Constitutive Expression of TNF-Related Activation-Induced Cytokine (TRANCE)/Receptor Activating NF-κB Ligand (RANK)-L by Rat Plasmacytoid Dendritic Cells

Plasmacytoid dendritic cells (pDCs) are a subset of DCs whose major function relies on their capacity to produce large amount of type I IFN upon stimulation via TLR 7 and 9. This function is evolutionary conserved and place pDC in critical position in the innate immune response to virus. Here we show that rat pDC constitutively express TNF-related activation-induced cytokine (TRANCE) also known as Receptor-activating NF-κB ligand (RANKL). TRANCE/RANKL is a member of the TNF superfamily which plays a central role in osteoclastogenesis through its interaction with its receptor RANK. TRANCE/RANK interaction are also involved in lymphoid organogenesis as well as T cell/DC cross talk. Unlike conventional DC, rat CD4high pDC were shown to constitutively express TRANCE/RANKL both at the mRNA and the surface protein level. TRANCE/RANKL was also induced on the CD4low subsets of pDC following activation by CpG. The secreted form of TRANCE/RANKL was also produced by rat pDC. Of note, levels of mRNA, surface and secreted TRANCE/RANKL expression were similar to that observed for activated T cells. TRANCE/RANKL expression was found on pDC in all lymphoid organs as well blood and BM with a maximum expression in mesenteric lymph nodes. Despite this TRANCE/RANKL expression, we were unable to demonstrate in vitro osteoclastogenesis activity for rat pDC. Taken together, these data identifies pDC as novel source of TRANCE/RANKL in the immune system

Spécialisation fonctionnelle des sous-populations de cellules dendritiques chez le rat

Le système immunitaire permet de nous protéger contre les agents pathogènes. L'induction d'une réponse immunitaire efficace contre un pathogène, via des cellules T spécifiques d'un antigène, a été développé comme un mécanisme sophistiqué. Ce mécanisme dépend des cellules dendritiques (DC) ou cellules présentatrices d'antigènes professionnelles, lesquelles sont capables de transporter l'antigène de la périphérie vers les tissus lymphoïdes. Les DC sont unique dans leur capacité à induire et à réguler les réponses immunes et tolérogènes en périphe rie. Le but de ma thèse a été d'analyser les fonctions des différentes sous populations de DC chez le rat. Nous avons décrit que les DC spléniques chez le rat peuvent être séparées en deux sous populations CD4+ et CD4- et que les DC CD4- possèdent une activité cytotoxique naturelle in vitro contre des cellules tumorales. Ainsi, comme il fut décrit précédemment chez l'homme et chez la souris, nous avons identifié l'existence d'une sous population de DC produisant beaucoup d'IL-12 chez le rat induisant une réponse Th1. Nous avons ensuite caractérisé les DC plasmacytoïdes (pDC) du rat, découvertes précédemment chez l'homme et chez la souris, qui peuvent jouer un rôle dans la tolérance périphérique. Ces cellules peuvent produire beaucoup d'IFN de type I en réponse à une stimulation virale et expriment spécifiquement les TLR 7 et 9. Nous avons aussi analysé le répertoire d'expression des TLR de chaque sous populations de DC et leurs réponses spécifiques aux ligands des TLR et démontré des différences fonctionnelles importantes. Enfin, nous nous sommes intéressés au rôle des DC dans l'homéostasie des cellules T régulatrices, où nous montrons le rôle des pDC dans le contrôle des cellules T CD4+ CD25+ dites régulatrices. Ces résultats montrent que la connaissance des sous populations de DC est fondamentale dans l'établissement des réponses immunitaires et de tolérance.The immune system evolved to protect us from microbes. The induction of effective antigen-specific T-cell immunity to pathogens has evolved as a sophisticated and highly balanced immunoregulatory mechanism. This mechanism depends on dendritic cells (DC) or professional antigen-presenting cells, which are able to transport antigens from the periphery to lymphoid tissues. DC are unique in their capacity to induce and regulate immunity and tolerance in the periphery. The aim of my thesis was to analyze the functions of different dendritic cells subsets in rats. We reported that splenic DC in rats can be separated into functionally different CD4+ and CD4- subsets and that CD4- DC exhibited a natural cytotoxic activity in vitro against tumour cells. As previously shown in mice and humans, we have identified the existence of high IL-12-producing DC subset in the rat that induce Th1 responses. We have characterized the rat counterpart of plasmacytoid dendritic cells (pDC) that were identified previously in human and in mouse and that might play a role in peripheral tolerance. These cells produced enormous amounts of IFN type I and expressed selectively TLR7 and 9. We also analyzed the repertoire of TLR expression in dendritic cell subsets and their specific responses to TLR ligands and demonstrated important functional differences. Finally, we became interested with the role of DC subsets in homeostasis of regulatory T cells. We showed the role of plasmacytoid dendritic cells in expansion of regulatory T cells. These results show that the knowledge of DC subsets is fundamental in establishment of immune and tolerance responses.NANTES-BU Médecine pharmacie (441092101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Influence de la dissolution sur les vibrations de valence ν(XH) de quelques molécules simples

Le spectre infrarouge des vibrations de valence des molécules H2O, H2S, H2Se, H2Te, NH3, PH3, AsH3, SbH3, CH4, SiH4 et SnH4 est enregistré à l’état gazeux et à l’état dissous dans le tétrachlorure de carbone. Une attribution est proposée pour les bandes de valence des molécules XH2 et XH3 à l’état dissous. Les ailes plus ou moins marquées qui accompagnent les bandes en solution sont interprétées comme dues à la persistance de la rotation des molécules de soluté. On confirme l’influence de la polarité des liaisons XH sur la perturbation des fréquences par dissolution. On montre en outre qu’à polarité égale, l’abaissement relatif des fréquences ν(XHn) est d’autant plus notable que l’atome X est plus gros, contrairement à ce que laissent prévoir les théories électrostatiques classiques. On explique ce phénomène par l’influence des forces de dispersion

Fms-Like Tyrosine Kinase 3 Ligand Recruits Plasmacytoid Dendritic Cells to the Brain

The lack of professional afferent APCs in naive brain parenchyma contributes to the systemic immune ignorance to Ags localized exclusively within the brain. Dendritic cells (DCs) appear within the brain as a consequence of inflammation, but no molecular mechanisms accounting for this influx have been described. In this study we demonstrate that Fms-like tyrosine kinase 3 ligand (Flt3L) recruits plasmacytoid DCs (pDCs; >50-fold; p < 0.001) to the brain parenchyma. These pDCs expressed IFN-alpha, the hallmark cytokine produced by pDCs, indicating recruitment and activation in situ of bona fide pDCs within the brain parenchyma. Flt3L did not increase the numbers of conventional DCs, macrophages, or B, T, NK, NKT, or microglial cells within the brain. Our data demonstrate that Flt3L reconstitutes a crucial afferent component of the immune response, namely, professional APCs within the brain parenchyma, and this could counteract the intrinsic systemic immune ignorance to Ags localized exclusively within the brain