Inhibition of mouse and rat lymphoproliferation by gangliosides

Our previous study have demonstrated that Glycosphingolipids (GSLs) have an immunosuppressive effect on murine lymphoproliferation and IL-2 production. In the present study we examined the effect of a pool of Gangliosides (Gang) on spleen lymphocyte proliferation from either isogeneic strains of Wistar rats or BALB/c mice. Two hundred-fifty grams adult female isogeneic Wistar rats and 8-week-old BALB/c mice were used. The animals were sacrificed and the spleen harvested aseptically for cellular assays. Spleen cells suspensions were obtained by homogenization in RPMI 1640 with a loose tissue grinder. After washing, the cells were suspended in RPMI 1640 supplemented. Cell viability was measured by Trypan blue exclusion. Cells were cultured in triplicate using increasing concentrations of Gang (1; 2; 5; 10; 15; 20 mug/well) and in the presence of Concanavalin A. The cells were incubated for 48 hours and were pulsed with [³H] thymidine 18 hours prior to harvesting on glass fiber paper for counting in a beta-counter. Data were presented as rate of inhibition, as previously described. At concentrations 1 and 2 mug/well, Gang stimulated lymphoproliferation (30% and 50%, rats and mice respectively), while at concentration from 5 to 20 mug/well an increasing inhibition was observed for spleen cells from both mouse and rat (from 40% up to 80%). In preliminary studies we observed inhibition of mixed lymphocyte reaction on spleen cells from rats treated with Gang for 10 days (data not shown). Our data suggest that Gang may be investigated as a immunosuppressive drug in organ transplantation.UNIFESP-EPM Departamento de CirurgiaUNIFESP-EPM Disciplina de Técnica Operatória e Cirurgia ExperimentalUNIFESP-EPM Disciplina de ParasitologiaUNIFESP, EPM, Depto. de CirurgiaUNIFESP, EPM Disciplina de Técnica Operatória e Cirurgia ExperimentalUNIFESP, EPM Disciplina de ParasitologiaSciEL

Liver microcirculation after selective denervation

Microcirculatory disturbances have been related to a decrease in survival after liver transplant. Because innervation is involved in liver hemodynamics regulation, we decided to evaluate microcirculatory hepatic perfusion. Thirty rats were divided into three groups: denervated (DG), hepatic microsurgical denervation; manipulated (MG), hepatic manipulation; control (CG), laparotomy. Hepatic microcirculation was assessed in the median lobe using laser Doppler flowmetry in the following moments: T-0, after laparotomy and T-1, after denervation; and in the following moments after derevation: T-2, 10 minutes, T-3, 20 minutes, T-4, 30 minutes, T-5, 1 hour, T-6, 1.5 hours, and T-7, 2 hours for DG, and in same moments for MG and CG. DG showed a decrease in hepatic perfusion for 20 minutes after denervation, different from MG and CG. After that, there was recovery in hepatic perfusion in MG and DG (Kruskal-Wallis and Friedman tests). Therefore, denervation and manipulation alter hepatic microcirculation, but denervation promotes a more severe decrease than manipulation. (C) 2001 Willey-Liss, Inc.Universidade Federal de São Paulo, Escola Paulista Med, Dept Surg, Operat Tech & Expt Surg Div, BR-04023062 São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Escola Paulista Med, Dept Surg, Operat Tech & Expt Surg Div, BR-04023062 São Paulo, BrazilWeb of Scienc

Efeito imunossupressor dos gangliosídeos: estudo "in vivo"

Imunomodulação mais específica e eficaz é uma meta importante a ser atingida na área de órgão. Neste sentido, foi estudado previamente o papel imunomodulador dos gangliosídeos "in vitro". No presente trabalho objetivou-se avaliar este efeito agora "in vivo", mimetizando a situação do transplante alogênico. Foram utilizados 26 ratos Wistar 1 EPM, machos, com 3 meses de idade, pesando cerca de 250g, procedentes do Centro de Desenvolvimento de Pesquisa Experimental em Medicina e Biologia. Os animais fora mantidos por 5 dias, para adaptação, no biotério setorial da Disciplina de Técnica Operatória e Cirurgia Experimental da UNIFESP-EPM, recebendo água e ração própria para a espécie. Os animais foram distribuídos em grupos conforme segue: grupos experimento (que receberam 1, 3 e 6 mg/kg/dia de gangliosídeos) e um grupo controle que recebeu veículo, todos por via intramuscular durante 7 dias consecutivos. No 8º dia, com os animais anestesiados com éter etílico foi feita a remoção cirúrgica do baço de todos os animais, os quais foram sacrificados por exsanguinação, ainda sob efeito anestésico. Os baços removidos foram processados para a obtenção de linfócitos os quais foram cultivados em placa de cultura com 96 poços, distribuídos da seguinte forma: 1,5x10(5) linfócitos viáveis de cada animal dos grupos experimento e controle foram cultivados com 1,5x10(5) linfócitos viáveis de um rato não tratado, sendo assim realizada a reação mista de linfócitos. Os linfócitos provenientes dos animais dos grupos controle e 1 mg apresentaram aumento da proliferação sem nenhuma alteração. Por outro lado, foi observada uma taxa de inibição ao redor de 70% sobre a proliferação linfocitária dos animais dos grupos 3 e 6 mg comparados aos animais dos grupos controle e 1 mg. O resultado desta investigação estimula a utilização dos gangliosídeos no tratamento da rejeição alogênica

Comparação das anastomoses esôfago-gástricas término-terminais em plano único e por invaginação de submucosa e mucosa, em ratos

A cirurgia do esôfago ainda representa um grande desafio técnico-cirúrgico, devido a alta incidência de fístulas e estenoses. A anastomose esôfago-gástrica por telescopagem de um tubo cranial de submucosa e mucosa, desponta como grande esperança na melhoria dos resultados. Comparamos, em ratos, a anastomose extra-mucosa em plano único com telescopagem de tubo de submucosa e mucosa, com a realizada sem o tubo, procurando confirmar a eficácia desta anastomose na proteção da sutura contra a ocorrência de fístulas, e verificar se em um prazo maior de observação, esta técnica não aumentaria a ocorrência de estenoses. Utilizamos 40 ratos Wistar distribuídos em 2 grupos com 20 animais, sendo que, 10 foram observados por 7 dias e 10 por 14 dias. A avaliação dos resultados foi feita através de parâmetros medidos nas duas operações, como a variação ponderal, variação do diâmetro externo do esôfago, e o índice de estenose; além da análise à microscopia ótica. Foi feita análise estatística de todos os resultados. Os animais com a anastomose por invaginação de submucosa e mucosa, tiveram menor incidência de complicações, confirmando a segurança deste tipo de anastomose e suas vantagens em relação à anastomose convencional