecção de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis na Argentina em que houve o compartilhamento de um tipo idêntico de MLVA em uma vaca prenhe e no seu feto. Os resultados deste estudo são consistentes com relatos anteriores e destacam a transmissão intra-uterina de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis como importante fonte de infecção nos rebanhos de bovinos.A pregnant heifer with an advanced clinical stage of paratuberculosis was reported in a herd in Argentina. Thus, the animal was euthanized and samples of organs of the cow and its fetus was taken and cultured for bacteriology in specific medium. Tissues were analyzed by histopathology (hematoxylin-eosin and Ziehl-Neelsen staining). Histopathological analysis of the cow’s samples revealed the presence of lesions consistent with paratuberculosis, and Ziehl-Neelsen staining revealed the presence of acid-fast bacilli, whereas the fetal tissues showed absence of lesions but the presence of acid-fast bacilli by Ziehl-Neelsen staining. After growing in specific medium, colonies in tissues from both cow and fetus were positive for IS900-PCR, confirming the presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Finally, the isolates were typed by Multiple-Locus Variable-number tandem-repeat Analysis (MLVA), which confirmedthe epidemiological link between them. This study is the first in Argentina to report the detection of MAP that shares an identical MLVA type in a pregnant cow and its fetus. The results of this study are consistent with previous reports and highlight the intra-uterine transmission of MAP as an important source of infection within herds

Respuesta humoral y consecuencias reproductivas en ovejas desafiadas con Brucella ovis al final de la gestación

La brucelosis ovina por Brucella ovis es una enfermedad de prevalencia alta en Argentina. Para evaluar la patogenicidad de B. ovis y la respuesta serológica durante el último mes de gestación, 6 ovejas se distribuyeron en dos grupos: G1, ovejas preñadas, n = 4 y G2, ovejas no preñadas, n = 2. Tres ovejas del G1 (15 días preparto) y una del G2 fueron inoculadas con B. ovis. Se analizaron muestras de suero mediante diferentes pruebas serológicas. Se realizó aislamiento y PCR a partir de mucus cérvico-vaginal (mcv), placenta y leche. En las muestras de placenta se realizó histopatología. Las hembras del G1 parieron corderos vivos; se detectaron anticuerpos en las ovejas desafiadas del G1 a partir de los 5 días posinoculación. El mcv de las ovejas desafiadas resultó negativo al aislamiento en ambos grupos. Las muestras de leche del G1 fueron positivas por cultivo y PCR a B. ovis. La técnica de PCR resultó positiva en las placentas de las ovejas desafiadas del G1. La histopatología reveló una placentitis necrótica supurativa en una de las ovejas desafiadas. El desafío con B. ovis preparto resultó en la invasión de la placenta y de la glándula mamaria, con la consecuente excreción de la bacteria por leche. La infección con B. ovis indujo una respuesta humoral temprana en las ovejas. La colonización de la placenta por B. ovis y la excreción de la bacteria por la leche sugieren un potencial riesgo de infección activa para los corderos y la posibilidad de que estos se comporten como portadores latentes de la infección.Ovine brucellosis by Brucella ovis is a highly prevalent disease in Argentina. This study aimed to evaluate the pathogenicity of B. ovis and the serological response in ewes during late pregnancy and in their offspring. Six adult ewes were distributed in two groupsG1 (pregnant females, n = 4) and G2 (nonpregnant females, n = 2). Three pregnant ewes at 15 days prepartum and one nonpregnant eve were inoculated with B. ovis. Sera of sheep and their offspring were analyzed by different serological tests. Samples of cervicovaginal mucus, placenta and milk were studied by bacteriology. A Brucella genus-specific PCR assay was carried out in placenta and milk samples. Placenta samples were hystopathologically processed. G1 females gave birth to live lambs, but one died hours postpartum. Serological techniques employed detected antibodies in serum of inoculated pregnant animal 5 days postchallenge. Sera of female controls G1 and G2 remained negative throughout the study. Cervicovaginal mucus of infected ewes in G1 and G2 yielded negative results to bacteriology, but B. ovis was isolated from milk. The PCR assay was positive for the placenta and milk from inoculated pregnant ewes. Histopathology revealed necrotic suppurative placentitis in one placenta. However, although results demonstrated that B. ovis can invade the placenta and mammary gland, this bacterium did not cause abortion when it was inoculated intravenously at 15 days prepartum. B. ovis infection induced an early humoral response in pregnant ewes, but their lambs remained seronegative, indicating that there was no transfer of antibodies in infancy. Placenta colonization and milk excretion of B. ovis involves a potential source of infection for lambs, which could play a role as latent carriers of infection

Toros o semen

Otro componente fundamental para tratar de completar la Información sanitaria y reproductiva de un rodeo bovino ya sea para carne o leche son los toros o el semen empleado para IA. En ese sentido, es importante también averiguar el historial sanitario del rodeo, en lo que respecta las enfermedades de transmisión sexual (tricomonosis y campilobacteriosis, principalmente), así como otros aspectos de manejo que pudieran haber influido para que un toro no se hubiese comportado adecuadamente durante el servicio: condición corporal previa, alteraciones podales o articulares, patologías de tracto genital (orquitis, epididimitis, etc.), entre otras.EEA BalcarceFil: Cantón, Germán José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible Balcarce; Argentina.Fil: García, Juan Agustín. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible Balcarce; Argentina.Fil: Paolicchi, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible Balcarce; Argentina

Detection of bovine IgG isotypes in a PPA-ELISA for Johne's disease diagnosis in infected herds

Johne’s Disease or Paratuberculosis is a chronic granulomatous enteritis disease affecting ruminants. Detection of subclinically infected animals is difficult, hampering the control of this disease. The aim of this work was to evaluate the performance of detection of IgG isotypes in a PPA-ELISA to improve the recognition of cattle naturally infected with Map in different stages. A total of 108 animals from Tuberculosis-free herds were grouped as follows: exposed (n = 30), subclinically infected (n = 26), clinically infected (n = 14), and healthy controls (n = 38). Receiver-operating characteristic (ROC) curves of isotypes/PPA-ELISAs were constructed and areas under the curves were compared to evaluate the performance of each test. Our study demonstrated that the conventional PPA-ELISA (detecting IgG) is the best to identify clinically infected animals with high sensitivity (92.9%) and specificity (100%). Meanwhile, IgG2/PPA-ELISA improved the number of subclinically infected cattle detected as compared with conventional IgG/PPA-ELISA (53.8 versus 23.1%). In addition, it had the maximum sensitivity (65.0%, taking into account all Map-infected cattle). In conclusion, the combination of IgG and IgG2/PPA-ELISAs may improve the identification of Mapinfected cattle in different stages of disease. The usefulness of IgG2 detection in serological tests for Johne’s Disease diagnosis should be further evaluated.Fil: Fernández, Bárbara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gilardoni, Liliana Rosa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Jolly, Ana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Colavecchia, Silvia Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Agencia de Extensión Rural Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Cs.agrarias. Departamento de Producción Animal; ArgentinaFil: Mundo, Silvia Leonor. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Cátedra de Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Phylogenomic analysis for Campylobacter fetus ocurring in Argentina

Background and Aim: Campylobacter fetus is one of the most important pathogens that severely affects livestock industry worldwide. C. fetus mediated bovine genital campylobacteriosis infection in cattle has been associated with significant economic losses in livestock production in the Pampas region, the most productive area of Argentina. The present study aimed to establish the genomic relationships between C. fetus strains, isolated from the Pampas region, at local and global levels. The study also explored the utility of multi‐locus sequence typing (MLST) as a typing technique for C. fetus. Materials and Methods: For pangenome and phylogenetic analysis, whole genome sequences for 34 C. fetus strains, isolated from cattle in Argentina were downloaded from GenBank. A local maximum likelihood (ML) tree was constructed and linked to a Microreact project. In silico analysis based on MLST was used to obtain information regarding sequence type (ST) for each strain. For global phylogenetic analysis, a core genome ML‐tree was constructed using genomic dataset for 265 C. fetus strains, isolated from various sources obtained from 20 countries. Results: The local core genome phylogenetic tree analysis described the presence of two major clusters (A and B) and one minor cluster (C). The occurrence of 82% of the strains in these three clusters suggested a clonal population structure for C. fetus. The MLST analysis for the local strains revealed that 31 strains were ST4 type and one strain was ST5 type. In addition, a new variant was identified that was assigned a novel ST, ST70. In the present case, ST4 was homogenously distributed across all the regions and clusters. The global analysis showed that most of the local strains clustered in the phylogenetic groups that comprised exclusively of the strains isolated from Argentina. Interestingly, three strains showed a close genetic relationship with bovine strains obtained from Uruguay and Brazil. The ST5 strain grouped in a distant cluster, with strains obtained from different sources from various geographic locations worldwide. Two local strains clustered in a phylogenetic group comprising intercontinental Campylobacter fetus venerealis strains. Conclusion: The results of the study suggested active movement of animals, probably due to economic trade between different regions of the country as well as with neighboring countries. MLST results were partially concordant with phylogenetic analysis. Thus, this method did not qualify as a reliable subtyping method to assess C. fetus diversity in Argentina. The present study provided a basic platform to conduct future research on C. fetus, both at local and international levels.Fil: Farace, Pablo Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Irazoqui, José Matías. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Santa Fe. Instituto de Investigacion de la Cadena Lactea. - Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estacion Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigacion de la Cadena Lactea.; ArgentinaFil: Morsella, Claudia Graciela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: García, Juan Agustín. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Méndez, Maria Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Amadio, Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Santa Fe. Instituto de Investigacion de la Cadena Lactea. - Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estacion Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigacion de la Cadena Lactea.; ArgentinaFil: Gioffré, Andrea Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentin

L-cysteine transporter-PCR to detect hydrogen sulfide-producing Campylobacter fetus

Phenotypic differences between Campylobacter fetus fetus and C. fetus venerealis subspecies allow the differential diagnosis of bovine genital campylobacteriosis. The hydrogensulfide production,for example,is atrait exclusive toC.fetus fetus and C. fetus venerealis biovar intermedius. This gas that can be biochemically tested can be produced from L-cysteine (L-Cys). Herein, we report a novel multiplex-PCR to differentiate C. fetus based on the evaluation of a deletion of an ATP-binding cassette-type L-Cys transporter that could be involved in hydrogen sulfide production, as previously described. A wet lab approach combined with an in silico whole genome data analysis showed complete agreement between this L-Cys transporter-PCR and the hydrogen sulfide production biochemical test. This multiplex-PCR may complement the tests currently employed for the differential diagnosis of C. fetus.Instituto de BiotecnologíaFil: Farace, Pablo Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); ArgentinaFil: Morsella, Claudia Graciela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Unidad Integrada. Laboratorio de Bacteriología-Grupo de Sanidad Animal. Universidad Nacional de Mar del Plata; ArgentinaFil: Cravero, Silvio Lorenzo Pedro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); ArgentinaFil: Sioya, Bernardo Arturo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); ArgentinaFil: Amadio, Ariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Unidad Integrada. Laboratorio de Bacteriología-Grupo de Sanidad Animal. Universidad Nacional de Mar del Plata; ArgentinaFil: Gioffre, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas (CONICET); Argentin

Diferentes estrategias para el diagnóstico de la brucelosis ovina por brucella ovis en una majada endémica de Argentina

Brucella ovis es el agente etiológico de la epididimitis contagiosa del carnero. El diagnóstico se basa en el examen clínico, la serología y en el aislamiento de B. ovis a partir de semen. El análisis del semen mediante PCR complementa el diagnóstico directo para la detección de B. ovis y de otros patógenos reproductivos de los ovinos. En este trabajo se comparan diferentes estrategias para el diagnóstico de la epididimitis contagiosa del carnero. Veintidós carneros fueron examinados clínicamente. Las muestras de suero fueron analizadas con diferentes pruebas serológicas. Las muestras de semen se cultivaron y evaluaron mediante PCR multiplex. Los carneros con cultivo positivo fueron sacrificados y se tomaron muestras de testículos, epididídimos, vesículas seminales y ampollas del conducto deferente para el estudio por histopatológico. La presencia de B. ovis en semen se asoció significativamente con la seropositividad y con lesiones histopatológicas en los órganos estudiados. La multiplex PCR mostró una sensibilidad similar al cultivo de semen y podría ser usada para el diagnóstico directo de B. ovis. Aunque este estudio fue realizado en pocos animales, este provee información útil para el diagnóstico de la brucelosis ovina en una majada endémica y refuerza la necesidad de dos controles por año.Brucella ovis is the etiological agent of contagious epididymitis in rams. Prevalence increases when biannual control was not performed in B. ovis endemic flocks. Diagnosis is based on clinical examination, serological tests and bacteriological isolation of B. ovis from semen. Semen analysis by PCR technique complements the direct diagnosis for the detection of B. ovis or other pathogens of reproduction in sheep. In this work, different strategies for the diagnosis of contagious epididymitis in a flock, which this disease have been apparently controlled, were compared. Twenty-two rams were clinically examined and serum samples were analyzed different serological tests. Semen samples were cultured in bacteriological media and were evaluated by multiplex PCR. Rams with a positive culture were necropsied and testes, epididymides, vesicular glands and ampullaes were taken and studied by histopathology. B. ovis shedding in semen was significantly associated with the seropositivity and genital tract histopathological lesions. In our work, multiplex PCR showed a similar sensitivity to semen culture and could be used as a complementary test for the direct diagnosis of B. ovis. Although this study involved a low number of animals, it provides useful information for the diagnosis of ovine brucellosis in an endemic flock and reinforces the need for biannual control.Fil: Fiorentino, Maria Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Velilla, Alejandra Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Manes, Jorgelina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Diaz, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Clausse, María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Immune response and reproductive consequences in experimentally infected ewes with Brucella ovis during late pregnancy

La brucelosis ovina por Brucella ovis es una enfermedad de prevalencia alta en Argentina. Para evaluar la patogenicidad de B. ovis y la respuesta serológica durante el último mes de gestación, 6 ovejas se distribuyeron en dos grupos: G1, ovejas preñadas, n = 4 y G2, ovejas no preñadas, n = 2. Tres ovejas del G1 (15 días preparto) y una del G2 fueron inoculadas con B. ovis. Se analizaron muestras de suero mediante diferentes pruebas serológicas. Se realizó aislamiento y PCR a partir de mucus cérvico-vaginal (mcv), placenta y leche. En las muestras de placenta se realizó histopatología. Las hembras del G1 parieron corderos vivos; se detectaron anticuerpos en las ovejas desafiadas del G1 a partir de los 5 días posinoculación. El mcv de las ovejas desafiadas resultó negativo al aislamiento en ambos grupos. Las muestras de leche del G1 fueron positivas por cultivo y PCR a B. ovis. La técnica de PCR resultó positiva en las placentas de las ovejas desafiadas del G1. La histopatología reveló una placentitis necrótica supurativaen una de las ovejas desafiadas. El desafío con B. ovis preparto resultó en la invasión de la placenta y de la glándula mamaria, con la consecuente excreción de la bacteria por leche. La infección con B. ovis indujo una respuesta humoral temprana en las ovejas. La colonización de la placenta por B. ovis y la excreción de la bacteria por la leche sugieren un potencial riesgo de infección activa para los corderos y la posibilidad de que estos se comporten como portadores latentes de la infección.Ovine brucellosis by Brucella ovis is a highly prevalent disease in Argentina. This study aimed to evaluate the pathogenicity of B. ovis and the serological response in ewes during late pregnancy and in their offspring. Six adult ewes were distributed in two groupsGI (pregnant females, n = 4) and G2 (nonpregnant females, n = 2). Three pregnant ewes at 15 days prepartum and one nonpregnant eve were inoculated with B. ovis. Sera of sheep and their offspring were analyzed by different serological tests. Samples of cervicovaginal mucus, placenta and milk were studied by bacteriology. A Brucella genus-specific PCR assay was carried out in placenta and milk samples. Placenta samples were hystopathologically processed. G1 females gave birth to live lambs, but one died hours postpartum. Serological techniques employed detected antibodies in serum of inoculated pregnant animal 5 days postchallenge. Sera of female controls G1 and G2 remained negative throughout the study. Cervicovaginal mucus of infected ewes in G1 and G2 yielded negative results to bacteriology, but B. ovis was isolated from milk. The PCR assay was positive for the placenta and milk from inoculated pregnant ewes. Histopathology revealed necrotic suppurative placentitis in one placenta. However, although results demonstrated that B. ovis can invade the placenta and mammary gland, this bacterium did not cause abortion when it was inoculated intravenously at 15 days prepartum. B. ovis infection induced an early humoral response in pregnant ewes, but their lambs remained seronegative, indicating that there was no transfer of antibodies in infancy. Placenta colonization and milk excretion of B. ovis involves a potential source of infection for lambs, which could play a role as latent carriers of infection.Fil: Paolicchi, Fernando Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Nuñez, Marta. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Fiorentino, Maria Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Malena, Rosana C.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Trangoni, Marcos. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Cravero, Silvio Lorenzo Pedro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentin

Isolamento de micobactérias em Felis concolor em cativeiro

This study was made in a wildlife preserve from Argentina where a previous tuberculosis report in Felis concolor has been done. The aim was to identify mycobacterial species isolated from the orpharynx of five American lions using bacteriological and molecular biology techniques on cases with nonspecific clinical signals. Samples were collected after sedation. They were treated in order to isolate Mycobacterium. Bacteriological differentiation was made using biochemical tests. Polymerase chain reaction has been performed to detect hsp65, IS6110 and IS1081. Acid fast bacilli were present in four specimens and from them were isolated slowly growing mycobacteria. The strains were differentiated as M. gordonae in two cases and M. simiae, M. scrofulaceum and M. avium/intracellulare in one case each other. The strains were identified as M. gordonae in three cases and M. avium III or M. simiae in two by PRA. The role of feral cats in the epidemiology of nontuberculous mycobacterial diseases remains to be further investigated.Este trabalho foi realizado em uma reserva natural da Argentina com antecedentes de tuberculose em uma suçuarana adulta. O objetivo foi identificar por meio de técnicas bacteriológicas e de biologia molecular as espécies isoladas da orofaringe de cinco suçuaranas que apresentavam sinais clínicos inespecíficos. As amostras foram colhidas das suçuaranas após sedação. Posteriormente foram processadas para obtenção do isolamento e identificação por meio de provas bioquímicas do gênero Mycobacterium pela técnica de PCR. Investigou-se a presença das seqüências de inserção IS6110 e IS1081 e hsp65. Obtiveram-se resultados positivos à coloração de Ziehl-Neelsen de quatro amostras, isolando cinco cepas de crescimento lento. As cepas foram classificadas como M. gordonae em dois casos e M. simiae, M scrofulaceum e M. avium/intracellulare em um. Por PRA, identificou-se o padrão de M. gordonae em três cepas e M. avium III ou M. simiae em dois