Biotransformação enzimática de resíduos de vinificação de uvas tinta e branca e seus efeitos antioxidante e anti-inflamatório in vitro

Orientadores: Gabriela Alves Macedo, Alessandra GamberoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosResumo: Resíduos de vinificação de uvas têm sido considerados fontes potenciais de compostos fenólicos poliméricos e glicosídeos, conhecidos por terem menores biodisponibilidade e bioatividade do que fenólicos monoméricos e agliconas. Hidrólises enzimáticas são bioprocessos que podem liberar compostos fenólicos de seus conjugados, levando a um possível aumento em sua funcionalidade. O objetivo deste estudo foi avaliar mudanças no teor e perfil de polifenóis, atividades antioxidante e anti-inflamatória de resíduos de vinificação de uvas tintas (RUT), brancas (RUB) e de uma mistura de uvas (RMU). Biotransformações enzimáticas usando as enzimas tanase (T), combinação de pectinase e celulase (PC) e as três enzimas juntas (TPC) foram realizadas durante 5h a 40°C (pH 5.0). Além disso, foram avaliadas ações anti-inflamatórias do RUT e do resíduo após tratamento com tanase (RUTT) em células Caco-2. As biotransformações enzimáticas, em especial com tanase, foram capazes de modificar a forma glicosilada dos polifenóis nos resíduos e aumentaram as quantidades de ácidos fenólicos, em especial ácido gálico, quercetina e trans-resveratrol, consequentemente aumentando sua atividade antioxidante. Os tratamentos contendo tanase foram os mais eficientes em aumentar a atividade antioxidante dos resíduos, analisadas pelos métodos de ORAC, DPPH e FRAP. A quantidade de catequina foi aumentada especialmente no RUT após tratamento com PC e procianidina B2 teve seus valores aumentados especialmente após TPC no RUB. RUT e RUTT, nas concentrações 100 e 100 ?g/mL de extrato seco (m/v) atuaram com a mesma eficácia na redução da produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) em células Caco-2. Após 24 h de pré-tratamento com os extratos, RUTT 200 µg/mL inibiu a produção de prostaglandina 2 (PGE2) e interleucina 8 (IL-8) em 107% e 83%, respectivamente, e reduziu a ativação do fator de transcrição kappa B (NF-?B) em 68% em células Caco-2 após indução de inflamação por interleucina 1-beta (IL-1?). Em geral, RUTT foi mais eficiente que RUT na atenuação de marcadores de inflamação nas células. Estes resultados demonstram benefícios no aproveitamento desses resíduos e do uso de bioprocessos na modificação de produtos naturais, aumentando a extração, biodisponibilidade e bioatividade de compostos fenólicosAbstract: Grape pomace (GP) has been considered a potential source of polymeric phenolic compounds and glycosides, known to have lower bioefficacy than monomers and aglycones, which can compromise their bioavailability and properties. Enzymatic hydrolyzes may release the compounds from their conjugates, improving its functional activity. The aim of this study was to determine the release of phenolic compounds and the improvement of the antioxidant and anti-inflammatory activity of red (RGP), white (WGP) and a mixture of grape pomaces (MGP) from Brazilian wine industries. Tannase enzyme (T), the combination of pectinase and cellulase (PC) and the 3 enzymes together (TPC) were applied for 5h at 40°C (pH 5.0). Also, it was evaluated if RGP treated with tannase (RGPT) would improve anti-inflammatory actions in Caco-2 cells. Tannase treatment (GPT) was the most significant treatment on enhancing total phenols in GP samples. Enzymatic hydrolysis, notably tannase, modified the galloylated form of polyphenols and released phenolic acids, especially gallic acid, quercetin and trans-resveratrol, thus enhancing the antioxidant activity. The tannase-containing treatments were the most effective on enhancing the antioxidant capacity of residues, assessed by ORAC, DPPH and FRAP assays. Catechin amounts increased in RGP after PC treatment and procyanidin B2 was increased especially after TPC treatment in WGP. RGP and RGPT at 100 and 200 µg/mL of dry extract (wt/v) displayed comparable efficacy in the reduction of ROS production in Caco-2 cells. After 24-h pretreatment, GPT at 200 µg/mL decreased IL-1?-induced PGE2 production by 107% and IL-8 by 83% and down-regulated NF-?B activation by 68%, as compared to control. Overall, GPT exhibited more potent efficacy than GP in the amelioration of IL-1?-induced inflammation in Caco-2 cells. These results demonstrate the benefits of the exploitation of this agroindustrial by-product and the biotechnological modification of natural products in order to enrich bioavailable and bioactive polyphenols in foodsDoutoradoCiência de AlimentosDoutora em Ciência de Alimentos248675/2013-3CNPQCAPE

Ocurrence and assessment of enterotoxigenic potencia of Staphylococcus isolated from dairy products

Orientador: José Luiz PereiraDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosResumo: Staphylococcus são micro-organismos amplamente distribuídos na natureza, sendo o homem e os animais suas principais fontes. A contaminação cruzada após a pasteurização do leite, especialmente por manipulação inadequada, é apontada como a mais importante forma de contaminação dos derivados do leite por estes patógenos, que são importantes em alimentos devido à sua habilidade de produzir uma grande quantidade de proteínas extracelulares (enterotoxinas) que, se pré-formadas no alimento e ingeridas, causam a intoxicação estafilocócica. Apesar da legislação brasileira (RDC 12/2001, Anvisa) preconizar apenas a contagem de Staphylococcus coagulase positiva, relacionando a produção da coagulase com o risco de produção de enterotoxinas, já foi comprovado que espécies coagulase negativas também são capazes de produzir enterotoxinas nos alimentos. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram: i) quantificar e analisar a presença de Staphylococcus coagulase positiva e negativa em 104 amostras de derivados lácteos, sendo 24 de sorvete artesanal, 20 de creme de leite pasteurizado, 20 de patê à base de queijo, 20 de queijo Minas frescal e 20 de queijo Minas meia cura; ii) identificar fenotipicamente as espécies isoladas; iii) avaliar a produção de enterotoxinas clássicas (SEA, SEB, SEC1,2,3, SED e SEE) in vitro pelo sistema VIDAS e relacionar os resultados obtidos com a presença de possíveis genes codificadores destas enterotoxinas, pela aplicação da técnica de PCR. Os valores médios de contagens preliminares nos diferentes grupos de alimentos analisados foram: 5 x 103 UFC/g em sorvete, 2,9 x 105 UFC/g em creme de leite, 6,2 x 103 UFC/g em patê, 6,6 x 105 UFC/g em queijo Minas frescal e 6,4 x 105 UFC/g em queijo Minas meia cura. Do total de isolados, 83,6% (148/177) foram classificados como sendo do gênero Staphylococcus e 16,4% (29/177) como Micrococcus. Staphylococcus foram isolados de 43,3% (45/104) das amostras, sendo detectados em 25 amostras de queijos, em 16 sorvetes, em 3 patês e em apenas 1 amostra de creme de leite. Entre os isolados de Staphylococcus, 74,3% (110/148) eram coagulase negativa e 25,7% (38/148) eram coagulase positiva recuperados apenas nas amostras de queijos. Dos 111 isolados selecionados (27 coagulase positiva e 84 coagulase negativa), foram identificadas 13 espécies através do sistema API-Staph (bioMérieux-SA): S. aureus, S. auricularis, S. caprae, S. chromogenes, S. cohnii ssp cohnii, S. epidermidis, S. hominis, S. hyicus, S. lentus, S. saprophyticus, S. sciuri, S. warneri, S. xylosus. Para a detecção de enterotoxinas estafilocócicas clássicas, foi utilizado o kit (bioMérieux-SA). Dos?imunoenzimático ViDAS SET ¿Staph enterotoxin¿ 111 isolados, apenas um (0,9%) produziu enterotoxina, sendo este identificado como S. aureus, coagulase positiva, isolado a partir de queijo Minas meia cura, cuja contagem foi de 1,9 x 106 UFC/g. Ao contrário do esperado, não foram detectados genes codificadores das 5 enterotoxinas em nunhum dos isolados analisados. Discrepâncias entre resultados de testes fenotípicos e genotípicos para detecção de enterotoxinas são comuns, sendo necessária a realização de outros testes imunológicos e moleculares para confirmação destes resultados. Possíveis justificativas seriam a existência de variações nas sequências dos genes do isolado ou a presença de uma toxina que possui reação imunológica cruzada com as enterotoxinas clássicas. Neste estudo, apesar da quase totalidade dos isolados não terem produzido enterotoxinas clássicas, havia um número bem elevado de Staphylococcus em diversos produtos analisados, não excluindo um possível risco de produção das demais enterotoxinas já descritas e demonstrando a falta de cuidados higiênico-sanitários e de boas práticas durante a produção e comercialização destes alimentosAbstract: Staphylococcus are microorganisms widespread in nature and humans and animals are their main sources. Cross-contamination after milk pasteurization, caused especially by improper handling, is considered the most recurrent source of dairy products contamination by these pathogens. Staphylococus deserves our close attention due their ability to produce a large amount of extracellular proteins (enterotoxins), that if preformed in food and ingested, cause staphylococcal food poisoning. Although the Brazilian legislation (RDC 12/2001, Anvisa) only recommends coagulase-positive staphylococci count monitoring (relating coagulase production to the risk of enterotoxins production), previous researches showed that coagulase-negative species are also capable of producing enterotoxins in foods. Thus, this research aimed: i) to quantify and analyze the presence of coagulase-positive and coagulase-negative staphylococci from 104 dairy products samples, being: 24 homemade ice cream, 20 pasteurized dairy cream, 20 cheese pate, 20 Minas fresh cheese, and 20 Minas half cured cheese; ii) to identify phenotypically the species; iii) to evaluate the production of classic enterotoxins (SEA, SEB, Sec1, 2.3, SED and SEE) in vitro by using VIDAS system and correlate the results to the presence of possible coding genes of these enterotoxins, applying the PCR technique. The average staphylococcal preliminary count values in different food groups analyzed were: 5 x 103 CFU/g in ice cream, 2,9 x 105 CFU/g in dairy cream, 6,2 x 103 CFU/g in pate, 6,6 x 105 CFU/g in Minas fresh cheese and 6,4 x 105 CFU/g in Minas half cured cheese. From isolated strains, 83,6% (148/177) were classified as genus Staphylococcus and 16,4% (29/177) as Micrococcus. Staphylococcus were isolated from 43,3% (45/104) of samples, being found in 25 cheese samples, in 16 ice creams, in 3 pates and in just one dairy cream sample. Among staphylococcal strains, 74,3% (110/148) were coagulase-negative Staphylococcus and 25,7% (38/148) were coagulase-positive Staphylococcus, being these recovered only from cheeses samples. On 111 selected isolates (27 coagulase-positive and 84 coagulase-negative), were identified 13 staphylococcal species by using API-Staph system (bioMérieux-SA): S. aureus, S. auricularis, S. caprae, S. chromogenes, S. cohnii ssp cohnii, S. epidermidis, S. hominis, S. hyicus, S. lentus, S. saprophyticus, S. sciuri, S. warneri, S. xylosus. For classical staphylococcal enterotoxins detection was used VIDAS SET Staph- Enterotoxin immunoassay kit (bioMérieux-SA). From 111 isolates, just one (0,9%) produced enterotoxin, which was identified as S. aureus, coagulasepositive, isolated from Minas half cured cheese, whose count was 1,9 x 106 CFU/g. Contrary to expectations, no coding genes were present in isolates analyzed. Discrepancies between phenotypic and genotypic results of enterotoxin detection tests are common, requiring the application of other immunological and molecular tests for the confirmation of the results. Possible explanations would be that there are genes sequences variations or another enterotoxin that has immunological cross-reaction with classic enterotoxins. For this research, although the higher number of the isolates did not produce classical enterotoxins, the analyzed samples showed high staphylococcal concentration, that do not exclude a newly described enterotoxins risk production. It also demonstrates the lack of hygiene, health care and good practices during the production and commercialization of dairy productsMestradoMestre em Ciência de Alimento

Antioxidant potential and modulatory effects of restructured lipids from the amazonian palms on liver cells

Enzymatic interesterification is used to manipulate oil and fat in order to obtain improved restructured lipids with desired technological properties. However, with raw materials containing significant amounts of bioactive compounds, the influence of this enzymatic process on the bioactivity of the final product is still not clear. Thus, the aim of this study is to evaluate the antioxidant potential and modulatory effects of two raw materials from the Amazonian area, buriti oil and murumuru fat, before and after lipase interesterification, on human hepatoma cells (HepG2). The results indicate that minor bioactive compounds naturally found in the raw materials and their antioxidant capacity are preserved after enzymatic interesterification, and that the restructured lipids modulate HepG2 endogenous antioxidant enzyme554553561CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQCOORDENAÇÃO DE APERFEIÇOAMENTO DE PESSOAL DE NÍVEL SUPERIOR - CAPESFUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO - FAPESP2012- -22774-5; 2012-22829-4Sem informaçãoSem informaçã

Antioxidant Potential and Modulatory Effects of Restructured Lipids from the Amazonian Palms on Liver Cells

Enzimska interesterifikacija koristi se za obradu ulja i masti radi dobivanja restrukturiranih lipida sa željenim tehnološkim svojstvima. Međutim, s obzirom na to da sirovi materijali sadržavaju velike udjele bioaktivnih tvari, još uvijek je nejasan utjecaj ovakvih enzimskih procesa na biološku aktivnost konačnog produkta. Stoga je svrha ovog istraživanja bila procijeniti antioksidacijski potencijal i modulacijski učinak dvaju sirovih materijala iz područja Amazone (buriti ulja i murumuru masti) na stanice jetre (HepG2), i to prije i nakon procesa interesterifikacije. Istraživanje je pokazalo da su neke bioaktivne komponente sirovih materijala i njihov antioksidacijski učinak očuvani nakon enzimske esterifikacije restrukturiranih lipida, pri čemu dolazi do modulacije HepG2 endogenog antioksidacijskog enzima.Enzymatic interesterification is used to manipulate oil and fat in order to obtain improved restructured lipids with desired technological properties. However, with raw materials containing significant amounts of bioactive compounds, the influence of this enzymatic process on the bioactivity of the final product is still not clear. Thus, the aim of this study is to evaluate the antioxidant potential and modulatory effects of two raw materials from the Amazonian area, buriti oil and murumuru fat, before and after lipase interesterification, on human hepatoma cells (HepG2). The results indicate that minor bioactive compounds naturally found in the raw materials and their antioxidant capacity are preserved after enzymatic interesterification, and that the restructured lipids modulate HepG2 endogenous antioxidant enzyme

Variations and particularities in cardiovascular disease mortality in Brazil and Brazilian states in 1990 and 2015 : estimates from the Global Burden of Disease

Objetivo: Analisar as variações e os diferenciais da mortalidade por doenças cardiovasculares (DCV) no Brasil e em seus estados, em 1990 e 2015. Métodos: Foram utilizados os dados de mortalidade compilados pelo Global Burden of Disease (GBD) 2015, obtidos da base de dados do Sistema de Informação sobre Mortalidade do Ministério da Saúde. Foram realizadas a correção do sub-registro de óbitos e a reclassificação dos códigos garbage por meio de algoritmos específicos. As causas cardiovasculares foram subdivididas em 10 causas específicas. As taxas de mortalidade — dos anos 1990 e 2015 — foram padronizadas pela idade, de acordo com o sexo e o estado brasileiro. Resultados: A taxa de mortalidade por DCV padronizada por idade caiu de 429,5 (1990) para 256,0 (2015) a cada 100 mil habitantes (40,4%). A redução proporcional foi semelhante em ambos os sexos, mas as taxas em homens são substancialmente mais altas do que nas mulheres. A redução da taxa padronizada por idade foi mais acentuada para a doença cardíaca reumática (44,5%), cardiopatia isquêmica (43,9%) e doença cerebrovascular (46,0%). A queda na mortalidade diferiu marcadamente entre os estados, sendo mais acentuada nos estados das regiões Sudeste e Sul do país e no Distrito Federal, e atenuada nos estados do Norte e Nordeste. Conclusão: A mortalidade por DCV padronizada por idade reduziu no Brasil nas últimas décadas, porém de forma heterogênea entre os estados e para diferentes causas específicas. Considerando a magnitude da carga de doença e o envelhecimento da população brasileira, as políticas de enfrentamento das DCV devem ser priorizadas.Objective: To analyze variations and particularities in mortality due to cardiovascular disease (CVD) in Brazil and in Brazilian states, in 1990 and 2015. Methods: We used data compiled from the Global Burden of Disease (GBD) 2015, obtained from the database of the Mortality Information System (SIM) of the Brazilian Ministry of Health. Correction of the sub-registry of deaths and reclassification of the garbage codes were performed using specific algorithms. The cardiovascular causes were subdivided into 10 specific causes. Age-standardized CVD mortality rates — in 1990 and 2015 — were analyzed according to sex and Brazilian state. Results: Age-standardized CVD mortality rate decreased from 429.5 (1990) to 256.0 (2015) per 100,000 inhabitants (40.4%). The proportional decrease was similar in both sexes, but death rates in males were substantially higher. The reduction of age-standardized mortality rate was more significant for rheumatic heart disease (44.5%), ischemic cardiopathy (43.9%), and cerebrovascular disease (46.0%). The decline in mortality was markedly different across states, being more pronounced in those of the southeastern and southern regions and the Federal District, and more modest in most states in the north and northeast regions. Conclusion: Agestandardized CVD mortality has declined in Brazil in recent decades, but in a heterogeneous way across states and for different specific causes. Considering the burden magnitude and the Brazilian population aging, policies to prevent and manage CVD should continue to be prioritized

A descontinuação da prescrição da aspirina para prevenção primária de doenças cardiovasculares: uma revisão narrativa / The discontinuation of aspirin prescription for primary prevention of cardiovascular diseases: a narrative review

INTRODUÇÃO: As doenças do aparelho circulatório são a principal causa de morte no Brasil e no mundo. O uso da aspirina na prevenção secundária de doenças cardiovasculares (DCV), devido ao seu efeito antiplaquetário, está consolidado, porém, tem-se discutido seus reais benefícios na prevenção primária. Diante disso, nosso estudo tem por objetivo reunir dados acerca do risco-benefício do uso da aspirina na profilaxia primária de eventos cardiovasculares. RESULTADOS: Ensaios clínicos, metanálises e revisões sistemáticas dos últimos 5 anos revelaram em algumas populações uma menor taxa de infarto agudo do miocárdio, Ataque Isquêmico Transitório e Acidente Vascular Cerebral Isquêmico, em detrimento de um maior risco de sangramento importante em todas as populações estudadas, além de um aumento significativo do risco de morte na população idosa. DISCUSSÃO: Esses estudos evidenciaram, de forma geral, pouco ou nenhum benefício na utilização de aspirina como prevenção primária de DCV e um aumento significativo do risco de sangramentos. CONCLUSÃO: A prescrição da aspirina para prevenção primária de DCVs deve ser individualizada, contrabalanceando seu benefício com o risco de sangramento

Abordagens terapêuticas inovadoras na gestão da dor crônica: uma síntese de evidências

Inovações terapêuticas, como o uso de células-tronco mesenquimais e plasma rico em plaquetas, oferecem avanços promissores na gestão da dor crônica, proporcionando não apenas alívio imediato, mas também abordando as causas subjacentes para melhorar a qualidade de vida dos pacientes. Este estudo teve como objetivo desenvolver uma síntese de evidências sobre abordagens terapêuticas inovadoras na gestão da dor crônica. Nesse sentido, foi desenvolvida uma revisão sistemática da literatura, utilizando Scielo, Lilacs e Medline como bases de dados. A partir da análise qualitativa dos resultados, concluiu-se que abordagens terapêuticas inovadoras, como fisioterapia, terapias cognitivo-comportamentais e intervenções farmacológicas específicas, são eficazes na gestão da dor crônica. A ênfase na personalização do tratamento, considerando a diversidade da condição, destaca-se como crucial para otimizar resultados

Diagnóstico diferencial da Síndrome de Takotsubo e infarto agudo do miocárdio: uma revisão sistemática: Differential diagnosis of Takotsubo Syndrome and acute myocardial infarction: a systematic review

A cardiomiopatia de Takotsubo e o infarto agudo do miocárdio compartilham apresentação clínica e risco de morte semelhantes, embora uma das diferenças mais importantes seja a ausência de doença coronariana obstrutiva na cardiomiopatia de Takotsubo. Neste estudo, tem-se como objetivo analisar a literatura disponível avaliando o diagnóstico diferencial entre pacientes com CTT em comparação com pacientes com infarto agudo do miocárdio. Para isso, foi realizada uma revisão sistemática, utilizando-se a Pubmed e a Medline como base de dados. A partir da análise dos estudos e interpretação de suas principais descobertas, concluiu-se que para pacientes com CTT, outras condições e comorbidades, em vez de apenas dislipidemia e/ou outros fatores de risco estabelecidos, sejam responsáveis por um risco de morte comparável ao de IAM. No entanto, as conclusões desse estudo têm várias limitaçõe

ATLANTIC EPIPHYTES: a data set of vascular and non-vascular epiphyte plants and lichens from the Atlantic Forest

Epiphytes are hyper-diverse and one of the frequently undervalued life forms in plant surveys and biodiversity inventories. Epiphytes of the Atlantic Forest, one of the most endangered ecosystems in the world, have high endemism and radiated recently in the Pliocene. We aimed to (1) compile an extensive Atlantic Forest data set on vascular, non-vascular plants (including hemiepiphytes), and lichen epiphyte species occurrence and abundance; (2) describe the epiphyte distribution in the Atlantic Forest, in order to indicate future sampling efforts. Our work presents the first epiphyte data set with information on abundance and occurrence of epiphyte phorophyte species. All data compiled here come from three main sources provided by the authors: published sources (comprising peer-reviewed articles, books, and theses), unpublished data, and herbarium data. We compiled a data set composed of 2,095 species, from 89,270 holo/hemiepiphyte records, in the Atlantic Forest of Brazil, Argentina, Paraguay, and Uruguay, recorded from 1824 to early 2018. Most of the records were from qualitative data (occurrence only, 88%), well distributed throughout the Atlantic Forest. For quantitative records, the most common sampling method was individual trees (71%), followed by plot sampling (19%), and transect sampling (10%). Angiosperms (81%) were the most frequently registered group, and Bromeliaceae and Orchidaceae were the families with the greatest number of records (27,272 and 21,945, respectively). Ferns and Lycophytes presented fewer records than Angiosperms, and Polypodiaceae were the most recorded family, and more concentrated in the Southern and Southeastern regions. Data on non-vascular plants and lichens were scarce, with a few disjunct records concentrated in the Northeastern region of the Atlantic Forest. For all non-vascular plant records, Lejeuneaceae, a family of liverworts, was the most recorded family. We hope that our effort to organize scattered epiphyte data help advance the knowledge of epiphyte ecology, as well as our understanding of macroecological and biogeographical patterns in the Atlantic Forest. No copyright restrictions are associated with the data set. Please cite this Ecology Data Paper if the data are used in publication and teaching events. © 2019 The Authors. Ecology © 2019 The Ecological Society of Americ