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Candidiasis vaginal : estudio de receptores y mediadores inmunes innatos locales involucrados en la patogenia de la infección
Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2017Candidiasis vaginal: estudio de receptores y mediadores inmunes innatos locales involucrados en la patogenia de la infección La infección vaginal por especies de Candida, conocida como Candidiasis Vulvovaginal (CVV), constituye una enfermedad inflamatoria aguda y una razón frecuente de consulta ginecológica. Junto con su forma recurrente (CVVR) representan un importante problema de salud a nivel mundial. Pese a que el conocimiento sobre las causas y factores de riesgo para la adquisición y el desarrollo de esta micosis es extenso, los mecanismos inmunes que rigen la respuesta antifúngica protectora a nivel vaginal aún no han sido completamente esclarecidos. A pesar de la marcada incidencia de esta patología, varios aspectos de su etiopatogenia aún no han sido resueltos. Se desconocen muchos de los mecanismos que rigen las interacciones entre el hongo y las células residentes a nivel del tracto genital femenino. El rol del dimorfismo fúngico, la liberación de factores de virulencia como enzimas hidrolíticas y su efecto en la modulación de mediadores inmunes por la célula del epitelio vaginal aún no están totalmente establecidos. En este escenario el rol de los péptidos antimicrobianos, en particular las β-Defensinas, su mecanismo de inducción, regulación e impacto en la respuesta local en esta patología permanecen aún sin definir. En este trabajo de tesis estudiamos la relevancia de diversos receptores de la inmunidad innata en el desarrollo de la patología, a través de un modelo murino de CVV. Asimismo, fue nuestro objetivo esclarecer la participación de péptidos antimicrobianos de la familia de las β-Defensinas durante la infección vaginal por C. albicans. Nuestros resultados demuestran un rol protector de las señales mediadas por el receptor innato TLR2 y la molécula adaptadora MyD88 en la infección vaginal por C. albicans, siendo necesarios para el correcto control de la invasión tisular y de la respuesta inflamatoria asociada. El receptor innato Dectin-1 demostró ser importante durante esta patología contribuyendo en el reconocimiento del patógeno y limitando la exacerbación de la inflamación. Demostramos que β-Defensina 1, péptido antimicrobiano constitutivo y de relevantes funciones en los tractos mucosos, se encuentra aumentado durante la infección vaginal por C. albicans. Estudios efectuados en pacientes con CVV y CVVR, nos permitieron establecer las características clínico-epidemiológicas de esta infección en nuestro medio. Evaluando el lavado cervicovaginal de estas pacientes encontramos un perfil diferencial en la respuesta de mediadores inmunes como citoquinas y péptidos antimicrobianos en los dos grupos en estudio, que aportan nueva evidencia sobre los mecanismos inmunopatogénicos y la recurrencia de la patología en pacientes con CVVR. Finalmente, el uso de un modelo in vitro de interacción Candida-célula epitelial de tracto genital femenino humano, permitió establecer las señales involucradas en la modulación de la β-Defensina 1Fil: Miró, María Soledad Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Fil: Sotomayor, Claudia Elena.Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil: Sotomayor, Claudia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Bocco, José Luis Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina.Fil. Bocco, José Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Smania, Andrea María. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina.Fil: Smania, Andrea María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Fil: Touz, María Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentina.Fil: Baldi, Pablo César. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina
Role of C.albicans LIP in isolates from malignant lesions on in vitro model of human buccal cells
Candida is present in the normal oral flora, with albicans being the most frequent species. Since the 80´s, its association with other stomatological lesions has drawn significant attention. When immunocompetence breaks down, this opportunistic commensal fungus uses different virulence strategies to invade tissues, produce inflammatory response and cause damage. Among Candida´s virulence factors, hydrolytic enzymes such as protease (Sap) and lipase (LIP) have been described, but the contribution of lipase (LIP) to cell damage remains little known.ObjectiveOur aim was to evaluate the role as a virulence factor of C. albicans LIP released by isolates recovered from oral cancer lesion, in an in vitro model of human buccal cells. MethodsC. albicans strains isolated from lesions of oral squamous cell carcinoma (OSCC, n = 17) were co-cultured with human buccal mucosa fibroblasts in a Candida:fibroblast ratio 5:1 (3 x 105 fibroblasts / well) and incubated at 37°C during 24 h in a humid atmosphere and 5% CO2. C. albicans strains isolated from patients with healthy mucosa (HM, n = 15) were used as control. In order to establish the contribution of hydrolytic enzymes in cell damage, we added to the culture acetylsalicylic acid (ASA), a lipase inhibitor, or pepstatin (PEP), a Sap inhibitor. The evaluation of cell damage was performed using a damage index (DI = (LDH) sample / (LDH) monolayer). The release of cytokines IL-6 and TGF-β, after fungal stimulation, was evaluated by ELISA. Statistical analysis was performed by ANOVA test (p ≤0.05).ResultsC. albicans was able to induce cell injury on buccal human fibroblast. The highest DI was observed in the isolates of OSCC, whereas ASA addition produced a significant decrease in damage (p = 0.0178 in HM; p = 0. 05 in OSCC). Interestingly, the addition of Sap (inhibitor of PEP) in the culture did not significantly reduce the damage in co-cultures of the fungus isolated from OSCC and HM. A pro-inflammatory profile with a significant increase of IL-6 in the presence of both OSCC and HM isolates was observed (p < 0.0001 and 0.003, respectively), with higher levels when the cells were co-cultured with fungi recovered from malignant lesion (p = 0.01). In contrast, a significant decrease of the anti-inflammatory cytokine TGF-β was observed in the presence of the isolates compared with the fibroblast monolayer (p <0.0001 and p = 0.0004). ConclusionsThe results demonstrate the increased secretion of pro-inflammatory cytokines by the fibroblast monolayer in the presence of C. albicans. This inflammatory state, together with the damage observed and their decrease in the presence of ASA, could demonstrate the role of lipase in fungal virulence and its association with oral malignant lesions. These evidences reinforce the need for control of this commensal fungus when it overinfects lesions, suggesting its relevant role as a promoter of carcinogenesis.Fil: Castillo, Graciela del Valle. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica B; Argentina.Fil: Aguilar, Jonathan Damian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología; Argentina.Fil: Miró, María Soledad. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Fisicoquímica; Argentina.Fil: Sotomayor, Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicass. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Azcurra, Ana Isabel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Biología Celular B; Argentina.Otras Ciencias de la Salu
Receptores Innatos e IL-17 en la respuesta inmune frente a hongos patógenos humanos
Durante los últimos años, el aumento de las infecciones fúngicas invasivas en humanos, emerge asociado a la falta de diagnóstico precoz, terapias antifúngicas efectivas y al desarrollo de vacunas. Perturbaciones en la homeostasis inmune debido a intervencionesmédicas o a estados de inmunosupresión inducidos por diferentes enfermedades, son conocidos factores de riesgo para la adquisición de estas micosis. Las células del sistema inmune innato están equipadas con receptores de superficie y citoplasmáticos que permiten el reconocimiento de diferentes microorganismos y que colectivamente han sido denominados Receptores de Reconocimiento de Patrones (PRRs). Estos PRRs reconocenestructuras altamente conservadas en los microorganismos identificadas como Patrones Moleculares Asociados a Patógenos (PAMPs), que son claves para la activación del sistema inmune y la inducción de muerte de estos patógenos fúngicos. Esta revisión explora el rol de los PRRs, la participación de diferentes células en el desarrollo de una respuestaefectiva, con especial foco en la contribución de la IL-17 en la inmunidad antifúngica. La presencia de mutaciones naturales en humanos que confieren susceptibilidad a infecciones por hongos, su implicancia clínica y su aporte al conocimiento de la etiopatogenia de estas micosis es abordada en este artículo.Fil: Miró, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Vigezzi, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Rodriguez, Emilse. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Icely, Paula Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Caeiro, Juan Pablo. Hospital Privado Centro Medico de Córdoba; ArgentinaFil: Riera, Fernando Oscar. Hospital Córdoba; ArgentinaFil: Masih, Diana Teresa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Sotomayor, Claudia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin
Candida albicans modulates murine and human Beta Defensin-1 during vaginitis
Vulvovaginal candidiasis (VVC) and recurrent vulvovaginal candidiasis (RVVC) are two forms of a disease caused by Candida spp. β-defensin (BD) is one of the most important families of antimicrobial peptides in the female genital tract and includes molecules that exert essential local functions as antimicrobial and PMN chemoattractant peptides. However, the information on their role during murine and human VVC and RVVC is limited. Thus, we analyzed the behavior and contribution of BD1 to the local response in a VVC mice model and the local cytokine profile and human BD1 and BD3 expression in cervicovaginal lavage from patients with VVC and RVVC. We demonstrated that, in patients with RVVC BD1, mRNA and protein expression were severely diminished and that the aspartate proteinase and lipase secreted by C. albicans are involved in that decrease. This study provides novel information about the pathogenesis of VVC and describes a highly efficient C. albicans escape strategy for perpetuating the infection; these results may contribute to the development of new or combined treatment approaches.Fil: Miró, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Caeiro, Juan Pablo. Hospital Privado Centro Médico de Córdoba; ArgentinaFil: Rodriguez, Emilse. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Vargas, Lara. Sanatorio Allende; ArgentinaFil: Vigezzi, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Icely, Paula Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Castillo, Graciela del Valle. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología; ArgentinaFil: Azcurra, Ana Isabel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología; ArgentinaFil: Abiega, Claudio Daniel. Hospital Privado Centro Médico de Córdoba; ArgentinaFil: Riera, Fernando Oscar. Sanatorio Allende; ArgentinaFil: Sotomayor, Claudia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin
La mentoría en la Escuela Universitaria Politécnica de la Universidad de Sevilla
XVIII Congreso Universitario de Innovación Educativa en las Enseñanzas Técnicas. Escuela Técnica Superior de Ingenieros Industriales y de Telecomunicación. Universidad de Cantabria : Santander, 6 a 9 de julio de 2010Con el fin de integrar a los alumnos de nuevo ingreso, la Escuela Universitaria Politécnica de
la Universidad de Sevilla ha puesto en marcha en el curso 2008-09 un Plan de Acción
Tutorial (EUPAT) basado en una red en la que participan el profesorado tutor, alumnado
mentor y alumnado tutorizado. En el presente trabajo se resumirá el proceso de formación
del alumnado mentor y el trabajo desarrollado por el mismo dentro del Plan de Acción
Tutorial. Así mismo, se analizarán las dificultades encontradas durante el transcurso de su
formación y realización de la labor de mentoría y el nivel de satisfacción alcanzado.
Finalmente, se hará una reflexión sobre las debilidades y los puntos de mejora que se
pueden deducir del desarrollo hasta el momento de esta acción tutorialIn order to integrate new students, the Polytechnic School of the University of Seville has
launched in the year 2008-09 an Tutorial Action Plan (EUPAT) based on a network involving
teachers, mentor students and tutored students. In this paper we resume the formation of
mentor students and work developed by the same within the Tutorial Action Plan. Also,
analyzing the difficulties encountered during the course of their training and carrying out the
work of mentoring and the satisfaction level achieved. Finally, we will reflect on the
weaknesses and areas for improvement that can be deducted from the development until
the time of this action tutorial
Protagonismo del mentor en una actividad tutorial de carácter multidisciplinar en Ingeniería
XIX Congreso Universitario de Innovación Educativa en las Enseñanzas Técnicas : Barcelona, 6 a 8 de julio de 2011En la Escuela Politécnica Superior (EPS) de la Universidad de Sevilla se ha trabajado, por tercer curso consecutivo, en un Plan de Acción Tutorial desarrollado por 16 profesores tutores y 20 alumnos mentores de 5 titulaciones de Ingeniería Técnica. El objetivo perseguido en este curso ha sido potenciar actividades que han surgido del propio albedrío de los alumnos mentores, lo que ha dado como resultado la realización de una serie de actividades de mentoría motivadas y dirigidas desde el principio por los alumnos mentores. La actividad conjunta de todos ellos ha llevado a organizar unos subgrupos de mentorías en función de determinadas características del alumnado de primer curso (deportistas, trabajadores, becarios de otras universidades…), a realizar reuniones presenciales de mentores para puesta a punto de estas actividades así como de puesta al día de los resultados que se iban consiguiendo, además de organizar una segunda captación de mentorizados tras las notas del primer cuatrimestre, y la protagonización de una Jornada de Mentoría al final del curso.A third edition with 16 tutorial lecturers and 20 tutorial students from five different degrees (Technical Engineering of the Polytechnical School, EPS, at University of Seville) in a Tutorial Plan development, has been prepared. During the present year, the main characteristic has been a serial of mentoring actions motivated and directed by these mentors. This activity has been organized considering several subgroups of mentoring depending on special characteristics in first year students (sportsplayers, workers, grant holders from other universities…), moreover the organization of a second recruiting of new students after the first term marks, updating meetings for mentors only, and to be main figures in a Congress on Mentoring at the end of the academic year
Role of age and comorbidities in mortality of patients with infective endocarditis
[Purpose]: The aim of this study was to analyse the characteristics of patients with IE in three groups of age and to assess the ability of age and the Charlson Comorbidity Index (CCI) to predict mortality.
[Methods]: Prospective cohort study of all patients with IE included in the GAMES Spanish database between 2008 and 2015.Patients were stratified into three age groups:<65 years,65 to 80 years,and ≥ 80 years.The area under the receiver-operating characteristic (AUROC) curve was calculated to quantify the diagnostic accuracy of the CCI to predict mortality risk.
[Results]: A total of 3120 patients with IE (1327 < 65 years;1291 65-80 years;502 ≥ 80 years) were enrolled.Fever and heart failure were the most common presentations of IE, with no differences among age groups.Patients ≥80 years who underwent surgery were significantly lower compared with other age groups (14.3%,65 years; 20.5%,65-79 years; 31.3%,≥80 years). In-hospital mortality was lower in the <65-year group (20.3%,<65 years;30.1%,65-79 years;34.7%,≥80 years;p < 0.001) as well as 1-year mortality (3.2%, <65 years; 5.5%, 65-80 years;7.6%,≥80 years; p = 0.003).Independent predictors of mortality were age ≥ 80 years (hazard ratio [HR]:2.78;95% confidence interval [CI]:2.32–3.34), CCI ≥ 3 (HR:1.62; 95% CI:1.39–1.88),and non-performed surgery (HR:1.64;95% CI:11.16–1.58).When the three age groups were compared,the AUROC curve for CCI was significantly larger for patients aged <65 years(p < 0.001) for both in-hospital and 1-year mortality.
[Conclusion]: There were no differences in the clinical presentation of IE between the groups. Age ≥ 80 years, high comorbidity (measured by CCI),and non-performance of surgery were independent predictors of mortality in patients with IE.CCI could help to identify those patients with IE and surgical indication who present a lower risk of in-hospital and 1-year mortality after surgery, especially in the <65-year group
Ahora / Ara
La cinquena edició del microrelatari per l’eradicació de la violència contra les dones de l’Institut Universitari d’Estudis Feministes i de Gènere «Purificación Escribano» de la Universitat Jaume I vol ser una declaració d’esperança. Aquest és el moment en el qual les dones (i els homes) hem de fer un pas endavant i eliminar la violència sistèmica contra les dones. Ara és el moment de denunciar el masclisme i els micromasclismes començant a construir una societat més igualitària.
Cadascun dels relats del llibre és una denúncia i una declaració que ens encamina cap a un món millor
Lab-on-a-Valve Mesofluidic Platform for On-Chip Handling of Carbon-Coated Titanium Dioxide Nanotubes in a Disposable Microsolid Phase-Extraction Mode
Mesofluidic lab-on-a-valve (LOV) platforms have been proven suitable to accommodate automatic micro-solid-phase extraction (μSPE) approaches with on-chip handling of micrometer-bead materials in a fully disposable mode to prevent sample cross-contamination and pressure-drop effects. The efficiency of the extraction process notably depends upon the sorptive capacity of the material because the sorbent mass is usually down to 10 mg in LOV devices. Nanomaterials, capitalizing upon their enhanced surface-to-volume ratio and diversity of potential chemical moieties, are appealing alternatives to microbead sorbents. However, the handling and confinement of nanomaterials in fluidic chip structures have been challenging to date. This is most likely a consequence of the aggregation tendency of a number of nanomaterials, including carbon-based sorbents, that leads to excessive back-pressure in flowing systems along with irreproducible bead loading. This paper addresses these challenges by ad hoc synthesis of hybrid nanomaterials, such as porous carbon-coated titanium dioxide nanotubes (TiO2-NT@pC). Tailoring of the surface polarity of the carbon coating is proven to foster the dispersion of TiO2-NT@pC in LOV settings while affording superior extraction capability of moderately nonpolar species from aqueous matrices. The determination of trace-level concentrations of butylparaben (BPB) and triclosan (TCS) in seawater samples is herein selected as a proof-of-concept of the exploitation of disposable nanomaterials in LOV. The mesofluidic platform accommodating μSPE features online hyphenation to liquid chromatography/tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) for reliable determination of the target analytes with excellent limits of detection (0.5 and 0.6 ng/L for BPB and TCS, respectively) and intermediate precision (relative standard deviation <5.8%). For 5.0 mL of sample and 200 μL of eluent, enrichment factors of 23 and 14 with absolute extraction efficiencies of 90% ± 14% and 58 ± 8% for BPB and TCS, respectively, were obtained. The relative recovery values of 107% (BPB) and 97% (TCS) in seawater demonstrate the applicability of online LOV-LC/MS/MS using TiO2-NT@pC for handling troublesome environmental samples
Expresión de genes de lipasa de Candida albicans en pacientes con lesiones estomatológicas y sin lesión
El conocimiento del rol de la lipasa (LIP) de Candida en su virulencia es escaso. Se conocen 10 genes Lip con una expresión diferencial influenciada por la etapa de la infección y sitio de colonización.Objetivo: Estudiar la expresión de genes Lip de C.albicans en aislados de pacientes con lesiones estomatológicas.Métodos: de 61 pacientes con lesiones estomatológicas se seleccionaron 17 aislados C.albicans: 7 carcinomas bucales a células escamosas (CB), 5 líquenes atípicos (LIQ) y 5 candidiasis crónicas (CC); y 6 cepas de mucosa sana (SL). Se determinó la actividad lipolítica (LIP) mediante la técnica de Rodamina B. Se evaluó la transcripción de los genes Lip3, 4, 5, 6, 7, 8 y 9 de cada aislado por RT-PCR que se expresó como frecuencia relativa para cada gen (FE). La semicuantificación relativa de los niveles de expresión de los transcriptos se realizó previa normalización con el gen ARNm 18s (Gel-Pro Analyzer). Los datos fueron analizados mediante ANOVA (p < 0,05).Resultados: Los aislados de lesiones estomatológicas mostraron producción de LIP, a diferencia de los aislados SL, donde el hongo se presenta como comensal. Las mayores FE de transcriptos fueron observadas en los aislados de lesiones con el siguiente patrón de expresión: CC: Lip5, Lip6, Lip7 y Lip9; LIQ: Lip4, Lip5, Lip6 y Lip9 y CB: Lip3, Lip5, Lip6, Lip8 y Lip9. En los aislados de mucosa sana se observó aumento de FE de Lip6 y Lip7, ausencia de Lip3 y menor expresión de todos los genes estudiados. El análisis semicuantitativo mostró una expresión relativa aumentada para los transcriptos de Lip6 yLip7 en aislados SL (Lip5 vs.Lip6, p=0,0004; Lip7 vs. Lip5, p=0,0024) y mayor expresión de transcriptos Lip6 y Lip7, y Lip3 en CC. En LIQ, todos los niveles de expresión de los transcriptos fueron menores que en las otras lesiones. En CB, el transcripto Lip6 fue el que presentó el mayor valor de expresión (p <0,0084). El transcripto Lip6 y Lip9 fueron comunes a todos los aislados.Conclusión: Los perfiles de expresión genética observados en la transcripción de genes que codifican para LIP sugerirían una modulación diferencial asociada tanto el nicho de aislamiento, como se observa en el caso de Lip6 y Lip9, como a la patología bucal a la que se encuentra asociada al hongo.Fil: Castillo, Graciela del Valle. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra Química Biológica B; Argentina.Fil: Miró, María Soledad. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Fisicoquímica; Argentina.Fil: Sotomayor, Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicass. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Fil: Azcurra, Ana Isabel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Biología Celular B; Argentina.Otras Ciencias de la Salu