Polysaccharide-based nanoparticles for cancer therapy

Tese de Mestrado Integrado. Bioengenharia. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 201

New roles of Rab GTPases on eye diseases: targeting VEGF secretion

RESUMO: A retina é composta, entre outras estruturas, pelo epitélio pigmentar da retina (EPR)e pela coróide. A região central da retina denomina-se mácula, e é a zona mais afetada na degenerescência macular relacionada com a idade, a forma mais comum de degenerescência da retina. Nesta doença, a secreção de fatores de crescimento pelo EPR é afetada, nomeadamente a do fator de crescimento vascular endotelial (VEGF), e pouco se sabe ainda sobre os mecanismos moleculares conducentes a esta condição. A família de proteínas Rab GTPases está envolvida nas vias intracelulares de sinalização e tráfego membranares, essenciais na transdução de sinais extracelulares em respostas biológicas. A sua crucial importância nestes mecanismos levou-nos a considerar o seu potencial envolvimento nas vias de secreção do VEGF, e a questionar-nos se teriam algum papel regulador sobre as mesmas. O principal objetivo deste trabalho é identificar Rab GTPases importantes para as vias de secreção e endocitose do VEGF no EPR. Essa identificação ajudará a esclarecer a patogénese da degenerescência macular da retina, e poderá servir para uma procura mais direcionada de novos agentes terapêuticos. A caracterização de dois modelos in vitro do EPR, células primárias isoladas de murganho e a linha celular B6-RPE07,levou-nos a concluir que são ambos semelhantes. Contudo, a linha celular foi escolhida como protótipo do EPR por permitir o acesso a um número ilimitado de células. No decurso deste trabalho, desenvolvemos e caracterizámos uma biblioteca de ferramentas moleculares que nos permitiram reduzir os níveis proteicos das proteínas Rab GTPases, com base na tecnologia de ácido ribonucleico (ARN) de interferência. O papel das proteínas Rab GTPases na secreção do VEGF no EPR foi estudado com base no silenciamento de apenas uma proteína, ou combinando várias, segundo a sua localização e funções intracelulares descritas. Este trabalho permitiu-nos concluir que as proteínas Rab GTPases são importantes intervenientes no processo de secreção de VEGF pelo EPR, e confirmar dados anteriores que relatam o envolvimento de algumas Rab GTPases endocíticas no processo. Propomos ainda um novo modelo para a interação destas proteínas no EPR, e sugerimos que a Rab10 e a Rab14 atuam negativamente sobre a Rab8, controlando o seu funcionamento. Os nossos resultados evidenciam a importância das proteínas Rab GTPases na secreção do VEGF pelas células do EPR, e servem de base a futuros estudos que melhor procurem compreender este mecanismo e de que modo a sua alteração se relaciona com a degenerescência da retina.--------ABSTRACT: Retinal pigment epithelium (RPE) and choroid are components of the mammalian retina, of which the central region is called macula. The most common form of retinaldegeneration, age-related macular degeneration (AMD), involves primarily deregulation of growth factors secretion by the RPE. Very little is known about the molecular mechanisms that lead to impairment of RPE’s homeostatic intracellular processes, namely the secretion of vascular endothelial growth factor (VEGF). Rab GTPases’ family regulates membrane targeting and traffic, being essential in the transduction of signal pathways. Given Rab proteins’ role in intracellular trafficking, we propose to identify key regulatory Rab proteins involved in either the secretory or the recycling pathways of VEGF in RPE. Understanding how Rab proteins’ function disruption could lead to retinal and choroidal pathology would ultimately contribute to find new therapeutic agents. Here, we characterized two mouse RPE in vitro cell models, primary cells and B6-RPE07 cell line, and concluded that both display important epithelial features as the RPE presents in vivo. Considering unlimited cell number and results reproducibility, we chose B6-RPE07 cells to further study Rab proteins’ function. To scrutinize the consequences of Rab proteins’ absence or diminished levels, we have developed novel molecular tools to achieve silencing of these key proteins using miRNA technology. We further addressed the effect of Rab proteins’ absence on VEGF secretion by performing an extensive screening where different Rab proteins were silenced, both individually and in multiple combinations considering their cellular/ compartment location. We conclude that Rab GTPases are important intervenients in VEGF secretion by RPE cells, confirming endocytic Rab proteins’ role in regulation of VEGF biology. We also propose a novel model for Rab proteins’ interaction in RPE. Our results suggest that Rab10 and Rab14 might influence Rab8 in a negative feedback mechanism, important for controlling VEGF secretion. Our achievements’ unravel Rab proteins’ role in VEGF secretion by RPE cells and are the basis for future studies to better understand RPE molecular secretory machinery

The interlocution of mental health with primary care in the city of Vitoria - ES

Abstract: So as to contribute to the advancement of the Psychiatric Reform in Brazil, one of the strategies that have been directed by public policies is the proposition of the articulation between primary care services and mental health services. The dialog between these services in the city of Vitoria (Southeastern Brazil) has currently been enabled mainly by Matrix Support. This paper presents the results of a research endeavor aimed at analyzing this ongoing interlocution in the aforementioned city. It was assumed in the study that the achievements of this dialog can positively impact community life and benefit both the professionals' practice and users. This is a qualitative study and data were collected through semi-structured interviews carried out with fourteen health professionals of various categories who worked at a Centro de Atenção Psicossocial (CAPS - Psychosocial Care Center) and at a Family Health Unit. Results show that the so-called interlocution takes different forms in the territory, with important dialogs but also great challenges. However, rich possibilities can be envisioned and perceived as indications that we must believe and make investments in the potentiality of the constitution of a substitutive net between the CAPS and primary care services as a way of guaranteeing integrality to users with mental disorders. This articulation was first outlined in Vitoria with the systematization of Matrix Support. The belief in this dialog has brought with it de-institutionalization and the transformation of the production of care in the territory.Para contribuição ao avanço da Reforma Psiquiátrica Brasileira, uma das estratégias que vêm sendo direcionadas pelas políticas públicas é a proposição da articulação entre os serviços de atenção básica e os de saúde mental. Atualmente, a aproximação desses serviços no município de Vitória, no Espírito Santo, tem ocorrido principalmente por meio do apoio matricial. Este artigo apresenta os resultados de uma pesquisa que teve como objetivo analisar essa interlocução em curso neste município. Partiu-se do pressuposto de que as conquistas dessa aproximação podem inferir positivamente na vida da comunidade e trazer benefícios tanto para a prática dos profissionais quanto para os usuários. Trata-se de estudo de abordagem qualitativa, realizado a partir de entrevistas semiestruturadas com 14 profissionais de diversas categorias da área de saúde inseridos em um Centro de Atenção Psicossocial (CAPS) e em uma Unidade de Saúde da Família (USF). Os resultados mostraram que a referida interlocução ocorre de forma diferente no território, com aproximações importantes, mas com grandes desafios. Entretanto, as ricas possibilidades já podem ser percebidas com indicações de que é preciso investir e acreditar na potencialidade da constituição de uma rede substitutiva entre os CAPS e a atenção básica, como forma de garantir a integralidade aos usuários com transtorno mental. Essa articulação começou a se delinear no município de Vitória-ES, com a sistematização do apoio matricial. A aposta nessa aproximação tem significado desinstitucionalizar e, assim, transformar a produção do cuidado no território.Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Saúde, Educação e SociedadeUNIFESP, Depto. de Saúde, Educação e SociedadeSciEL

Efeitos da disrupção endócrina do Bisfenol A na artéria umbilical humana

Atualmente o plastificante bisfenol A (BPA) é um dos químicos produzidos em maior volume mundialmente.O BPA está presente em plásticos policarbonatos e resinas epóxi, comumente utilizado em produtos de armazenamento alimentar, industriais, médicos,etc. Estudos recentes investigam as propriedades disruptivas do BPA, contudo no que diz respeito aos efeitos cardiotóxicos, a maioria são epidemiológicos, não existindo suficiente entendimento do modo de ação deste composto em modelos humanos. Neste sentido, o objetivo geral do presente trabalho consistiu no estudo do efeito do BPA no tónus arterial e na análise dos possíveis mecanismos envolvidos neste efeito. Para atingir esse objetivo foram delineados os seguintes objetivos específicos: 1) Realização do isolamento e cultura de células musculares lisas da artéria umbilical humana (HUASMC); 2) Analisar o efeito do BPA em artérias umbilicais humanas (HUA) sem endotélio-efeito direto; 3)Analisar possíveis mecanismos envolvidos no efeito do BPA em HUA, principalmente o envolvimento dos nucleótidos cíclicos e dos canais de cálcio- estudos de mecanística; 4)Analisar o efeito do bisfenol A na expressão de diferentes proteínas contrácteis nas HUASMC por Real time-PCR; 5)Analisar computacionalmenteaa interação do BPA com proteínas envolvidas nas vias de sinalização endotelial. Os nossos resultadosdemonstraram que a exposição a BPA pode modificar a resposta vasorelaxante do HUA, interferindo com a via NO (óxido nítrico) /sGC (guanilciclase solúvel) /cGMP (guanosina monofosfato cíclica) /PKG(proteína cinase G) através da modulação do sGC e ativação dos canais BKCa (canais de potássio de alta condutância ativados por cálcio). Além disso, o BPA parece modular a atividade e expressão dos VOCC do tipo L. Portanto, as nossas descobertas sugerem que o BPA pode ser um indutor de perturbações hipertensivas da gravidez, tais como hipertensão gestacional e pré-eclâmpsia.Currently the plasticizer bisphenol A (BPA) is one of the most widely produced chemicals worldwide. BPA is present in polycarbonate plastics and epoxy resins, commonly used in food storage, industrial, medical, etc. Recent studies investigate the disruptive properties of BPA, however regarding cardiotoxic effects, most are epidemiological, and there is insufficient understanding of the mode of action of this compound in human models. In this sense, the aim of the present work was to study the effect of BPA on arterial tone and to analyze the possible mechanisms involved in this effect. To achieve this purpose, the following specific objectives were outlined: 1) Perform isolation and culture of human umbilical artery smooth muscle cells (HUASMC); 2) Analyze the effect of BPA on human umbilical arteries (HUA) without endothelium- direct effect; 3) Analyze possible mechanisms involved in the effect of BPA on HUA, mainly the involvement of cyclic nucleotides and calcium channels- mechanistic studies; 4) To analyze the effect of bisphenol A on the expression of different contractile proteins in HUASMCs by Real time PCR; 5) To computationally analyze the interaction of BPA with proteins involved in endothelial signaling pathways. Our results demonstrated that BPA exposure can modify the vasorelaxant response of HUA by interfering with the NO (nitric oxide)/sGC (guanyl cyclase soluble)/cGMP (cyclic guanosine monophosphate)/PKG (protein kinase G) pathway through modulation of sGC and activation of BKCa(large conductance calcium-activated potassiumchannels). In addition, BPA appears to modulate L-type VOCC (voltage operated calcium channel) activity and expression. Therefore, our findings suggest that BPA may be an inducer of hypertensive disorders of pregnancy, such as gestational hypertension and preeclampsia

O uso pela RTP de conteúdos produzidos por cidadãos: o caso do Jornal da Tarde

Dão-se em simultâneo muitos acontecimentos a que os critérios jornalísticos conferem noticiabilidade e isso torna impossível que os jornalistas estejam em todos esses sítios e consigam registar todos os momentos. É aqui que o cidadão comum desempenha um papel importante, ele acaba por estar presente em muitos destes acontecimentos e regista-os através de um telemóvel e, muitas vezes, acaba por divulgar esses conteúdos nas plataformas online. A relação entre os órgãos de comunicação social e os conteúdos produzidos pelos cidadãos foi o ponto de partida desta investigação. A televisão é o meio de comunicação social principal deste estudo devido às suas características e à sua relação com a imagem. Assim, o principal objetivo desta investigação é perceber qual é o uso que a televisão, mais concretamente a RTP1, dá aos conteúdos produzidos pelos cidadãos. Com esta investigação procura-se perceber qual é a importância dada pela RTP1 a estes conteúdos, a frequência com que são utilizados, de que forma chegam à redação, se são identificados ou não, perceber quais são as técnicas e métodos de seleção e verificação deste conteúdo e perceber se existe algum regulamento ético dentro do próprio canal que oriente os profissionais relativamente a estes conteúdos. Para dar resposta a estas dúvidas, a primeira parte da dissertação é centrada num enquadramento teórico que reflete sobre temas como o jornalismo participativo, o gatekeeping e o gatewatching, os valores-notícia e um último capítulo que aborda a televisão como um meio de comunicação. A segunda parte, é focada na análise empírica, com um enquadramento do canal informativo e a análise e discussão dos resultados desta investigação.There are many events at the same time to which the journalistic criteria confer newsworthiness and this makes it impossible for journalists to be in all the these places and be able to record all the moments. This is where the ordinary citizen plays an important role, he ends up being present at many of these events and records them through a mobile phone and often ends up disseminating these contents on online platforms. The relationship between the media and the content produced by citizens was the starting point of the investigation. Television is the main means of social communication in this study due to its characteristics and its relationship with the image. Thus, the main objective of this research is to understand what is the use that television, more specifically RTP1, gives to the contents produced by citizens. With this research we seek to understand what is the importance given by RTP1 to these contents, the frequency with which they used, how they reach the newsroom, whether they identified or not, understand what are the techniques and methods of selection and verification of this content and understand if there is any ethical regulation within the channel itself that guides professionals regarding these contents. To answer these questions, the first part of the dissertation is centered on a theoretical framework that reflects on topics such as participatory journalism, gatekeeping and gatewatchig, news-values and a final chapter that addresses television as means of communication. The second part if focused on empirical analysis, with a framing of the information channel and the analysis and discussion of the results of this investigation

Variáveis preditoras do funcionamento neurocognitvo após Síndrome Coronária Aguda

Introdução: A Síndrome Coronária Aguda (SCA) reagrupa diferentes doenças que incluem: Enfarte Agudo do Miocárdio (EAM) e Angina Pectoris (AP). Sendo que as células cerebrais são extremamente sensíveis a alterações, a redução no fluxo sanguíneo pode causar a morte celular e afetar a função cerebral (Buja, 2005). Investigações interdisciplinares estabeleceram um elo de ligação entre a Psicologia e a Cardiologia. Objetivos: Esta investigação tem como objetivo identificar quais as variáveis preditoras do funcionamento neurocognitivo após SCA. Métodos: A amostra é constituída por 63 pacientes. Foi administrado O ACE-III e a HADS presencialmente, após EAM. Resultados: De acordo com a regressão linear múltipla efetuada, as variáveis preditoras do funcionamento neurocognitivo (resultado no ACE-III), são em ordem decrescente de importância: o nível de colesterol total, o nível de depressão, a presença de hipertensão arterial, o índice de glicose, os níveis de triglicéridos e o rácio perímetro. Este modelo preditor apresenta um R2 de .588. Conclusões: Correlação positiva dos múltiplos fatores de risco na síndrome metabólica com menor função executiva e desempenho cognitivo global. Especificamente em estados depressivos prolongados o eixo hipotálamo-hipófise-supra-renal aumenta a secreção de cortisol provocando dano cerebral responsável pelo comprometimento cognitivo. Estes resultados permitem uma atuação na prevenção e reabilitação. Em cardiologia, uma intervenção mais direcionada para a síndrome metabólica e na psicologia para o transtorno depressivo, gestão de stress e funções cognitivas que tendem a ser mais comprometidas quando associadas à patologia cardíaca.Introduction: Acute Coronary Syndrome (ACS) brings together different diseases that include Acute Myocardial Infarction (MI) and Angina Pectoris (AP). Since brain cells are extremely sensitive to changes, reduced blood flow can cause cell death and affect brain function (Buja, 2005). Interdisciplinary investigations have established a link between Psychology and Cardiology. Objectives: This investigation aims to identify which variables predict neurocognitive functioning after an ACS. Methods: The sample consists of 63 patients. ACE-III and HADS were administered in person, after MI. Results: According to the multiple linear regression carried out, the predictor variables of neurocognitive functioning (result in ACE-III) are, in decreasing order of importance: the level of total cholesterol, the level of depression, the presence of arterial hypertension, the glucose index, triglyceride levels and perimeter ratio. This predictive model has an R2 of .588. Conclusions: Positive correlation of multiple risk factors in metabolic syndrome with lower executive function and global cognitive performance. Specifically, in prolonged depressive states, the hypothalamic-pituitary-adrenal axis increases the secretion of cortisol, causing brain damage responsible for cognitive impairment. These results allow action in prevention and rehabilitation. In cardiology, a more targeted intervention for metabolic syndrome and in psychology for depressive disorder, stress management and cognitive functions that tend to be more compromised when associated with cardiac pathology

Learner’s satisfaction within a breast imaging eLearning course for radiographers

Background: An asynchronous eLearning system was developed for radiographers in order to promote a better knowledge about senology and mammography. Objectives: to assess the learners’ satisfaction. Methods: Target population included radiographers and radiogr aphy students, in order to assess eLearning satisfaction according to different experience levels in breast imaging. Satisfaction was measured through a questionnaire developed especially for eLearning systems, using a seven - point Likert scale. Main topics related are content, interface, personalization and learning community. Results: Overall, 85% of learners were satisfied with the course and 87,5% considered that the course is successful. Main areas that were evaluated by most learners in a positive way were interface and content (between six and seven - point); on the other hand, learning community presented a wider distribution of answers . Conclusions: The course provides an overall high degree of learner satisfaction, thus providing more effective knowle dge gain on breast imaging for radiographers