Toxoplasmosis serology: an efficient hemagglutination procedure to detect IgG and IgM antibodies

In search of an efficient but simple, low cost procedure for the serodiagnosis of Toxoplasmosis, especially suited for routine laboratories facing technical and budget limitations as in less developed countries, the diagnostic capability of Hematoxo® , an hemagglutination test for toxoplasmosis, was evaluated in relation to a battery of tests including IgG- and IgM-immunofluorescence tests, hemagglutination and an IgM-capture enzymatic assay. Detecting a little as 5 I.U. of IgG antitoxoplasma antibodies, Hematoxo® showed a straight agreement as to reactivity and non-reactivity for the 443 non-reactive and the 387 reactive serum samples, included in this study. In 23 cases presenting a serological pattern of acute toxoplasmosis and showing IgM antibodies, Hematoxo® could detect IgM antibodies in 18, indicated by negativation or a significant decrease in titers as a result of treating samples with 2-mercapto-ethanol. However, a neat increase in sensitivity for IgM specific antibodies could be achieved by previously removing IgG from the sample, as demonstrated in a series of acute toxoplasmosis sera. A simple procedure was developed for this purpose, by reconstituting a lyophilized suspension of Protein A - rich Staphylococcus with the lowest serum dilution to be tested. Of low cost and easy to perform, Hematoxo® affords not only a practical qualitative procedure for screening reactors and non-reactors, as in prenatal services, but also quantitative assays that permit to titrate antibodies as well as to identify IgM antibodies.Avaliou-se o teste de hemaglutinação Hematoxo® , associado ou não à prévia remoção de IgG do soro pela Proteína A, como procedimento de rotina para o diagnóstico sorológico da toxoplasmose. A capacidade diagnóstica do teste foi investigada em soros já classificados por uma bateria de testes, de imunofluorescência, hemaglutinação e imunoenzimático de captura de IgM, segundo os diferentes perfis sorológicos observados na toxoplasmose. Revelando desde 5 U.I. de anticorpos IgG por mililitro de soro, Hematoxo® evidenciou estreita concordância quanto à reatividade e não reatividade em 443 soros não reagentes e 387 soros reagentes. De 23 casos de toxoplasmose aguda com perfil I, o teste de hemaglutinação detectou anticorpos IgM em 18, pela negativação ou queda significativa de títulos após tratamento das amostras com 2-mercapto-etanol. Porém, obteve-se nítido aumento da sensibilidade do teste Hematoxo® para anticorpos IgM removendo-se IgG das amostras. Para esse fim reconstituiu-se uma suspensão liofilizada de estafilococos produtores de Proteína A com a diluição do soro, que depois de centrifugada era utilizada no teste. Desse modo, Hematoxo® , como teste qualitativo, mostrou-se adequado para a identificação de reatores e não reatores, por exemplo, na triagem de gestantes de risco. Como teste quantitativo, permitiu o diagnóstico das várias fases sorológicas da toxoplasmose, pela titulação de anticorpos IgG e pela evidenciação de anticorpos IgM. De realização simples e baixo custo, Hematoxo® mostra-se um teste adequado para a rotina diagnóstica

Toxoplasmosis serology: an efficient hemagglutination procedure to detect IgG and IgM antibodies

In search of an efficient but simple, low cost procedure for the serodiagnosis of Toxoplasmosis, especially suited for routine laboratories facing technical and budget limitations as in less developed countries, the diagnostic capability of Hematoxo® , an hemagglutination test for toxoplasmosis, was evaluated in relation to a battery of tests including IgG- and IgM-immunofluorescence tests, hemagglutination and an IgM-capture enzymatic assay. Detecting a little as 5 I.U. of IgG antitoxoplasma antibodies, Hematoxo® showed a straight agreement as to reactivity and non-reactivity for the 443 non-reactive and the 387 reactive serum samples, included in this study. In 23 cases presenting a serological pattern of acute toxoplasmosis and showing IgM antibodies, Hematoxo® could detect IgM antibodies in 18, indicated by negativation or a significant decrease in titers as a result of treating samples with 2-mercapto-ethanol. However, a neat increase in sensitivity for IgM specific antibodies could be achieved by previously removing IgG from the sample, as demonstrated in a series of acute toxoplasmosis sera. A simple procedure was developed for this purpose, by reconstituting a lyophilized suspension of Protein A - rich Staphylococcus with the lowest serum dilution to be tested. Of low cost and easy to perform, Hematoxo® affords not only a practical qualitative procedure for screening reactors and non-reactors, as in prenatal services, but also quantitative assays that permit to titrate antibodies as well as to identify IgM antibodies

Avidez de anticorpos IgG específicos como marcadores de infecção primária recente pelo Toxoplasma gondii Avidity of specific IgG antibody as a marker of recent and old toxoplasma infections

A caracterização de infecção primária recente pelo Toxoplasma gondii se apoia principalmente na presença, no soro, de anticorpos específicos IgM. Para fins diagnósticos de toxoplasmose aguda, ou de contágio recente, a possibilidade de outros marcadores é altamente desejável. Um marcador de infecção recente atualmente referido é a baixa afinidade ou avidez de anticorpos específicos IgG. Para avaliação do novo marcador, titularam-se os soros contra poliantígenos do T. gondii pelo teste imunoenzimático (ELISA), antes e após tratamento dos complexos antígeno-anticorpo formados, com solução de ureia 6 M como agente dissociante. O deslocamento de anticorpos de baixa avidez foi indicado por uma queda de títulos, calculada em porcentagem em relação aos títulos iniciais. Foram estudados 69 soros, 23 de cada um dos 3 perfis sorológicos sucessivos, observados na infecção, e que a caracterizam respectivamente como recente, em fase de transição e crônica. Os perfis foram determinados segundo os resultados de uma bateria de testes, incluindo os de imunofluorescência IgG e IgM, de captura de anticorpos IgM e de hemaglutinação. Para os soros de infecção crônica a queda observada foi de 3% &plusmn; 3%, de 34% &plusmn; 12% para toxoplasmose recente e de 12% &plusmn; 9% para a fase de transição. Conclue-se que a determinação da avidez de anticorpos IgG pode ser utilizada como marcador de infecção primária recente pelo T. gondii.<br>For serologically characterizing a recent primary toxoplasma infection, the low avidity of IgG specific antibodies was studied. Avidity was evaluated as the decrease of IgG antibody titers in ELISA after treating plates with 6 M urea, as a dissociating solution of low avidity antigen-antibody complexes. Sixty nine serum samples were studied, presenting characteristic patterns of recent, transitional or chronic toxoplasmosis. Serological patterns were determined according to results of IgG and IgM immunofluorescence, IgM-capture, and hemagglutination tests. Twenty three serum samples from each of the referred patterns I,II and III were titrated. For chronic toxoplasmosis infections, which presented a serological pattern III, observed decrease of titers was 3% &plusmn; 3%. For pattern I recent toxoplasmosis sera it was 34% &plusmn; 12%, and for transition pattern II, 12% &plusmn;9%. Thus, a low avidity of IgG specific antibodies can be applicable for the diagnosis of a recent toxoplasmosis infection

Thermodynamics and Kinetics of Mixed Protein/Surfactant Adsorption Layers at Liquid Interfaces

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