Tuberculosis: nuevas herramientas para resolver un viejo problema

La tuberculosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa crónica que afecta a los animales de producción, salvajes, silvestres, de compañía e incluso al hombre. Su agente etiológico es Mycobacterium bovis (M. bovis), un bacilo ácido-alcohol resistente de crecimiento lento, que integra el complejo Mycobacterium tuberculosis.Trabajo publicado en Cagliada, Maria del Pilar Lilia y Galosi, Cecilia Mónica (comps.). I Congreso de Microbiología Veterinaria. Libro de resúmenes. La Plata: Facultad de Ciencias Veterinarias, 2021.Facultad de Ciencias Veterinaria

Mycobacterium bovis in Swine: Spoligotyping of Isolates from Argentina

A total of 143 Mycobacterium bovis isolates of pigs, from the most productive swine area in Argentina, were typed by spoligotyping. Twenty-two different spoligotypes were identified, and 133 (93%) isolates were grouped into 12 clusters. One of them, designed SB0140, was the most frequent because it held 83 (58%) isolates. This spoligotype also grouped 362 (43%) out of 841 isolates from previously typed cattle and, thus, constitutes the most frequent in our country. In addition, 135 (94%) isolates revealed spoligotypes identical to those of cattle, showing an epidemiological link. On the other hand, there were seven novel spoligotypes, six of which were also unique since they had only one isolate each. This study aimed to identify the spoligotypes of M. bovis isolated from pigs to contribute to a better understanding of the distribution of bovine tuberculosis in the main productive area of Argentina

Primera evaluación en Argentina de GenoType® MTBDRplus para la detección de Mycobacterium tuberculosis multidrogo-resistente desde aislamientos y especímenes clínicos

Tuberculosis (tB) and multidrug and extensively drug-resistant (dR) tB are important public health problems that are spreading worldwide. The aims of this study were to determine the sensitivity and specificity of the genotype® mtBdRplus assay from smear-positive clinical specimens and isolates and to explore its possible application in routine work. Clinical samples were previously decontaminated using naoH-n-acetyl-l-cystein or naoH-Clna hypertonic solution for Ziehl-neelsen staining and cultures. The leftover sediments of smear-positive samples were stored at -20 °C, 70 of which were selected to be included in this study according to their dR profile. thirty dR Mycobacterium tuberculosis isolates were also assessed. Sequencing was used as gold standard to detect mutations conferring isoniazid (InH) and rifampicin (RIF) resistance. Valid results were obtained in 94.0 % of the samples and 85.5 % (53/62) of the InH-R samples were properly identified. mutations in the katGS315t gene and inhA C-15t gene promoter region were present in 59.7 % (37/62) and 25.8 % (16/62) of the InH-R samples, respectively. the system could also identify 97.7 % (41/42) of the RIF-R samples; the mutations found were rpoBS531l (66.7 %, 28/42), d516V (19.0 %, 8/42), H526Y and S531p/W (4.8 %, 2/42 each one), and S522l/Q (2.4 %, 1/42). a 98.8 % concordance between the genotype assay and sequencing was obtained. genotype® mtBdRplus has demonstrated to be easy to implement and to perform in clinical laboratories and useful for a rapid detection of dR M. tuberculosis from decontaminated sputa and clinical isolates. Therefore, this assay could be applied as a rapid tool to predict InH-R and/or RIF-R in dR risk cases.La tuberculosis (TBC), y la TBC multi y extensivamente drogo-resistentes (DR) son importantes problemas de salud pública mundial. El objetivo de este estudio fue determinar la sensibilidad y especificidad del sistema GenoType® MTBDRplus a partir de esputos (baciloscopía positiva) y aislamientos clínicos de Mycobacterium tuberculosis, explorando su aplicación clínica. Previo a la tinción de Ziehl-Neelsen y al cultivo, las muestras fueron descontaminadas mediante NaOH-N-acetyl-L-cisteina o la solución hipertónica NaOH-NaCl. Los sedimentos remanentes se conservaron a –20 ºC, y 70 de ellos fueron incluidos en este estudio según su perfil de DR. Treinta cepas de M. tuberculosis DR fueron también evaluadas. La secuenciación fue utilizada como método de referencia para la detección de mutaciones que confieren resistencia a isoniacida (INH) y rifampicina (RIF). Se obtuvieron resultados válidos en el 94,0 % de las muestras, identificándose al 85,5 % (53/62) de las INH-R. La mutación katG S315T estuvo presente en 59,7 % (37/62), y la mutación C-15T del promotor del gen inhA en 25,8 % (16/62) de las mismas. El sistema identificó el 97,7 % (41/42) de las muestras RIF-R. Las mutaciones encontradas fueron rpoB S531L (66,7 %, 28/42), D516V (19,0 %, 8/42), H526Y y S531P/W (4,8 %, 2/42 cada una de ellas) y S522L/Q (2,4 %, 1/42). La concordancia entre el GenoType y la secuenciación fue del 98,8 %. El sistema GenoType® MTBDRplus resultó ser útil, fácil de realizar e implementar para la detección rápida de M. tuberculosis DR. Por lo tanto, este ensayo podría ser aplicado como una herramienta rápida para el diagnostico de TBC DR, principalmente en aquellos casos asociados a factores de riesgo.Fil: Imperiale, Belén Rocío. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Zumárraga, Martín José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Weltman, Gabriela. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; ArgentinaFil: Zudiker, Roxana. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; ArgentinaFil: Cataldi, Ángel Adrián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Morcillo, Nora Susana. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; Argentin

Surveillance and Characterization of Drug‑Resistant Mycobacterium tuberculosis Isolated in a Reference Hospital from Argentina during 8 Years’ Period

Background: Argentina is considered a country with a middle tuberculosis (TB) incidence. However, according to the last national epidemiological report released in 2018, since 2013, the trends are steadily increasing. The aims of this study were to determine the drug‑resistance (DR), multi‑DR and extensively DR (MDR/XDR‑TB), and rifampicin resistance (RIF‑R) burden as a part of the local TB diagnosis (June 2010–August 2018); to detect the mutations associated to isoniazid (INH) and RIF‑R and their geographical distribution; and to analyze the lineage relationship among the genetic patterns of the isolates circulating in the community. Methods: Respiratory and extrapulmonary specimens were processed by Ziehl–Neelsen stain and cultured on specific media. Drug‑susceptibility testing of isolates was performed by the MGIT 960 and a colorimetric micro‑method. Mutations conferring DR were detected by Genotype and DNA sequencing. Results: The study showed a DR‑TB prevalence of approximately 20% of the isolated strains, while M/XDR‑TB‑and particularly RIF‑R‑affected more than 5.0% of the total amount of cases. DR geographical distribution revealed isolates carrying mutations in the inhA gene promoter region only constrained to three districts where it was also registered two same family relatives’ cases with the infrequent rpoB S522 L/Q mutation. The fact that most DR/MDR‑TB isolates were not grouped in genetic clusters suggested that these cases may mostly have occurred due to endogenous reactivation rather than recently transmission. Conclusion: According to the obtained results, it would be convenient, in highly MDR‑TB suspected individuals, to confirm phenotypically, the INH and RIF susceptibility detected by molecular tests.Fil: Imperiale, Belén Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Di Giulio, Ángela Beatríz. Provincia de Buenos Aires. Hospital "Petrona V. de Cordero"; ArgentinaFil: Mancino, María Belén. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital "Dr. Antonio A. Cetrángolo"; ArgentinaFil: Zumárraga, Martín José. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Agrobiotecnologia y Biologia Molecular; ArgentinaFil: Morcillo, Nora Susana. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital "Dr. Antonio A. Cetrángolo"; Argentin

Primera evaluación en Argentina de GenoType® MTBDRplus para la detección de Mycobacterium tuberculosis multidrogo-resistente desde aislamientos y especímenes clínicos

Tuberculosis (tB) and multidrug and extensively drug-resistant (dR) tB are important public health problems that are spreading worldwide. The aims of this study were to determine the sensitivity and specificity of the genotype® mtBdRplus assay from smear-positive clinical specimens and isolates and to explore its possible application in routine work. Clinical samples were previously decontaminated using naoH-n-acetyl-l-cystein or naoH-Clna hypertonic solution for Ziehl-neelsen staining and cultures. The leftover sediments of smear-positive samples were stored at -20 °C, 70 of which were selected to be included in this study according to their dR profile. thirty dR Mycobacterium tuberculosis isolates were also assessed. Sequencing was used as gold standard to detect mutations conferring isoniazid (InH) and rifampicin (RIF) resistance. Valid results were obtained in 94.0 % of the samples and 85.5 % (53/62) of the InH-R samples were properly identified. mutations in the katGS315t gene and inhA C-15t gene promoter region were present in 59.7 % (37/62) and 25.8 % (16/62) of the InH-R samples, respectively. the system could also identify 97.7 % (41/42) of the RIF-R samples; the mutations found were rpoBS531l (66.7 %, 28/42), d516V (19.0 %, 8/42), H526Y and S531p/W (4.8 %, 2/42 each one), and S522l/Q (2.4 %, 1/42). a 98.8 % concordance between the genotype assay and sequencing was obtained. genotype® mtBdRplus has demonstrated to be easy to implement and to perform in clinical laboratories and useful for a rapid detection of dR M. tuberculosis from decontaminated sputa and clinical isolates. Therefore, this assay could be applied as a rapid tool to predict InH-R and/or RIF-R in dR risk cases.La tuberculosis (TBC), y la TBC multi y extensivamente drogo-resistentes (DR) son importantes problemas de salud pública mundial. El objetivo de este estudio fue determinar la sensibilidad y especificidad del sistema GenoType® MTBDRplus a partir de esputos (baciloscopía positiva) y aislamientos clínicos de Mycobacterium tuberculosis, explorando su aplicación clínica. Previo a la tinción de Ziehl-Neelsen y al cultivo, las muestras fueron descontaminadas mediante NaOH-N-acetyl-L-cisteina o la solución hipertónica NaOH-NaCl. Los sedimentos remanentes se conservaron a –20 ºC, y 70 de ellos fueron incluidos en este estudio según su perfil de DR. Treinta cepas de M. tuberculosis DR fueron también evaluadas. La secuenciación fue utilizada como método de referencia para la detección de mutaciones que confieren resistencia a isoniacida (INH) y rifampicina (RIF). Se obtuvieron resultados válidos en el 94,0 % de las muestras, identificándose al 85,5 % (53/62) de las INH-R. La mutación katG S315T estuvo presente en 59,7 % (37/62), y la mutación C-15T del promotor del gen inhA en 25,8 % (16/62) de las mismas. El sistema identificó el 97,7 % (41/42) de las muestras RIF-R. Las mutaciones encontradas fueron rpoB S531L (66,7 %, 28/42), D516V (19,0 %, 8/42), H526Y y S531P/W (4,8 %, 2/42 cada una de ellas) y S522L/Q (2,4 %, 1/42). La concordancia entre el GenoType y la secuenciación fue del 98,8 %. El sistema GenoType® MTBDRplus resultó ser útil, fácil de realizar e implementar para la detección rápida de M. tuberculosis DR. Por lo tanto, este ensayo podría ser aplicado como una herramienta rápida para el diagnostico de TBC DR, principalmente en aquellos casos asociados a factores de riesgo.Fil: Imperiale, Belén Rocío. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Zumárraga, Martín José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Weltman, Gabriela. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; ArgentinaFil: Zudiker, Roxana. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; ArgentinaFil: Cataldi, Ángel Adrián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Morcillo, Nora Susana. Provincia de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Hospital ; Argentin

Tuberculosis in wild South American sea lions Otaria flavescens stranded in Chubut, Argentina

Pinniped tuberculosis, commonly caused by Mycobacterium pinnipedii, is a zoonotic disease reported in free-living and captive otariid species of the southern hemisphere. Currently, data concerning pinniped tuberculosis in South America are scarce, reinforcing the need for further studies of the disease in free-ranging pinnipeds. In this study, we investigated the presence of tuberculosis in South American sea lions Otaria flavescens (SASLs) stranded along the Chubut coastline (Argentina). Necropsies were performed in 9 SASLs, and tissue samples were collected for histopathology, bacteriology, and molecular diagnosis. Four SASLs showed enlarged tracheobronchial lymph nodes (TBLNs) with multifocal to coalescing granulomas. In these animals, a direct IS6110-PCR amplification confirmed the presence of a Mycobacterium tuberculosis complex member in TBLNs (n = 4) and lungs (n = 2), but the agent could not be further identified. In one SASL, Mycobacterium murale was isolated from lungs without lesions. This study confirms the presence of tuberculosis in SASLs from Chubut, where tourist activities promote close interaction with the animals, generating a potential risk to human health. Further research is currently focusing on addressing the prevalence of tuberculosis in wild SASLs, to assess the risk for public health and develop management strategies to avoid human infection.Fil: Fiorito, Carla Daniela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Centro Nacional Patagónico. Centro para el Estudio de Sistemas Marinos; ArgentinaFil: Marfil, Maria Jimena. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Falzoni, Elvira María. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Martínez Vivot, Marcela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Zumárraga, Martín José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Lombardo, Daniel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Investigación y Tecnología en Reproducción Animal; ArgentinaFil: Barandiaran, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentin

First identification of Mycobacterium avium paratuberculosis sheep strain in Argentina

We here identified for the first time the presence of Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) sheep (S) strain in Argentina. IS900 polymerase chain reaction (PCR) was positive. The S strain was compared with MAP cattle (C) strains by using IS1311 PCR-restriction endonuclease analysis (PCR-REA), multiplex PCR and restriction fragment length polymorphism (RFLP) analysis.Fil: Traveria, Gabriel. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clinica. Centro de Diagnostico E Investigaciones Veterinarias; ArgentinaFil: Zumárraga, Martín José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Etchechoury, Ignacio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Romano, Maria Isabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cataldi, Angel Adrian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. Centro de Investigación de Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alvarado Pinedo, M. F.. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clinica. Centro de Diagnostico E Investigaciones Veterinarias; ArgentinaFil: Pavlik, I.. Veterinary Research Institute; República ChecaFil: Pribylova, R.. Veterinary Research Institute; República ChecaFil: Romero, J. R.. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clinica. Centro de Diagnostico E Investigaciones Veterinarias; Argentin

Evaluación de la capacidad de formar biofilm de micobacterias ambientales aisladas de agua de natatorios públicos y de agua de lluvia de la ciudad de General Pico

La persistencia de micobacterias ambientales (MA) en los hábitats modificados por el hombre, entre los cuales se encuentran los natatorios de uso recreacional y/o terapeúticos se debe a su oligotrofia, diversidad nutricional, resistencia a los desinfectantes y fundamentalmente a la formación de biofilm. Estos factores actuarían como agentes selectivos, favoreciendo la proliferación y dominio final de las MA en estos hábitats respecto a otros microorganismos presentes en el agua. Este incremento de micobacterias constituye una potencial fuente de infección principalmente para los individuos inmunocomprometidos. Es sabido que las bacterias se hallan en la naturaleza en dos formas o estados: creciendo en biofilms (99%) y en forma planctónica o de libre flotación (1%). Es clara la ventaja que significa para las micobacterias, ya sean patógenas o ambientales, la capacidad para colonizar superficies (animadas o inanimadas) mediante la formación de biofilm, debido a que éste les brinda mayor disponibilidad de nutrientes y protección contra factores ambientales naturales y artificiales. Teniendo en cuenta este concepto se formuló la 2º hipótesis del proyecto que tiene como objetivo: Evaluar la capacidad de formar biofilm in vitro de las cepas de MA aisladas de distintas fuentes de agua. Para valorar la capacidad de formar biofilm se sembraron inóculos estandarizados de las MA en policubetas estériles de PVC de 96 pocillos (BectonDickinson). Se incubaron a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego se adicionó el medio de cultivo Middlebrook 7H9 (MB) con glicerol. Las policubetas se taparon y se incubaron a 30 °C por 20 días. Para medir la formación del biofilm, los pocillos se lavaron con agua estéril, se tiñeron con cristal violeta al 1% y se incubaron 30 minutos a temperatura ambiente. Posteriormente se lavaron con agua y se secaron sobre papel secante. El colorante incorporado al biofilm se resuspendió en etanol:acetona (70:30). La cuantificación se realizó midiendo densidad óptica en un lector de microplacas (Kayto RT-2100C) a 630 nm. Se destinaron pocillos con el medio de cultivo MB con glicerol sin suspensión bacteriana como control negativo. Se utilizó a Mycobacterium smegmatis (cepa patrón) como control positivo. Los resultados mostraron que tanto los aislamientos de MA en agua de natatorios (9 cepas ensayadas de 16 aislamientos totales) como los correspondientes al agua de lluvia (4 cepas ensayadas de 7 aislamientos) mostraron capacidad para desarrollar biofilm in vitro. Las MA de agua de natatorio: Mycobacterium gordonae, Mycobacterium houstonense, Mycobacterium fortuitum y Mycobacterium mucogenicum (pertenecientes a los clados M. gordonae, M. fortuitum y M. mucogenicum, respectivamente) formaron biofilm mostrando consistencia débil a moderada (rango de absorbancias: 0,035 - 0,556). El biofilm formado por las MA ensayadas del agua de lluvia: Mycobacterium frederikbergense y Mycobacterium holsaticum (pertenecientes a los clados M. neoaurum y M. komossense) y dos cepas no tipificadas, varió desde consistencia débil a moderada-fuerte (rango de absorbancias: 0,160 - 0,738). Los resultados obtenidos hasta la fecha guían a concluir que la persistencia de las MA en los natatorios desinfectados con altas concentraciones de cloro podría asociarse a la capacidad de las mismas para formar biofil

Detection of Mycobacterium bovis-Infected Dairy Herds Using PCR in Bultk Tank Milk Samples

Bovine tuberculosis (bTB) is a chronic and zoonotic disease due to Mycobacterium bovis. The tuberculosis eradication campaign carried out in Argentina has considerably improved the health situation of the herds. Here we evaluated a strategy to detect M. bovis-infected herds by Touch-Down IS6110 polymerase chain reaction (PCR) in bulk tank raw milk from dairy farms. We evaluated 177 samples from herds with the official tuberculosis free certificate (TFC) and 80 from herds without the certificate, non-tuberculosis-free certificate (NTFC), from 10 departments of Santa Fe province, Argentina. To avoid the effect of Taq polymerase inhibitors, a dilution of DNA template was performed. Positive PCR results were obtained in 102 (40%) of the samples, whereas negative ones were obtained in 155 (60%) of the samples. Importantly, 44% of NTFC and 38% of TFC samples were positive. All samples were subjected to culture in Löwenstein Jensen and Stonebrink media with no positive isolation. The negative predictive value (NPV) of PCR in the TFC group was 95%, while the positive predictive value (PPV) of PCR in the NTFC group was 51%. Based on these results, this work proposes a method that should be applied regularly to detect M. bovis--infected dairy herds, complementary to the official test of tuberculin, or purifed protein derivative (PPD), to control dairy herds, especially those free of tuberculosis.Fil: Zumárraga, Martín José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soutullo, Adriana Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Garcia, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Marini, Rocío. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Abdala, Alejandro Ariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Tarabla, Héctor. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Echaide, Susana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: López, Marcela. Dirección Nacional de Instituto de Investigación.Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud "Dr. Carlos G. Malbrán"; ArgentinaFil: Zerbini, Elsa Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación.Administración Nacional de Laboratorios e Institutos de Salud "Dr. Carlos G. Malbrán"; ArgentinaFil: Canal, Ana. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Cataldi, Ángel Adrián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Molecular typing of Argentinian <i>Mycobacterium avium</i> subsp. <i>paratuberculosis</i> isolates by multiple-locus variable number-tandem repeat analysis

Multiple-locus variable number-tandem repeat analysis (MLVA) of Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (MAP) isolates may contribute to the knowledge of strain diversity in Argentina. Although the diversity of MAP has been previously investigated in Argentina using IS900-RFLP, a small number of isolates were employed, and a low discriminative power was reached. The aim of the present study was to test the genetic diversity among MAP isolates using an MLVA approach based on 8 repetitive loci. We studied 97 isolates from cattle, goat and sheep and could describe 7 different patterns: INMV1, INMV2, INMV11, INMV13, INMV16, INMV33 and one incomplete pattern. INMV1 and INMV2 were the most frequent patterns, grouping 76.3% of the isolates. We were also able to demonstrate the coexistence of genotypes in herds and co-infection at the organism level. This study shows that all the patterns described are common to those described in Europe, suggesting an epidemiological link between the continents.Facultad de Ciencias Veterinaria