ANÁLISES DE MEMBRANA PLASMÁTICA, ACROSSOMA E MITOCÔNDRIA DE ESPERMATOZOIDE OVINO APÓS CRIOPRESERVAÇÃO COM ADIÇÃO DO ÁCIDO FÓLICO NO MEIO TRIS-GEMA

Folic acid is closely linked to cobalamin, which is a carrier of hydroxymethyl and ant groups. The objective of this work was to evaluate the effect of adding folic acid to the TRIS-yolk diluter and possible effect on the membrane, mitochondria and acrosome of sheep sperm after thawing the semen. There were six sheep and seven collections of each animal in sessions between 48 and 72 hours. After collection and analysis, the semen samples were mixed and submitted to the formation of a pool. Diluted in TRIS-yolk medium, and divided into 3 groups; Group control; Group 2: 10,000 µM of folic acid and in Group 3: 5000 µM of folic acid. Subsequently, the semen samples were packaged in 0.25 mL straws and processed in a semen freezing machine. After a few days, the semen was thawed and evaluated: plasma membrane integrity, acrosome function and integrity. They were analyzed using an analysis of variance (ANOVA) followed by the Newman-Keuls test, using SAS. The addition of a micronutrient with potential antioxidant action in the semen indicates that it can reduce the action of free radicals that alter the plasma membrane and sperm DNA. The evaluation of the plasma membrane integrity, mitochondrial activity and the acrosome integrity of post-thawed sperm were not significantly different between the groups evaluated. Thus, it is concluded that the addition of folic acid in concentrations of 5000 µM and 10000 µM to the TRIS-yolk seminal diluter does not significantly influence the variables evaluated in this experiment.O ácido fólico está intimamente ligado à cobalamina, que é um transportador de grupos hidroximetil e formiga. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adição de ácido fólico ao diluidor TRIS-gema e possível efeito sobre a membrana, mitocôndrias e acrossoma de espermatozoides ovinos após descongelamento do sêmen. Foram seis ovinos e sete coletas de cada animal em sessões entre 48 e 72 horas. Após coleta e análise, as amostras de sêmen foram misturadas e submetidas à formação de um pool. Diluído em meio TRIS-gema, e dividido em 3 grupos; Controle de grupo; Grupo 2: 10.000 µM de ácido fólico e no Grupo 3: 5.000 µM de ácido fólico. Posteriormente, as amostras de sêmen foram acondicionadas em palhetas de 0,25 mL e processadas em máquina de congelamento de sêmen. Após alguns dias, o sêmen foi descongelado e avaliado: integridade da membrana plasmática, função acrossômica e integridade. Eles foram analisados por meio de análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Newman-Keuls, usando o SAS. A adição de um micronutriente com potencial ação antioxidante no sêmen indica que pode reduzir a ação de radicais livres que alteram a membrana plasmática e o DNA espermático. A avaliação da integridade da membrana plasmática, atividade mitocondrial e integridade acrossômica dos espermatozóides pós-descongelados não foram significativamente diferentes entre os grupos avaliados. Assim, conclui-se que a adição de ácido fólico nas concentrações de 5000 µM e 10000 µM ao diluidor seminal TRIS-gema não influencia significativamente nas variáveis avaliadas neste experimento

ANÁLISES DE MEMBRANA PLASMÁTICA, ACROSSOMA E MITOCÔNDRIA DE ESPERMATOZOIDES OVINO APÓS CRIOPRESERVAÇÃO COM ADIÇÃO DO ÁCIDO FÓLICO NO MEIO TRIS-GEMA

Folic acid is closely linked to cobalamin, which is a carrier of hydroxymethyl and ant groups. The objective of this work was to evaluate the effect of adding folic acid to the TRIS-yolk diluter and possible effect on the membrane, mitochondria and acrosome of sheep sperm after thawing the semen. There were six sheep and seven collections of each animal in sessions between 48 and 72 hours. After collection and analysis, the semen samples were mixed and submitted to the formation of a pool. Diluted in TRIS-yolk medium and divided into 3 groups; Group control; Group 2: 10,000µM of folic acid and in Group 3: 5000µM of folic acid. Subsequently, the semen samples were packaged in 0.25mL straws and processed in a semen freezing machine. After a few days, the semen was thawed and evaluated: plasma membrane integrity, acrosome function and integrity. They were analyzed using an analysis of variance (ANOVA) followed by the Newman-Keuls test, using SAS. The addition of a micronutrient with potential antioxidant action in the semen indicates that it can reduce the action of free radicals that alter the plasma membrane and sperm DNA. The evaluation of the plasma membrane integrity, mitochondrial activity and the acrosome integrity of post-thawed sperm were not significantly different between the groups evaluated. Thus, it is concluded that the addition of folic acid in concentrations of 5000µM and 10000µM to the TRIS-yolk seminal diluter does not significantly influence the variables evaluated in this experiment.O ácido fólico está intimamente ligado à cobalamina, que é um transportador de grupos hidroximetil e formiga. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adição de ácido fólico ao diluidor TRIS-gema e possível efeito sobre a membrana, mitocôndrias e acrossoma de espermatozoides ovinos após descongelamento do sêmen. Foram seis ovinos e sete coletas de cada animal em sessões entre 48 e 72 horas. Após coleta e análise, as amostras de sêmen foram misturadas e submetidas à formação de um pool. Diluído em meio TRIS-gema e dividido em 3 grupos; Controle de grupo; Grupo 2: 10.000µM de ácido fólico e no Grupo 3: 5.000µM de ácido fólico. Posteriormente, as amostras de sêmen foram acondicionadas em palhetas de 0,25mL e processadas em máquina de congelamento de sêmen. Após alguns dias, o sêmen foi descongelado e avaliado: integridade da membrana plasmática, função acrossômica e integridade. Eles foram analisados por meio de análise de variância (ANOVA) seguida do teste de Newman-Keuls, usando o SAS. A adição de um micronutriente com potencial ação antioxidante no sêmen indica que pode reduzir a ação de radicais livres que alteram a membrana plasmática e o DNA espermático. A avaliação da integridade da membrana plasmática, atividade mitocondrial e integridade acrossômica dos espermatozóides pós-descongelados não foram significativamente diferentes entre os grupos avaliados. Assim, conclui-se que a adição de ácido fólico nas concentrações de 5000µM e 10000µM ao diluidor seminal TRIS-gema não influencia significativamente nas variáveis avaliadas neste experimento

INFLUÊNCIA DE UM ÁCIDO GRAXO ADICIONADO AO DILUENTE SEMINAL SOBRE A INTEGRIDADE DA MEMBRANA PLASMÁTICA DE ESPERMATOZOIDES CAPRINOS CRIOPRESERVADOS

The objective of this study was to evaluate the antioxidant effects of supplementing different concentrations (0.5μM, 5μM and 50μM) of polyunsaturated fatty acid, arachidonic acid to the TRIS-yolk diluter on the integrity of the plasma membrane during the cryopreservation of goat sperm. For this purpose, four Anglo-nubian goats were used, in which five samples / animal were collected, using artificial vagina. After evaluating the swirling and motility of the ejaculates, the pool was made, then diluted in TRIS-Gem and divided according to the treatments. After processing, the samples were packaged in 0.25mL straws and cryopreserved using the TK 3000® machine. Defrosting occurred after at least 5 days of storage in a cryogenic cylinder. Then, the integrity of the plasma membrane of goat sperm post cryopreservation was carried out, using the double staining method, where carboxyfluorescein diacetate (DCF) and propidium iodide (IP) were used. The data were analyzed and the results of the researched variable were subjected to analysis of variance (ANOVA) using the general linear models procedure (Proc GLM) and the Duncan test was used to compare the means, with a 5% probability. The analyzes were performed using the Statistical Analysis System program (SAS Institute Inc, 2013). After analysis, it was observed that the control group had the best percentage, and differed significantly (p<0.05) from the treatment with 50μM of arachidonic acid. It was concluded that the 50μM arachidonic acid concentration is not effective to maintain the integrity of the plasma membrane, and to minimize the oxidative stress of cryopreservation.O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos antioxidantes da suplementação de diferentes concentrações (0,5μM, 5μM e 50μM) de ácido graxo poliinsaturado, ácido araquidônico ao diluidor TRIS-gema sobre a integridade da membrana plasmática durante a criopreservação de sêmen caprino. Para tanto, foram utilizadas quatro cabras anglo-núbias, nas quais foram coletadas cinco amostras/animal, utilizando vagina artificial. Após avaliar o turbilhão e a motilidade dos ejaculados, foi feito o pool, diluído em TRIS-Gem e dividido de acordo com os tratamentos. Após o processamento, as amostras foram acondicionadas em palhetas de 0,25mL e criopreservadas em máquina TK 3000®. O degelo ocorreu após pelo menos 5 dias de armazenamento em cilindro criogênico. Em seguida, foi realizada a integridade da membrana plasmática de espermatozoides caprinos pós-criopreservação, utilizando o método de dupla coloração, onde foram utilizados diacetato de carboxifluoresceína (DCF) e iodeto de propídio (IP). Os dados foram analisados e os resultados da variável pesquisada foram submetidos à análise de variância (ANOVA) pelo procedimento de modelos lineares gerais (Proc GLM) e para comparação de médias foi utilizado o teste de Duncan, com probabilidade de 5%. As análises foram realizadas por meio do programa Statistical Analysis System (SAS Institute Inc, 2013). Após análise, observou-se que o grupo controle apresentou a melhor porcentagem, diferindo significativamente (p<0,05) do tratamento com 50μM de ácido araquidônico. Concluiu-se que a concentração de 50μM de ácido araquidônico não é eficaz para manter a integridade da membrana plasmática e minimizar o estresse oxidativo da criopreservação

SUPLEMENTAÇÃO DO ÁCIDO OLEICO NO DILENTE SEMINAL SOBRE O POTENCIAL MITOCONDRIAL DE ESPERMATOZOIDES CAPRINOS CRIOPRESERVADOS

The research aimed to evaluate the antioxidant effect of supplementation of 0.5μM, 5μM and 50μM of oleic acid to the TRIS-yolk extender on the mitochondrial potential (MIT) during the cryopreservation of goat sperm. For that, four Anglo-nubian goats were used, in which five samples / animal were collected, using artificial vagina. After evaluating the swirling and motility of the ejaculates, the pool was made, then diluted in TRIS-Gem and divided according to the treatments. After processing, the samples were packaged in 0.25mL straws and cryopreserved using the TK 3000® machine. After a minimum of 5 days of storage in a cryogenic cylinder, thawing was performed to assess the MIT of goat sperm after cryopreservation, using the lipophilic cationic fluorochrome JC-1. The data were submitted to analysis of variance (ANOVA), using the general linear models procedure (Proc GLM), and the Duncan test was used to compare the averages, with a 5% probability. The analyzes were performed using the Statistical Analysis System program (SAS Institute Inc, 2013). Thus, it was observed that the concentrations of 0.5μM and 5μM of oleic acid maintained the mitochondrial potential similar to the control, differing (p<0.05) only the concentration of 50μM. It can be concluded that 0.5μM and 5μM oleic acid are able to maintain the mitochondrial potential, prolonging the viability of cryopreserved goat sperm.A pesquisa teve como objetivo avaliar o efeito antioxidante da suplementação de 0,5μM, 5μM e 50μM de ácido oleico ao diluidor TRIS-gema sobre o potencial mitocondrial (MIT) durante a criopreservação de sêmen caprino. Para tanto, foram utilizadas quatro cabras anglo-núbias, nas quais foram coletadas cinco amostras/animal, utilizando vagina artificial. Após avaliar o turbilhão e a motilidade dos ejaculados, foi feito o pool, diluído em TRIS-Gem e dividido de acordo com os tratamentos. Após o processamento, as amostras foram acondicionadas em palhetas de 0,25mL e criopreservadas em máquina TK 3000®. Após um período mínimo de 5 dias de armazenamento em cilindro criogênico, foi realizado o descongelamento para avaliação do MIT do sêmen caprino após a criopreservação, utilizando o fluorocromo catiônico lipofílico JC-1. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA), utilizando-se o procedimento de modelos lineares gerais (Proc GLM), e o teste de Duncan foi utilizado para comparar as médias, com probabilidade de 5%. As análises foram realizadas por meio do programa Statistical Analysis System (SAS Institute Inc, 2013). Assim, observou-se que as concentrações de 0,5μM e 5μM de ácido oleico mantiveram o potencial mitocondrial semelhante ao controle, diferindo (p<0,05) apenas da concentração de 50μM. Pode-se concluir que 0,5μM e 5μM de ácido oleico são capazes de manter o potencial mitocondrial, prolongando a viabilidade do esperma caprino criopreservado

Leptospirose canina: Relato de caso

A Leptospirose é uma zoonose de distribuição mundial que apresenta o cão como importante hospedeiro, sendo crucial seu diagnóstico e tratamento nesta espécie, que possui estreita relação com o homem. Um canino foi atendido no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Piauí em Teresina, Piauí, apresentando histórico de hematúria, hiporexia e letargia há dois dias. O exame físico revelou letargia, mucosas oral, ocular e peniana ictéricas, dor à palpação abdominal e febre. Na análise hematológica foi detectada anemia macrocítica hipocrômica, trombocitopenia, leucocitose por neutrofilia, além de um aumento nos valores de ureia, AST, ALT, fosfatase alcalina e bilirrubinas. O exame de soroaglutinação microscópica mostrou resultado reagente a Leptospira interrogans sorovar Australis na titulação 1:100. O animal foi efetivamente tratado com Ampicilina, Doxiciclina e terapia de suporte

Inquérito soro-epidemiológico de Brucella ovis e Brucella abortus em rebanhos ovinos pertencentes à microrregião de Teresina, Brasil

O objetivo desse estudo foi realizar uma investigação epidemiológica da ocorrência de Brucella ovis e Brucella abortus nos rebanhos ovinos de municípios pertencentes à microrregião de Teresina, Piauí, Brasil. Foram analisadas amostras de 521 animais. A colheita de sangue foi realizada por venopunção e os tubos contendo as amostras foram encaminhados ao Laboratório de Fisiopatologia da Reprodução dos Animais Domésticos da Universidade Federal do Piauí para posterior análise. A pesquisa de anticorpos anti-Brucella ovis e anti- Brucella abortus foi realizada por meio das técnicas de Imunodifusão em Gel de Agar (IDGA) e Antígeno Acidificado Tamponado (AAT) respectivamente. Aos proprietários dos rebanhos foi aplicado um questionário contendo questões sobre os aspectos gerais da propriedade, do rebanho, manejo reprodutivo e sanitário dos animais. Não foram encontrados animais soropositivos para Brucella abortus. 53,6% das propriedades investigadas apresentaram pelo menos um caso de ovino soropositivo para Brucella ovis pelo teste de IDGA. 4,6% das amostras foram positivas para anticorpos anti- Brucela ovis. Das amostras positivas, 8,67% eram fêmeas e 1,02% machos. 13,6% das amostras positivas foram de animais com idade superior a 36 meses. O principal tipo de sistema de criação foi o extensivo. Em 28,6% das propriedades foi relatada a ocorrência de abortos. 7,1% das propriedades não realizavam nenhum manejo sanitário e somente 39,2% das propriedades recebiam algum tipo de assistência técnica. Com base nos achados deste estudo pode se concluir que a microrregião de Teresina está exposta a contaminação por Brucella ovis e o manejo sanitário e reprodutivo nas propriedades é deficiente, assim como a assistência técnica é pouco requisitada pelos produtores, prejudicando o controle e prevenção da brucelose ovina