6 research outputs found
Potential use of temporin derivatives against infections caused by the herpes simplex virus type 1 (HSV-1, Herpes Simplex Virus 1)
Peptydy przeciwdrobnoustrojowe posiadaj膮 szereg aktywno艣ci, w艣r贸d kt贸rych opr贸cz zdolno艣ci b贸jczych, mo偶emy wyr贸偶ni膰 m. in. w艂a艣ciwo艣ci immunomoduluj膮ce, a tak偶e przeciwnowotworowe. Dowolno艣膰 艂膮czenia ze sob膮 peptyd贸w posiadaj膮cych szerokie spektrum w艂a艣ciwo艣ci leczniczych, przy jednoczesnym braku cytotoksyczno艣ci wzgl臋dem kom贸rek eukariotycznych, daje mo偶liwo艣膰 tworzenia nowych, bardziej specyficznych i bezpiecznych lek贸w. Przedmiotem bada艅 niniejszej pracy by艂o zbadanie wp艂ywu trzech koniugat贸w peptydowych (DAL-PEG-DK5, DAL-PEG-KSLW oraz DAL-PEG-LK6) na zaka偶enia wywo艂ane przez wirusa opryszczki pospolitej typu pierwszego (HSV-1, ang. Herpes Simplex Virus 1). Badane koniugaty s膮 po艂膮czeniem syntetycznego analogu enkefaliny (DAL), peptydu wykazuj膮cego w艂a艣ciwo艣ci pro-proliferacyjne, redukuj膮ce stres oksydacyjny oraz b贸l, z syntetycznymi peptydami o dzia艂aniu przeciwdrobnoustrojowym: DK5, KSLW, LK6. Peptydy DK5 oraz LK6 to pochodne temporyny-1CEb, natomiast peptyd KSLW to zwi膮zek pochodz膮cy z biblioteki kombinatorycznej. Badania wykaza艂y, 偶e infekcja wywo艂ana HSV-1 najwydajniej hamowana jest przez koniugat DAL-PEG-LK6. St臋偶enie powoduj膮ce zahamowanie replikacji HSV-1 o 50% dla DAL-PEG-LK6 wynosi 9,31 渭g/ml. Dzia艂anie przeciwwirusowe DAL-PEG-LK6 zosta艂o potwierdzone r贸wnie偶 przy pomocy cytometrii przep艂ywowej oraz mikroskopii konfokalnej. Co wi臋cej, wykazano, 偶e mechanizm dzia艂ania koniugatu opiera si臋 na bezpo艣redniej inaktywacji wirion贸w HSV-1 przez badany zwi膮zek. W ostatnim etapie eksperyment贸w oceniono wp艂yw badanych peptyd贸w na odpowied藕 kom贸rek gospodarza indukowan膮 艣cie偶k膮 sygnaln膮 przekazu kom贸rkowego inicjowan膮 aktywacj膮 receptora TLR3 (z ang. toll like receptor). Otrzymane dane pozwalaj膮 stwierdzi膰, 偶e spo艣r贸d testowanych zwi膮zk贸w, najefektywniej dzia艂aj膮cym koniugatem jest DAL-PEG-LK6 wykazuj膮cym wysok膮 aktywno艣膰 antywirusow膮 wzgl臋dem wirusa opryszczki typu 1 i prowadz膮cym do zaburzenia kaskady sygna艂owej TLR3.Antimicrobial peptides, besides microbicidal activity, have immunomodulatory and anticancer properties. The formation of conjugates composed of peptides with a wide range of therapeutic properties, which are non-toxic to eukaryotic cells, is a promising field to design more specific and safe drugs. The subject of this study was to investigate the effect of three peptide conjugates (DAL-PEG-DK5, DAL-PEG-KSLW and DAL-PEG-LK6) against infection with the herpes simplex virus type 1 (HSV-1). The tested compounds are formed from synthetic enkephalin analog (DAL), peptide showing pro-proliferative properties, reducing oxidative stress and pain, with synthetic antimicrobial peptides: DK5, KSLW, LK6. The DK5 and LK6 peptides state the analogous of temporin-1CEb, while the KSLW is a synthetic peptide derived from the combinatorial library of compounds. Presented studies have shown that HSV-1 infection is efficiently inhibited by the DAL-PEG-LK6 conjugate as IC50 value was 9,31 渭g/ml. The antiviral activity of DAL-PEG-LK6 was further confirmed by flow cytometry and confocal microscopy. Detailed analysis of molecular activity of tested compound revealed the direct inactivation of HSV-1 virions. Finally, the influence of tested peptide conjugates on TLR3 signaling pathway in host cells induced by tested virus was examined. Obtained results allow concluding that among the tested compounds, the most effective conjugate is DAL-PEG-LK6, which shows high antiviral activity against the herpes virus type 1 but also inhibits the TLR3 signaling cascade
The effect of DAL-PEG-DK5 conjugate on the survival of Staphylococcus aureus in keratinocytes
Zwi臋kszaj膮ca si臋 ilo艣膰 antybiotykoopornych szczep贸w bakteryjnych jest globalnym problemem opieki zdrowotnej. Jednymi z g艂贸wnych oportunistycznych szczep贸w identyfikowanych mi臋dzy innymi w zaka偶eniach wewn膮trzszpitalnych s膮 szczepy MRSA (ang. Methycilin Resistant Staphylococcus aureus), wykazuj膮ce r贸wnie偶 znacz膮ce zdolno艣ci do zmiany ekspresji gen贸w koduj膮cych czynniki zjadliwo艣ci, w odpowiedzi na zmieniaj膮ce si臋 艣rodowisko. Peptydy antybakteryjne (AMPs z ang. antimicrobial peptides) nale偶膮 do grupy zwi膮zk贸w, charakteryzuj膮cych si臋 w艂a艣ciwo艣ciami przeciwdrobnoustrojowymi i s膮 wydzielane przez wi臋kszo艣膰 organizm贸w. AMPs s膮 obiecuj膮cymi potencjalnymi cz膮steczkami terapeutycznymi i stanowi膮 dobr膮 alternatyw臋 dla antybiotyk贸w. W niniejszej pracy przedstawiono wyniki bada艅 prowadzonych przy u偶yciu koniugatu DAL-PEG-DK5, zbudowanego z syntetycznego analogu ludzkiej enkefaliny (DAL) oraz bogatego w lizyn臋 analogu temporyny 1CEb (DK5). W pracy zaprezentowano wyniki dotycz膮ce wp艂ywu tego peptydu na prze偶ywanie metycylinoopornego szczepu USA300 S. aureus w ludzkich keratynocyach (HaCaT). Przedstawione badania wykaza艂y istotne statystycznie zabijanie szczepu USA300 wewn膮trz kom贸rek HaCaT pod wp艂ywem testowanego koniugatu DAL-PEG-DK5. W niniejszej pracy wykazano r贸wnie偶 mechanizm dzia艂ania badanego zwi膮zku, kt贸ry w bardzo kr贸tkim czasie (0-10 min) wnika do wn臋trza bakterii uszkadzaj膮c ich b艂on臋. Udowodnione dzia艂anie bakteriob贸jcze wzgl臋dem bakterii wewn膮trzkom贸rkowych otwiera szerokie mo偶liwo艣ci testowania zwi膮zku w uk艂adach in vivo, a tak偶e mo偶e by膰 punktem wyj艣ciowym do projektowania kolejnych cz膮steczek o podobnej budowie.The increasing number of antibiotic-resistant bacterial strains is a global problem of the health care system. Among the major opportunistic strains, which are common in nosocomial infections is MRSA S. aureus (Methicillin Resistant Staphylococcus aureus), which is characterized by the ability to change the gene expression encoding virulence factors in response to different environmental stimuli. Antimicrobial peptides (AMPs) belong to the group of compounds, which possess strong antimicrobial properties and are secreted by most of the organisms. AMPs are promising potential therapeutic molecules considered to be an alternative to antibiotics. This thesis presents the results of research conducted with usage of peptide conjugate DAL-PEG-DK5 composed of the synthetic analogues of enkephalin (DAL) and lysine-rich derivative of temporin 1CEb (DK5). The aim of the research was to evaluate the influence of DAL-PEG-DK5 on the intracellular persistence of S. aureus USA300 in the human keratinocyte cell line (HaCaT). The results clearly indicated that DAL-PEG-DK5 treatment significantly reduced intracellular level of USA300. Furthermore, the results demonstrated the molecular mechanism of tested compound, which in a very short time (0-10 min) passes through the bacteria membranes. Presented data showing efficient elimination of intracellular bacteria by tested peptide enables in vivo study and may also lead to the design of novel peptide-based compounds with similar structure