2 research outputs found
Multicentre Performance Evaluation of the Elecsys Anti-SARS-CoV-2 Immunoassay as an Aid in Determining Previous Exposure to SARS-CoV-2
Introduction
We performed a multicentre evaluation of the Elecsys® Anti-SARS-CoV-2 immunoassay (Roche Diagnostics), an assay utilising a recombinant protein representing the nucleocapsid (N) antigen, for the in vitro qualitative detection of antibodies to severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2).
Methods
Specificity was evaluated using serum/plasma samples from blood donors and routine diagnostic specimens collected before September 2019 (i.e., presumed negative for SARS-CoV-2-specific antibodies); sensitivity was evaluated using samples from patients with polymerase chain reaction (PCR)-confirmed SARS-CoV-2 infection. Point estimates and 95% confidence intervals (CIs) were calculated. Method comparison was performed versus commercially available assays.
Results
Overall specificity for the Elecsys Anti-SARS-CoV-2 immunoassay (n = 9575) was 99.85% (95% CI 99.75–99.92): blood donors (n = 6714; 99.82%), routine diagnostic specimens (n = 2861; 99.93%), pregnant women (n = 2256; 99.91%), paediatric samples (n = 205; 100.00%). The Elecsys Anti-SARS-CoV-2 immunoassay demonstrated significantly higher specificity versus LIAISON SARS-CoV-2 S1/S2 IgG (99.71% vs. 98.48%), EUROIMMUN Anti-SARS-CoV-2 IgG (100.00% vs. 94.87%), ADVIA Centaur SARS-CoV-2 Total (100.00% vs. 87.32%) and iFlash SARS-CoV-2 IgM (100.00% vs. 99.58%) assays, and comparable specificity to ARCHITECT SARS-CoV-2 IgG (99.75% vs. 99.65%) and iFlash SARS-CoV-2 IgG (100.00% vs. 100.00%) assays. Overall sensitivity for Elecsys Anti-SARS-CoV-2 immunoassay samples drawn at least 14 days post-PCR confirmation (n = 219) was 93.61% (95% CI 89.51–96.46). No statistically significant differences in sensitivity were observed between the Elecsys Anti-SARS-CoV-2 immunoassay versus EUROIMMUN Anti-SARS-CoV-2 IgG (90.32% vs. 95.16%) and ARCHITECT SARS-CoV-2 IgG (84.81% vs. 87.34%) assays. The Elecsys Anti-SARS-CoV-2 immunoassay showed significantly lower sensitivity versus ADVIA Centaur SARS-CoV-2 Total (85.19% vs. 95.06%) and iFlash SARS-CoV-2 IgG (86.25% vs. 93.75%) assays, but significantly higher sensitivity versus the iFlash SARS-CoV-2 IgM assay (86.25% vs. 33.75%).
Conclusion
The Elecsys Anti-SARS-CoV-2 immunoassay demonstrated very high specificity and high sensitivity in samples collected at least 14 days post-PCR confirmation of SARS-CoV-2 infection, supporting its use to aid in determination of previous exposure to SARS-CoV-2
Investigation of CD152 (CTLA-4) mediated regulation of effector functions of CD8 T-lymphocytes
In der vorliegenden Arbeit konnte gezeigt werden, dass CD152 die Produktion
der Effektormoleküle IFN-γ und Granzym-B nach antigenspezifischer primärer
sowie sekundärer Stimulation entscheidend herunterreguliert.
Interessanterweise konnte zudem erstmals nachgewiesen werden, dass CD152 auch
die frühe Zytotoxizität individueller CD8+ T Zellen in vivo hemmt. Desweiteren
ergab die Analyse der CD152 vermittelten Gen-Regulation wichtige Erkenntnisse
darĂĽber, wie CD152 verschiedene Effektor-Funktionen in CD8+ T Zellen
differenziell beeinflusst. Es konnte nachgewiesen werden, dass CD152 seine
inhibitorischen Effekte durch die selektive Hemmung der Akkumulation von
Eomesodermin mRNA ausĂĽbt und dadurch die Effektor-MolekĂĽl Produktion in CD8+ T
Zellen reguliert. Dieser Einfluss lag innerhalb der Hierarchie der
intrazellulären Signalkaskade proximal des ERK/MAPK Signalwegs und gibt zum
ersten Mal Aufschluss darĂĽber, dass CD152 die Immunantworten in T Zellen auf
transkriptioneller Ebene steuert. Ein besseres Verständnis der Mechanismen,
derer sich CD152 fĂĽr die Steuerung von Immunantworten von CD8+ T Zellen
bedient, ist fĂĽr die Entwicklung neuer Therapien, einschlieĂźlich solcher, die
sich bereits in klinischen Studien befinden, von groĂźer Bedeutung. Die
gegenwärtig in klinischen Studien untersuchten Therapien, welche durch CD152
Signale beeinflusst werden, beschränken sich zum einen auf den Einsatz des
CTLA4-Ig-Fusionsproteins, das gezielt den Schwellenwert, der fĂĽr eine
Aktivierung von CD8+ T Zellen nötig ist, anhebt, und zum anderen auf die
Verabreichung von CD152-blockierenden Antikörpern und Fab-Fragmenten, die den
Schwellenwert für eine Aktivierung herabsetzen. Hierdurch können entweder
chronische EntzĂĽndungen und autoimmune Reaktionen gegen autologe Strukturen
des Organismus, wie sie z.B. bei der rheumatoiden Arthritis oder der multiplen
Sklerose auftreten, verhindert werden, oder umgekehrt CD8+ T-Zell-Antworten
gegen bestimmte pathogene Antigene verstärkt werden. Dies ist z.B. bei der
Behandlung von metastasierenden Tumoren, aber auch bei der Bekämpfung
chronischer viraler Infektionen von groĂźem Vorteil. Die Ergebnisse der hier
vorliegenden Arbeit erweitern das Verständnis der Wirkungsweise dieser
Therapievarianten auf CD8+ T Zellen und tragen so dazu bei, den Einsatz dieser
Behandlungen zielgenauer zu machen und Nebenwirkungen zu minimieren. Aufgrund
der hier präsentierten Daten über die von CD152 genutzte intrazelluläre
Signalkaskade des ERK/MAPK-Signalwegs und der Akkumulation von Eomesodermin
mRNA im Nukleus ergeben sich des weiteren neue mögliche Ansatzpunkte für den
Einsatz von Pharmazeutika, die gezielt in diesen Signalweg eingreifen. Das
könnte neue therapeutische Möglichkeiten eröffnen, wie z.B. die Wirkungsstärke
des Transkriptionsfaktors Eomesodermin je nach Bedarf der Effektorfunktionen
von CD8+ T Zellen unter Bezug auf die jeweils zu behandelnde Krankheit zu
modulieren.CD8+ T lymphocyte activation is initiated by interaction of their T cell
receptors (TCR) with cells presenting specific antigenic peptides bound to
major histocompatibility class one molecules (MHC-I). The outcome of the T
cell response to this interaction is tightly controlled by signals from
specific costimulatory receptors. The primary costimulatory receptors for
B7-family ligands are CD28 and CD152, two structurally homologue members of
the Ig superfamily expressed on the surface of T cells. Unlike CD28 which is
constitutively expressed on T cells and enhances TCR signaling, CD152 is only
detectable on the T cell surface after activation and abrogates the effector
phase of the T-cell response. Moreover, it has an approximately 50-fold higher
binding affinity to members of the B7-family than CD28 CD8+ T lymphocytes are
required for effective host defense against pathogens but also for mediating
effector responses against uncontrolled proliferating self tissues. We could
now reveal that individual CD8+ T cells are tightly controlled in their
effector functions by CD152 (CTLA 4, cytotoxic T lymphocyte antigen. In this
thesis it was demonstrated that signals induced by CD152 reduce the frequency
of interferon-gamma and GranzymeB expressing CD8+ T cells independently of the
transcription factors T-bet or cKrox by selectively inhibiting accumulation of
Eomesodermin mRNA and protein downstream of the ERK/MAPK pathway. Ectopic
expression of Eomes reversed CD152-mediated inhibition of effector molecule
production. Additionally, enhanced cytotoxicity of individual CD8+ T cells
differentiated in the absence of CD152 signaling could be demonstrated in
vivo. These novel insights extend the understanding how to selectively
modulate immune responses of CD8+ T cells