Characterization of low-molecular-mass synthetic markers of isoelectric points by capillary zone electrophoresis and capillary isoelectric focusing

Vysokoúčinné elektromigrační separační metody, kapilární zónová elektroforéza (CZE) a kapilární izoelektrická fokusace (CIEF), byly použity pro fyzikálně-chemickou charakterizaci nově syntetizovaných nízkomolekulárních markerů izoelektrických bodů. Amfoterní sloučeniny na bázi aminomethylnitrofenolů, jejich derivátů a jiných strukturně příbuzných látek byly analyzovány metodou CZE v sérii základních elektrolytů v širokém rozmezí pH 1,86 - 11,18. Ze změřené závislosti efektivních elektroforetických pohyblivostí analytů na pH (předem korigovaných na referenční teplotu 25řC) byly odečteny jejich izoelektrické body (pI) a nelineární regresní analýzou byly u vybraných látek určeny acidobazické disociační konstanty jejich ionogenních skupin (pKa). Analyty s ostře definovanými izoelektrickými body byly následně analyzovány metodou CIEF, kterou byla prokázána použitelnost těchto analytů jako markerů izoelektrických bodů pro kalibraci pH gradientu v CIEF při určování pI amfoterních látek, zejména peptidů a bílkovin. Stanovené hodnoty pKa ionogenních skupin vybraných sloučenin budou využity při vývoji nových markerů izoelektrických bodů s požadovanými hodnotami pI.High-performance electromigration separation methods, capillary zone electrophoresis (CZE) and capillary isoelectric focusing (CIEF), have been applied to physico-chemical characterization of new synthetic low-molecular mass markers of isoelectric points. Amphoteric compounds on the basis of aminomethylnitrophenols, their derivatives and other structurally related substances were analyzed by CZE in a series of background electrolytes in a wide pH range, 1.86 - 11.18. From the measured pH dependencies of effective electrophoretic mobilities of analytes (beforehand corrected to reference temperature of 25 řC), their isoelectric points (pI) were determined. In addition, using the non-linear regression analysis of the above dependencies, acid-base dissociation constants (pKa) of ionogenic groups of selected analytes were calculated. Subsequently, the analytes with sharply defined isoelectric points were analyzed by CIEF. CIEF confirmed applicability of these compounds as markers of isoelectric points for calibration of pH gradient in CIEF in the determination of pI of amphoteric compounds, especially peptides and proteins. The determined pKa values of ionogenic groups in particular compounds will be utilized in the development of new pI markers with desired pI values.Katedra analytické chemieDepartment of Analytical ChemistryPřírodovědecká fakultaFaculty of Scienc

Aligned nanofibres made of poly(3-hydroxybutyrate) grafted to hyaluronan for potential healthcare applications

In this work, a hybrid copolymer consisting of poly(3-hydroxybutyrate) grafted to hyaluronic acid (HA) was synthesised and characterised. Once formed, the P(3HB)-g-HA copolymer was soluble in water allowing a green electrospinning process. The diameters of nanofibres can be tailored by simply varying the Mw of polymer. The optimization of the process allowed to produce fibres of average diameter in the range of 100-150 nm and low polydispersity. The hydrophobic modification has not only increased the fibre diameter, but also the obtained layers were homogenous. At the nanoscale, the hybrid copolymer exhibited an unusual hairy topography. Moreover, the hardness and tensile properties of the hybrid were found to be superior compared to fibres made of unmodified HA. Particularly, this reinforcement was achieved at the longitudinal direction. Additionally, this work reports the use in the composition of a water-soluble copolymer containing photo cross-linkable moieties to produce insoluble materials post-electrospinning. The derivatives as well as their nanofibrous mats retain the biocompatibility of the natural polymers used for the fabrication

Financing NGOs from EU Funds.

Práce se zabývá problematikou financování neziskových organizací z fondů Evropské unie s užším zaměřením na komunitární programy. Ty byly zvoleny proto, že na rozdíl od strukturálních fondů není k dispozici dostatek literatury, který by se zabýval komunitárními programy v českém prostředí. Součástí této práce byl proto průzkum, jehož cílem bylo na několika případových studiích ukázat českou zkušenost s komunitárními programy. Cílem průzkumu bylo popsat zkušenosti českých NNO s čerpáním dotací z komunitárních programů a potvrdit nebo vyvrátit následující hypotézu: Pravidla čerpání dotací od Evropské komise jsou nastavena tak, že na ně dosáhnou pouze velké a bohaté NNO. Ze strany českých NNO navíc dochází k nepochopení účelu dotací, kterým není financování NNO jako takových, ale financování realizace cílů EU prostřednictvím NNO. Průzkum ukázal, že i malé neziskové organizace jsou schopné žádat o dotace v rámci evropských komunitárních programů a uspět. U oslovených organizací byla navíc úspěšnost poměrně vysoká a pro zhruba polovinu z nich představuje příslušný komunitární program (podle oboru jejich činnosti) hlavní zdroj financování. Lze proto konstatovat, že hypotéza byla vyvrácena.This master's thesis is concerned with NGO financing from EU funds, with a special emphasis on Community Programmes. Since there is a few information sources on Community Programmes in the Czech Republic compared to Structural Funds, the thesis provides a survey focused on the Czech experience with Community Programmes, using some case studies as examples. The research questions to be pursued are as follows: Are the rules for EU funds application process restrictive? Do the Czech NGOs understand the EU funds objectives well?Katedra studií občanské společnostiDepartment of Civil Society StudiesFakulta humanitních studiíFaculty of Humanitie

Synthesis of 1-[(1R)-1-(6-fluoro-1,3-benzothiazole-2-yl)ethanamine thioureas and determination their inhibition activities to enzymes

Bylo syntetizováno 14 nových thiomočovin na bázi (1R)-1-(6-fluor-2,3-benzthiazol-2-yl)ethanaminu.It was synthesised 14 new thioureas based on (1R)-1-(6-fluor-2,3-benzthiazol-2-yl)ethanamine.Katedra biologických a biochemických věd1. Prezentace výsledků diplomové práce 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k D

Characterization of low-molecular-mass synthetic markers of isoelectric points by capillary zone electrophoresis and capillary isoelectric focusing

High-performance electromigration separation methods, capillary zone electrophoresis (CZE) and capillary isoelectric focusing (CIEF), have been applied to physico-chemical characterization of new synthetic low-molecular mass markers of isoelectric points. Amphoteric compounds on the basis of aminomethylnitrophenols, their derivatives and other structurally related substances were analyzed by CZE in a series of background electrolytes in a wide pH range, 1.86 - 11.18. From the measured pH dependencies of effective electrophoretic mobilities of analytes (beforehand corrected to reference temperature of 25 řC), their isoelectric points (pI) were determined. In addition, using the non-linear regression analysis of the above dependencies, acid-base dissociation constants (pKa) of ionogenic groups of selected analytes were calculated. Subsequently, the analytes with sharply defined isoelectric points were analyzed by CIEF. CIEF confirmed applicability of these compounds as markers of isoelectric points for calibration of pH gradient in CIEF in the determination of pI of amphoteric compounds, especially peptides and proteins. The determined pKa values of ionogenic groups in particular compounds will be utilized in the development of new pI markers with desired pI values

Orgány obchodních společností a družstva

Práce je uceleným přehledem o družstvu a všech obchodních společnostech, zvláště však o jejich orgánech. Je zde vyčerpáno maximum informací, které jsou k této problematice v obchodním zákoníku, knihách a časopisech dostupné.Dokončená práce s úspěšnou obhajobo

Financing NGOs from EU Funds.

This master's thesis is concerned with NGO financing from EU funds, with a special emphasis on Community Programmes. Since there is a few information sources on Community Programmes in the Czech Republic compared to Structural Funds, the thesis provides a survey focused on the Czech experience with Community Programmes, using some case studies as examples. The research questions to be pursued are as follows: Are the rules for EU funds application process restrictive? Do the Czech NGOs understand the EU funds objectives well

Application of vibrational spectroscopy in medicals analysis

Department of Inorganic ChemistryKatedra anorganické chemieFaculty of SciencePřírodovědecká fakult

Vhled do problematiky mazání a adhezních vlastností hyaluronanu pro oční léčiva

Hyaluronan (HA) is widely used for eye drops as lubricant to counteract dry eye disease. High and low molecular weight HA are currently used in ophthalmology. However, a large portion of the current literature on friction and lubrication addresses articular (joint) cartilage. Therefore, eye drops compositions based on HA and its derivatized forms are extensively characterized providing data on the tribological and mucoadhesive properties. The physiochemical properties are investigated in buffers used commonly in eye drops formulations. The tribological investigation reveals that amphiphilic HA-C12 decreases the friction coefficient. At the same time, the combination of trehalose/HA or HAC12 enhances up to eighty-fold the mucoadhesiveness. Thus, it is predicted a prolonged residence time on the surface of the eye. The incorporation of trehalose enhances the protection of human keratinocytes (HaCaT) cells, as demonstrated in an in-vitro cell-desiccation model. The presence of trehalose increases the friction coefficient. Medium molecular weight HA shows significantly lower friction coefficient than high molecular weight HA. This research represents a first, wide array of features of diverse HA forms for eye drops contributing to increase the knowledge of these preparations. The results here presented also provide valuable information for the design of highly performing HA-formulations addressing specific needs before preclinic.Hyaluronan (HA) je široce používaná surovina do očních kapek pro léčbu syndromu suchého oka. Vysokomolekulární a nízkomolekulární HA se v současnosti používá v oftalmologii. Složení očních kapek na bázi HA a jejích derivátů široce charakterizováno a poskytuje údaje o tribologických a mukoadhezivních vlastnostech. Tribologický výzkum ukazuje, že amfifilní HA-C12 snižuje součinitel tření. Kombinace trehalóza/HA nebo HA-C12 zároveň zvyšuje až osmdesátinásobně mukoadhezivitu. Předpokládá se tedy prodloužená doba setrvání účinné látky na povrchu oka. Začlenění trehalózy zvyšuje ochranu buněk lidských keratinocytů (HaCaT), jak bylo prokázáno v modelu vysoušení buněk in vitro. Přítomnost trehalózy zvyšuje součinitel tření. HA se střední molekulovou hmotností vykazuje výrazně nižší součinitel tření než HA s vysokou molekulovou hmotností. Tento výzkum představuje první rozsáhlou škálu vlastností různých forem HA pro oční kapky, které přispívají ke zvýšení znalostí o těchto léčivech. Zde prezentované výsledky také poskytují cenné informace pro návrh vysoce účinných HA-přípravků, které řeší specifické potřeby před preklinickým vyšetřením