Detection of Shiga Toxin-Producing Escherichia coli (STEC) in the Endocervix of Asymptomatic Pregnant Women. Can STEC Be a Risk Factor for Adverse Pregnancy Outcomes?

The presence of Escherichia coli in the vaginal microbiome has been associated with pregnancy complications. In previous works, we demonstrated that Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) can produce abortion and premature delivery in rats and that Shiga toxin type 2 (Stx2) can impair human trophoblast cell lines. The hypothesis of this work was that STEC may colonize the lower female reproductive tract and be responsible for adverse pregnancy outcomes. Thus, the aim of this work was to evaluate the presence and prevalence of virulence factor genes from STEC in the endocervix of asymptomatic pregnant women. For that purpose, endocervical swabs were collected from pregnant women during their prenatal examination. Swab samples were enriched in a differential medium to select Enterobacteria. Then, positive samples were analyzed by PCR to detect genes characteristic of Escherichia sp. (such as uidA and yaiO), genes specific for portions of the rfb (O-antigen-encoding) regions of STEC O157 (rfbO157), and STEC virulence factor genes (such as stx1, stx2, eae, lpfAO113, hcpA, iha, sab, subAB). The cytotoxic effects of stx2-positive supernatants from E. coli recovered from the endocervix were evaluated in Vero cells. Our results showed that 11.7% of the endocervical samples were positive for E. coli. Additionally, we found samples positive for stx2 and other virulence factors for STEC. The bacterial supernatant from an isolate identified as E. coli O113:NT, carrying the stx2 gene, exhibited cytotoxic activity in Vero, Swan 71 and Hela cells. Our results open a new perspective regarding the presence of STEC during pregnancy.Fil: Scalise, Maria Lujan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Garimano, Nicolás Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Sanz, Marcelo Eduardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Padola, Nora Lía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Leonino, Patricia. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Pereyra, Adriana. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Casale, Roberto. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Amaral, María Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; Argentina. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Sacerdoti, Flavia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Ibarra, Cristina Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; Argentin

Detection of Shiga toxin producing Escherichia coli in endocervix of asymptomatic pregnant women: Novel pathogen responsible for adverse pregnancy outcomes?

Brief Introduction: Some studies have demonstrated that vaginal E. coli colonization may produce complicationsduring pregnancy. We have previously reported that Shiga toxin-2 (Stx2) secreted by enterohemorrhagic E. coli canproduce abortion and premature delivery in animals and can impair human trophoblast in vitro.Objective: The aim of this study was to detect virulence factor genes from Shiga toxin producing E. coli (STEC)in the endocervix of asymptomatic pregnant women. Methods: Endocervical swabs were collected from 103 pregnantwomen (12 to 30 weeks of pregnancy) during their antenatal examination. Swab samples were enriched in TrypticSoy Broth overnight at 37 °C and then streaked into selective and differential medium, Sorbitol MacConkey agar. E.coli detection was confirmed by identification of uidA gene by PCR assay. Then, positive samples for E. coli wereanalyzed for STEC virulence factors genes: stx1, stx2, eae, rfbO157, lpfAO113 and hcpA. After that, positive E. colisamples for stx2 gene were grown in Luria-Bertani Broth medium in order to evaluate Stx2 cytotoxic activity. Forthat, the bacterial supernatants were filter-sterilized and cytotoxicity was evaluated on Vero, Swan 71 and HeLa cells.Results: Our results showed that 14.5% of the endocervical samples were positive for E. coli (positive for uidAgene). Furthermore, 9/15 (60%) of the E. coli-positive samples carried the stx2 gene and 6/15 (40%) carried thelpfAO113 and hcpA genes. One bacterial supernatant from an E. coli-positive endocervical sample carrying stx2 andlpfAO113 genes exhibited high cytotoxic activity on the cells evaluated due to Stx2 production confirmed by specificneutralization of Stx2 with an anti-Stx2 antibody.Conclusions: The novelty of this report is the presence of STEC in the endocervix of asymptomatic pregnantwomen. This opens a new perspective with respect to the possible role of this pathogen in woman reproductivehealth care.Fil: Scalise, Maria Lujan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Garimano, Nicolás Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Porporato, Melina Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Leonino, Patricia. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Pereyra, Adriana. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Ferreiros, José A.. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Casale, Roberto. Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas.; ArgentinaFil: Amaral, María Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Ibarra, Cristina Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaFil: Sacerdoti, Flavia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Fisiología y Biofísica Bernardo Houssay; ArgentinaInternational Symposium on Reproductive HealthVirtual MeetingSingapurThe Physicologycal SocietyBiochemical Societ