Effects of vildagliptin on ventricular function in patients with type 2 diabetes mellitus and heart failure: a randomized placebo-controlled trial

Objectives: This study sought to examine the safety of the dipeptidyl peptidase-4 inhibitor, vildagliptin, in patients with heart failure and reduced ejection fraction. Background: Many patients with type 2 diabetes mellitus have heart failure and it is important to know about the safety of new treatments for diabetes in these individuals. Methods: Patients 18 to 85 years of age with type 2 diabetes and heart failure (New York Heart Association functional class I to III and left ventricular ejection fraction [LVEF] <0.40) were randomized to 52 weeks treatment with vildagliptin 50 mg twice daily (50 mg once daily if treated with a sulfonylurea) or matching placebo. The primary endpoint was between-treatment change from baseline in echocardiographic LVEF using a noninferiority margin of −3.5%. Results: A total of 254 patients were randomly assigned to vildagliptin (n = 128) or placebo (n = 126). Baseline LVEF was 30.6 ± 6.8% in the vildagliptin group and 29.6 ± 7.7% in the placebo group. The adjusted mean change in LVEF was 4.95 ± 1.25% in vildagliptin treated patients and 4.33 ± 1.23% in placebo treated patients, a difference of 0.62 (95% confidence interval [CI]: −2.21 to 3.44; p = 0.667). This difference met the predefined noninferiority margin of −3.5%. Left ventricular end-diastolic and end-systolic volumes increased more in the vildagliptin group by 17.1 ml (95% CI: 4.6 to 29.5 ml; p = 0.007) and 9.4 ml (95% CI: −0.49 to 19.4 ml; p = 0.062), respectively. Decrease in hemoglobin A1c from baseline to 16 weeks, the main secondary endpoint, was greater in the vildagliptin group: −0.62% (95% CI: −0.93 to −0.30%; p < 0.001; −6.8 mmol/mol; 95% CI: −10.2 to −3.3 mmol/mol). Conclusions: Compared with placebo, vildagliptin had no major effect on LVEF but did lead to an increase in left ventricular volumes, the cause and clinical significance of which is unknown. More evidence is needed regarding the safety of dipeptidyl peptidase-4 inhibitors in patients with heart failure and left ventricular systolic dysfunction. (Effect of Vildagliptin on Left Ventricular Function in Patients With Type 2 Diabetes and Congestive Heart Failure; NCT00894868

Determinación de pequeñas cantidades de arsénico

Se han estudiado los métodos para determinación de microcantidades de arsénico partiendo de los métodos clásicos publicados. Varios de ellos han demostrado ser precisos y engorrosos y en otros faltaban detalles de técnica, que se han completado en ciertos casos, v.gr. el método del diazobenceno. Se determinó que de los métodos directos, los más sensibles son los que hacen utilización de tioderivados, como por ejemplo la tioacetamida, tionalida, difeniltiocarbazida, etc. Se dan detalles para aplicar laticacetamina a un análisis cualitativo a la gota y cuantitativo por nesslerización, siempre que se haya separado convenientemente el arsénico de los otros elementos que interfieren. Se encontraron totalmente inseguros los derivados quinolínicos. Se exponen un método que utiliza la decoloración del complejo férrico-8-quinolinol contenido en papel de filtro, por arseniatos. En este ensayo interfieren los fosfatos. Fueron efectuados ensayos comparativos de los distintos métodos publicados para el azul de molibdeno, aplicándoselos a arseniatos, fosfatos, silicatos y germanatos. Se pudo comprobar que todos los métodos dan coloraciones más o menos intensas con los cuatro compuestos mencionados, siendo preciso proceder a una separación previa en cualquiera de los casos. Utilizando el dióxido de azufre en conjunción con un reductor orgánico, cuya cantidad no guarda una relación con el complejo que se quiere reducir, es posible obtener buenos resultados. Para el ensayo fué utilizado el acetilderivado en N del ácido 1,2,4 amino naftol sulfónico, cuya preparación se detalla. En el estudio del ácido arsenomolíbdico a temperaturas del orden de los 90 a 100 °C se encontró que tiene propiedades similares al ácido fosfomolíbdico a temperatura normal. En la comparación efectuada entre los vanadomolibdatos de arsénico, fósforo, silicio y germanio, se encontró que el complejo más susceptible a la variación de la acidez del medio en que se hallan disueltos, es el arsenovanadomolibdato. La medición de potenciales redox de ácido molíbdico, arsenomolibdico y fosfomolíbdico preparados en las mismas condiciones y disueltos en medios de acidez creciente, proporcionaron valores muy similares entre si, del orden de los 0,82 a 0,92 voltios (medidos contra electrodo de calomel saturado), lo que hace suponer que la reducción preferencial de los complejos por reductores orgánicos, se debería a una diferencia cinética. Por cromatografía comparativa se encontraron fracciones similares tanto por reducción de arseno como fosfomolibdatos, de manera que el elemento complejado puede no tener una relación directa en el mecanismo de reducción. Un índice de que en los azules puede haber alguna agrupación perteneciente a los complejos originales, lo demuestra el hecho que los azules pueden ser precipidos por ciertas aminas que se utilizan para precipitar los complejos sin reducir. Utilizando la propiedad que tienen los vanadatos libres de oxidar los arsenitos a arseniatos, se efectuó un estudio de estabilidad de los ácidos vanadomolíbdicos a fin de determinar a partir de qué proporción de molibdeno a vanadio, queda en forma libre éste último. Los datos encontrados indican que en mezclas que contienen más pentóxido de vanadio que la proporción de 4 moles de trióxido de molibdeno a un mol de pentóxido de vanadio, son capaces de oxidar el arsénico-III a arsénico-V. Esta última oxidación no se produce por los vanadatos libres sino por uno de los ácidos vanadomolíbdicos, reduciéndose éste y coloreándose la mezcla de verde. Se calcularon los coeficientes de reparto agua - butanol de vanadomolibdatos de arsénico, fósforo y germanio, en presencia de distintas graduaciones de acidez clorhídrica. Como los ácidos vanadomolíbdicos tienen color amarillo, se buscó el medio de eliminarlo, encontrando que las sales de aminas son en general incoloras. Se eligió como a mina la difenilguanidina, que tiene buenas propiedades de conservación, alto peso molecular, buena solubiliad. El vanadomolibdato de difenilguanidina tiene una solubilidad razonable en agua y muy baja en solventes orgánicos, es incoloro y precipita complejos amarillos correspondientes a los elementos arsénico-V, fósforo-V, silicio-IV y germanio-IV. Estos complejos son solubles en solventes orgánicos oxigenados y casi insolubles en agua. Por reductores fuertes, v.gr. Cloruro de Estaño-II, el vanadomolibdato de difenilgianidina se reduce formándose una solución amarillenta a incolora en medio clorhídrico. Los complejos correspondientes a los elementos antemencionados se colorean fuertemente de azul durante la reducción y son fácilmente extraíbles por los mismos solventes orgánicos oxigenados, en tanto que el reactivo reducido no lo es. Con el reactivo de vanadomolibdato de difenilguanidina se elaboraron varios métodos sensibles para analizar arsénico. Después de la solubilización de la muestra y destrucción de la materia orgánica por los métodos convencionales, se procede a extraer el tricloruro de arsénico de una solución 9 a 10 molar en ácido clorhídrico, conteniendo un reductor (por ejemplo cloruro de estaño-II), mediante tetracloruro de carbono. Se pasa el tricloruro de arsénico a una fase acuosa por extracción alcalina-oxidante, se neutraliza y evapora y se aplica a continuación el reactivo. Con ciertas variantes esta técnica puede aplicarse a determinaciones cualitativas ó cuantitativas. Para determinaciones cuantitativas se recomienda extraer con metiletilcetona al complejo que se forma y reducir con cloruro de estaño-II a azul de molibdeno, procediéndose a continuación a la medida fotométrica. Aplicando esta técnica a una muestra Standard (Muestra N° 89 del Burean of Standards), de vidrio, se encontraron desviaciones máximas del 9% operando en condiciones desventajosas y del 2,7% en condiciones óptimas, cuando se analizaron cantidades del orden de 13 microgramos de arsénico, en presencia de 50 veces la cantidad de bario y plomo y 300 veces la cantidad de silicio. También se ensayaron mezclas artificiales conteniendo 300 veces la cantidad de vanadio y 20.000 veces de germanio, antimonio, estaño, mercurio, fósforo y molibdeno, sin que se hayan observado desviaciones significativas en los resultados.Fil: Kothny, Evaldo Luis. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Efficacy of vildagliptin in combination with insulin in patients with type 2 diabetes and severe renal impairment

Peer reviewe

Mechanism of PP2A-mediated IKKβ dephosphorylation: a systems biological approach

BACKGROUND: Biological effects of nuclear factor-kappaB (NF kappaB) can differ tremendously depending on the cellular context. For example, NF kappaB induced by interleukin-1 (IL-1) is converted from an inhibitor of death receptor induced apoptosis into a promoter of ultraviolet-B radiation (UVB)-induced apoptosis. This conversion requires prolonged NF kappaB activation and is facilitated by IL-1 + UVB-induced abrogation of the negative feedback loop for NF kappaB, involving a lack of inhibitor of kappaB (I kappaB alpha) protein reappearance. Permanent activation of the upstream kinase IKK beta results from UVB-induced inhibition of the catalytic subunit of Ser-Thr phosphatase PP2A (PP2Ac), leading to immediate phosphorylation and degradation of newly synthesized I kappaB alpha. RESULTS: To investigate the mechanism underlying the general PP2A-mediated tuning of IKK beta phosphorylation upon IL-1 stimulation, we have developed a strictly reduced mathematical model based on ordinary differential equations which includes the essential processes concerning the IL-1 receptor, IKK beta and PP2A. Combining experimental and modelling approaches we demonstrate that constitutively active, but not post-stimulation activated PP2A, tunes out IKK beta phosphorylation thus allowing for I kappaB alpha resynthesis in response to IL-1. Identifiability analysis and determination of confidence intervals reveal that the model allows reliable predictions regarding the dynamics of PP2A deactivation and IKK beta phosphorylation. Additionally, scenario analysis is used to scrutinize several hypotheses regarding the mode of UVB-induced PP2Ac inhibition. The model suggests that down regulation of PP2Ac activity, which results in prevention of I kappaB alpha reappearance, is not a direct UVB action but requires instrumentality. CONCLUSION: The model developed here can be used as a reliable building block of larger NF kappa B models and offers comprehensive simplification potential for future modeling of NF kappa B signaling. It gives more insight into the newly discovered mechanisms for IKK deactivation and allows for substantiated predictions and investigation of different hypotheses. The evidence of constitutive activity of PP2Ac at the IKK complex provides new insights into the feedback regulation of NF kappa B, which is crucial for the development of new anti-cancer strategies

Pemphigus vulgaris autoantibodies induce apoptosis in HaCaT keratinocytes

Pemphigus vulgaris (PV) is an autoimmune disease characterized by binding of IgG autoantibodies to epidermal keratinocyte desmosomes. IgG autoantibodies obtained from a patient with mucocutaneous PV reacted with plakoglobin (Plkg) in addition to desmoglein-3 (Dsg3) and Dsg1. Immunofluorescence analysis confirmed that IgG autoantibodies, unlike antibodies from a healthy volunteer, caused disruption of cell-cell contacts in HaCaT keratinocytes. Moreover, apoptosis was enhanced in cells treated with autoantibodies compared to those treated with normal antibodies. The apoptotic process induced by IgG autoantibodies was characterized by caspase-3 activation, Bcl-2 depletion and Bax expression. The present report demonstrates that PV IgG autoantibodies promote apoptosis in HaCaT keratinocytes

Tumor Associated Macrophages Protect Colon Cancer Cells from TRAIL-Induced Apoptosis through IL-1β- Dependent Stabilization of Snail in Tumor Cells

We recently reported that colon tumor cells stimulate macrophages to release IL-1beta, which in turn inactivates GSK3beta and enhances Wnt signaling in colon cancer cells, generating a self-amplifying loop that promotes the growth of tumor cells.Here we describe that macrophages protect HCT116 and Hke-3 colon cancer cells from TRAIL-induced apoptosis. Inactivation of IL-1beta by neutralizing IL-1beta antibody, or silencing of IL-1beta in macrophages inhibited their ability to counter TRAIL-induced apoptosis. Accordingly, IL-1beta was sufficient to inhibit TRAIL-induced apoptosis. TRAIL-induced collapse of the mitochondrial membrane potential (Delta psi) and activation of caspases were prevented by macrophages or by recombinant IL-1beta. Pharmacological inhibition of IL-1beta release from macrophages by vitamin D(3), a potent chemopreventive agent for colorectal cancer, restored the ability of TRAIL to induce apoptosis of tumor cells cultured with macrophages. Macrophages and IL-1beta failed to inhibit TRAIL-induced apoptosis in HCT116 cells expressing dnIkappaB, dnAKT or dnTCF4, confirming that they oppose TRAIL-induced cell death through induction of Wnt signaling in tumor cells. We showed that macrophages and IL-1beta stabilized Snail in tumor cells in an NF-kappaB/Wnt dependent manner and that Snail deficient tumor cells were not protected from TRAIL-induced apoptosis by macrophages or by IL-1beta, demonstrating a crucial role of Snail in the resistance of tumor cells to TRAIL.We have identified a positive feedback loop between tumor cells and macrophages that propagates the growth and promotes the survival of colon cancer cells: tumor cells stimulate macrophages to secrete IL-1beta, which in turn, promotes Wnt signaling and stabilizes Snail in tumor cells, conferring resistance to TRAIL. Vitamin D(3) halts this amplifying loop by interfering with the release of IL-1beta from macrophages. Accordingly, vitamin D(3) sensitizes tumor cells to TRAIL-induced apoptosis, suggesting that the therapeutic efficacy of TRAIL could be augmented by this readily available chemopreventive agent

HGS-ETR1, a fully human TRAIL-receptor 1 monoclonal antibody, induces cell death in multiple tumour types in vitro and in vivo

Tumour necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) induces apoptosis in a variety of tumour cells through activation of TRAIL-R1 and TRAIL-R2 death signalling receptors. Here, we describe the characterisation and activity of HGS-ETR1, the first fully human, agonistic TRAIL-R1 mAb that is being developed as an antitumour therapeutic agent. HGS-ETR1 showed specific binding to TRAIL-R1 receptor. HGS-ETR1 reduced the viability of multiple types of tumour cells in vitro, and induced activation of caspase 8, Bid, caspase 9, caspase 3, and cleavage of PARP, indicating activation of TRAIL-R1 alone was sufficient to induce both extrinsic and intrinsic apoptotic pathways. Treatment of cell lines in vitro with HGS-ETR1 enhanced the cytotoxicity of chemotherapeutic agents (camptothecin, cisplatin, carboplatin, or 5-fluorouracil) even in tumour cell lines that were not sensitive to HGS-ETR1 alone. In vivo administration of HGS-ETR1 resulted in rapid tumour regression or repression of tumour growth in pre-established colon, non-small-cell lung, and renal tumours in xenograft models. Combination of HGS-ETR1 with chemotherapeutic agents (topotecan, 5-fluorouracil, and irinotecan) in three independent colon cancer xenograft models resulted in an enhanced antitumour efficacy compared to either agent alone. Pharmacokinetic studies in the mouse following intravenous injection showed that HGS-ETR1 serum concentrations were biphasic with a terminal half-life of 6.9–8.7 days and a steady-state volume of distribution of approximately 60 ml kg−1. Clearance was 3.6–5.7 ml−1 day−1 kg−1. These data suggest that HGS-ETR1 is a specific and potent antitumour agent with favourable pharmacokinetic characteristics and the potential to provide therapeutic benefit for a broad range of human malignancies