Regeneração de plantas híbridas entre Lycopersicon esculentum e L. peruvianum a partir de calos com dois anos de cultura in vitro Regeneration of Lycopersicon esculentum X L. peruvianum hybrid plants from two year old callus culture

Calos obtidos da cultura in vitro de embrião imaturo do cruzamento interespecífico L. esculentum x L. peruvianum, praticamente perderam a capacidade morfogenética, após dois anos de subcultura. Na tentativa de recuperação do processo de organogênese desses calos, realizaram-se dois experimentos, utilizando-se os fitorreguladores ácido indolacético (IAA) e 6-benziladenina (6-BA), cujas concentrações foram combinadas em dialélicos de 5 x 5 e 3 x 3. A composição de sais minerais e vitaminas baseou-se no meio de Murashige e Skoog, adicionando-se sacarose a 3% e ágar a 0,8%, e ajustando-se o pH final dos meios de cultura para 5,5. As condições para o dialélico 5 x 5 foram fotoperíodo de 16 horas de luz a 600 lux e temperatura de 25 &plusmn; 3&deg;C. No dialélico 3 x 3, os tratamentos foram mantidos em câmara de crescimento a 2.000 lux, sob a mesma variação de temperatura e fotoperíodo. Em cada frasco, inoculou-se um calo com cerca de 1 cm³, totalizando quinze repetições. Avaliaram-se o desenvolvimento de calos, atribuindo-se uma escala de notas de 1 a 5, e a presença de plantas (organogênese) após 30 dias de cultura. Observou-se o número total de plantas por tratamento, bem como o desenvolvimento das plantas em centímetro. No dialélico 5 x 5, a organogênese foi apenas incipiente em três tratamentos, porém as melhores combinações para o desenvolvimento dos calos foram de 0,5, 2,5 e 5,0&micro;M de IAA com 2,5&micro;M de 6-BA. No dialélico 3 x 3, houve a indução de plantas em sete tratamentos, sendo mais eficientes 25 e 50&micro;M de 6-BA, sem auxina. O tratamento de 0,5 e 10,0&micro;M de IAA e 6-BA, respectivamente, permitiu simultaneamente o crescimento de calos e a regeneração de plantas. Nota-se a influência das condições ambientais de manutenção das culturas, principalmente da intensidade de luz.<br>Callus from Lycopersicon esculentum x L. peruvianum interespecific hybrids cultured in vitro lost their morphogenetic abilities after two years. An attempt has been made to recover the organogenesis of those callus, using 5 x 5 and 3 x 3 diallelic combinations between indolacetic acid (IAA) and 6-benzyl-adenin (6-BA). Mineral salts and vitamins of the MS medium (Murashige & Skoog), were used, added with sucrose (3%) and agar (0.8%). Culture medium pH was kept at 5.5. The 5 x 5 diallelic treatments were incubated under the following conditions: day temperature = 25 &plusmn; 3&deg;C; day length = 16 hours; light intensity = 600 lux. The 3 x 3 diallelic treatments were kept at the same conditions of daylight and temperature but at 2000 lux light intensity. Callus development and shoot formation were graded from 1 to 5, 30 days after inoculation, Shoot number and height were also evaluated. In the 5 x 5 diallelic experiment, it was observed a low number of differentiated plants. The best combinations for callus development have been 0.5, 2.5 and 5.0&micro;M of IAA with 2.5&micro;M of 6-BA, respectively. However in the 3 x 3 diallelic experiment, it was recorded a high frequency of shoot formation s and the most efficient treatments were the 25.0 and 50.0&micro;M concentrations of 6-BA, without any auxin. It was also observed the influence of environmental condi-tions (mainly light intensity) on the process

Avaliação da capacidade de regeneração in vitro em tomateiro industrial Evaluation of the in vitro regeneration capacity in Brazilian industrial tomato

Este trabalho teve por objetivo avaliar a capacidade de regeneração das cultivares de tomateiro industrial (Lycopersicon esculentum Mill) IPA-5 e IPA-6, utilizando quatro composições de meio de cultura descritos na literatura e cinco variações de inoculação. Foi testada uma nova variação de inoculação, denominada cotilédone fendido. A maior freqüência de formação de gemas vegetativas foi 100% no caso de IPA-5, e 65% no caso de IPA-6. Para induzir o alongamento de brotos, foram necessários três subcultivos dos explantes apresentando gemas. No caso de IPA-5, o número de brotos obtidos foi maior quando a indução de gemas foi realizada em meio contendo BAP (2,5 mg L-1) e AIA (0,2 mg L-1) seguido de três subcultivos, em meio como zeatina (0,5 mg L-1). Usando esse protocolo, a cultivar IPA-5 produziu uma média de 5,45 brotos alongados a partir do cotilédone fendido. Essa capacidade excedeu significativamente o cotilédone aparado, que produziu 4,4 brotos alongados por explante. No caso de IPA-6, a melhor combinação de meios e método de inoculação produziu 0,87 broto alongado por explante. Os brotos alongados foram enraizados e transferidos para casa de vegetação.<br>The objective of this work was to evaluate the regeneration capacity of the IPA-5 and IPA-6 Brazilian industrial tomato (Lycopersicon esculentum Mill) cultivars using four compositions of culture media described in the literature and five inoculation methods. A new variation of inoculation, the split cotyledon method, was also tested. The largest frequency of shoot bud formation was 100% in the case of IPA-5 and 65% in the case of IPA-6. To induce shoot elongation, it was necessary to accomplish three subcultures of the explants presenting shoot buds. In the case of IPA-5, the number of the obtained shoots was higher when the induction of shoot buds was accomplished in culture medium containing BAP (2.5 mg L-1) and IAA (0.2 mg L-1) followed by three subcultures on zeatin (0.5 mg L-1) containing medium. Using such protocol, the IPA-5 cultivar produced, on the average, 5.45 elongated shoots through the split cotyledon method. That capacity exceeded significantly the trimmed cotyledon method, which produced 4.4 elongated shoots per explant. In the case of IPA-6, the best combination of culture medium and inoculation method produced 0.87 elongated shoot per explant. The elongated shoots were rooted and transferred to greenhouse