Studies of thiamine biosynthesis

In Escherichia coli, and other prokaryotes, thiamine (vitamin B1) is assembled by coupling 4-amino-5-hydroxymethyl-2-methylpyrimidine pyrophosphate (Hmp-PP) and 4-methyl-5-(?-hydroxyethyl)thiazole phosphate (Thz-P). The thiazole moiety is biosynthesised from 1-deoxyxylulose-5-phosphate, tyrosine, and cysteine, and at least six genes are required including thiH, thiG, thiS, and thiF. Whilst in aerobes, the C2-N3 fragment of Thz-P derives from glycine in a reaction catalysed by the flavoenzyme ThiO, in anaerobes such as E. coli, dehydroglycine is formed from tyrosine in a ThiH dependent reaction. This biosynthetic step requires the cleavage of the C?-C? bond of tyrosine and a release of an aromatic side chain. ThiH shows sequence similarity with the ‘radical S-adenosylmethionine’ (AdoMet) family of proteins, including conserved cysteine ligands to the essential [4Fe-4S] cluster and has been shown to form a complex with ThiG. With the purpose of studying the mechanistic enzymology by which Thz-P is assembled it was crucial to isolate ThiH in the holo-form. Several expression systems and purification methodologies were investigated. The optimisation of the purification method, together with in vitro chemical reconstitution with exogenous iron and sulfide allowed the successful isolation of holo-ThiH.To facilitate the mechanistic investigation of Thz-P biosynthesis, an in vitro assay was developed, and the reaction products formed in vitro were elucidated and quantified. The aromatic by-product derived from the side chain of tyrosine is p-cresol and the remaining fragment yields glyoxylate, a product of hydrolysis of dehydroglycin

Utilização de bactérias isoladas de queijos açorianos na produção de manteiga com baixo teor em colesterol

Dissertação de Mestrado, Tecnologia e Segurança Alimentar, 10 maio de 2019, Universidade dos Açores.Nos dias de hoje há uma crescente procura por um estilo de vida saudável, praticando atividade física e optando por uma alimentação mais regrada e adequada. Sabe-se que a falta destes cuidados gera graves problemas de saúde, sendo as doenças cardiovasculares a principal causa de morte nos países desenvolvidos. Uma das principais causas para o desenvolvimento das doenças cardiovasculares é o nível elevado de colesterol no sangue. Por esta razão é importante consumir produtos com baixo teor de colesterol e com benefícios para a sua saúde. Os produtos lácteos podem funcionar como um veículo de culturas probióticas onde se incluem as bactérias do ácido láctico (BAL). Determinadas BAL, além de atuarem favoravelmente nos alimentos durante os processos de fermentação, ainda exercem efeitos benéficos na saúde do consumidor. Estes efeitos incluem, por exemplo, a redução do colesterol, e por essa razão algumas BAL podem ser utilizadas como probióticos. Este trabalho tem como objetivo avaliar a capacidade de um conjunto de BAL isoladas do queijo do Pico artesanal, para assimilar e reduzir o colesterol. Após esta pesquisa inicial, foram selecionadas três estirpes de Lactobacillus paracasei (estirpes L2A21K5, L3B1M2 e L3B21R1) por reduzirem em maior quantidade o colesterol em meio de cultura. Estas estirpes foram aplicadas diretamente na fermentação de natas, ou imobilizadas em esferas de alginato, para a produção de uma manteiga com baixo teor em colesterol. A maior redução de colesterol (23 %) foi obtida com a imobilização das culturas de BAL em esferas de alginato. O processo de fermentação das natas com as BAL imobilizadas originou uma manteiga com 68 mg/100 g de colesterol (44% de redução). Esta manteiga foi testada numa prova sensorial por um painel de provadores não treinado, e comparada com uma manteiga comercial. Os provadores consideraram a manteiga com baixo teor de colesterol como tendo um bom aspeto, consistência, sabor e aroma (classificação de 4 numa escala 1-5). Desta forma, a manteiga produzida pelo método descrito no presente trabalho tem o potencial de ser considerada como um alimento funcional ao apresentar um teor em colesterol reduzido, além de ter a vantagem de ser um produto totalmente açoriano.ABSTRACT: Nowadays, there is an increasing demand for a healthy lifestyle, practicing physical activity and opting for a more regular and adequate diet. It is known that the lack of such care generates serious health problems, with cardiovascular diseases being the leading cause of death in developed countries. One of the main causes for the development of cardiovascular diseases is the high level of cholesterol in the blood. For this reason, it is important to consume products with low cholesterol and with health benefits. Dairy products can function as a vehicle for probiotic cultures including lactic acid bacteria (LAB). Certain LAB, besides acting favorably in food fermentation processes, still exert beneficial effects on the health of the consumer. These effects include cholesterol lowering and, for this reason, some of the species may be used as probiotics. This work aims to evaluate the ability of a set of LAB isolated from artisanal Pico cheese to assimilate and reduce cholesterol. After this initial research, three strains of Lactobacillus paracasei (strains L2A21K5, L3B1M2 and L3B21R1) were selected for reducing cholesterol in culture medium. These strains were applied directly to the fermentation of cream, or immobilized on alginate beads, for the production of a low cholesterol butter. The highest cholesterol reduction (23%) was obtained with the immobilization of LAB cultures on alginate beads. The fermentation process of the creams with immobilized LAB produced a butter with 68 mg/100 g of cholesterol (44% reduction). This butter was tested on a sensory test by an untrained panel of tasters, and compared to a commercial butter. The tasters considered the low-fat butter to have a good look, consistency, flavor and aroma (rating 4 on a 1-5 scale). The butter produced by this method has the potential to be included as a functional food, due to the reduced cholesterol content, and has the advantage of being a truly Azorean product

Adenocarcinoma do Esófago - Abordagem Atual

Introdução O cancro do esófago é uma doença neoplásica agressiva, com uma incidência crescente e um prognóstico pobre. O adenocarcinoma e o carcinoma epidermóide são os dois tipos histológicos mais comummente associados a este cancro e compõem mais de 95% de todos os tumores esofágicos. O carcinoma epidermóide era anteriormente o tipo histológico predominante globalmente, enquanto o adenocarcinoma era raramente observável. No entanto, com o passar das décadas e a melhoria na qualidade de vida, a incidência do adenocarcinoma tem subido drasticamente no Ocidente, sendo responsável pela maioria dos cancros do esófago no Norte da Europa, América do Norte e Austrália. A doença do refluxo gastroesofágico é considerada preponente desta tendência epidemiológica; não-obstante exploram-se outras hipóteses causais menos bem-estabelecidas. Métodos Seguindo as guidelines SANRA, realizou-se uma revisão narrativa da literatura incidindo amplamente na temática do adenocarcinoma do esófago (epidemiologia, patofisiologia, fatores de risco, clínica, diagnóstico, estadiamento, tratamento e prognóstico). Recorreu-se a duas bases de dados de referências, a Medline e a ScienceDirect. Resultados Identificaram-se um total de 353 referências. Após exclusão de duplicados, artigos não disponíveis ou irrelevantes, analisaram-se qualitativamente 142 artigos. Discussão Toda a bibliografia atual considera o Esófago de Barret como o último estadio pré- invasivo na sequência metaplasia-displasia-neoplasia do adenocarcinoma do esófago, sendo assim o melhor preditor do risco de cancro. A vigilância dos pacientes com Esófago de Barrett oferece, assim, a oportunidade de deteção precoce do adenocarcinoma. As opções de tratamento incluem técnicas endoscópicas diretas, cirurgia de resseção, quimioterapia perioperatória e radioterapia preoperatória - sendo que a evidência recente de mais alta qualidade apoia a terapia multimodal e abordagens minimamente invasivas como o padrão de cuidados de saúde. Conclusão O corpo de conhecimento em torno do adenocarcinoma do esófago está maioritariamente bem descrito. Todavia, o prognóstico da doença permanece precário, que coloca o cancro esofágico no sexto lugar global de maior mortalidade.Introduction Esophageal cancer is an aggressive malignancy with an increasing incidence and a poor prognosis. Esophageal adenocarcinoma (EAC) and squamous cell carcinoma (SCC) are the two most common histologic types and make up over 95% of all esophageal malignant tumors. In the past, SCC was the predominating type, while EAC was a rarely seen condition. However, over time, as a result of better quality of life, the incidence of EAC has increased dramatically in Western countries, accounting for the majority of all esophageal cancers in Northern Europe, North America and Australia. Gastroesophageal reflux disease is consensually regarded as the main culprit. Regardless, we explore other less well-established hypothesis. Methods Following the SANRA guidelines, we performed a narrative review of literature regarding epidemiology, pathophysiology, risk factors, clinical manifestations, diagnosis, staging, treatment, and prognosis of Esophageal Adenocarcinoma. We used both Medline and ScienceDirect libraries. Results We identified a total of 353 records. After exclusion of duplicates, unavailable and non- relevant articles, we included 142 papers in our broad scope narrative review. Discussion All contemporary works consider Barrett's Esophagus (BE) as the last preinvasive stage in the metaplasia-dysplasia-neoplasia sequence of EAC, thus remaining the single best surrogate marker for cancer risk. BE surveillance offers the opportunity of early EAC diagnosis. Treatment options include novel direct endoscopic therapies, esophagectomy, perioperative chemotherapy and preoperative radiation therapy - with the most recent and highest-standard evidence pointing towards multimodality therapy & minimally invasive strategies as the standard of care. Conclusion The EAC landscape is for the most part well-described. Nevertheless, prognosis remains substandard and incidence is ever-increasing, which leads to esophageal cancer being the sixth most deadly worldwide

China’s paths to environmental recovery: Examining environmental concerns, priorities, and challenges

China’s ongoing economic growth started in the 1970s, and its effects have been devastating on the lives of the population and on the environment, producing harmful health complications. However, nearly fifty years later, the Chinese government has reported that China’s environment has started to recover from those effects. Authors have found that a many of China’s policies have focused on emission control and reduction, which could be the reason for these successful improvements. However, few studies analyse politics throughout the years, using various types of government documents. In this dissertation, we use qualitative content analysis to analyse 54 documents made available by the Chinese Ministry of Ecology and Environment, in search for information regarding the main environmental concerns of the Chinese government, the types of environmental policies that have been promulgated, when they started being developed, and how they have contributed to pollution reduction. The findings point to a focus on policies related water and air pollution, international cooperation, climate and natural disasters, and the control of industries and enterprises. Furthermore, the analysis suggests that China has been recovering in the last years due to an increasing concern with climate change policies, and that international cooperation is necessary in the context of environmental policymaking. Therefore, this present study presents interesting contributes to the discipline of International Environmental Studies. We suggest that future research on the subject focuses on the timeline of policymaking within the international and domestic contexts of the fight against climate change, evaluating the effectiveness of these policies.O crescimento económico da China começou na década de 1970, surtindo efeitos devastadores na vida da população chinesa, bem como no meio ambiente, e originando várias complicações de saúde. Contudo, décadas depois, o governo chinês anunciou melhorias no meio ambiente, indicando que a China está a recuperar dos efeitos da poluição. Alguns autores concluíram que grande parte das políticas ambientais da China se focam no controlo e redução das emissões poluentes, o que poderá explicar esta recuperação. No entanto, até então, são poucos os estudos que analisam as políticas ambientais da China ao longo do tempo, recorrendo a vários tipos de documentos governamentais. Esta dissertação recorre à análise qualitativa de conteúdo de 54 documentos do governo chinês relacionados com o ambiente, procurando identificar as principais preocupações ambientais do governo chinês, o tipo de políticas ambientais que têm sido implementadas na China, e que fatores contribuíram para a redução dos efeitos da poluição. Os resultados indicam um foco em políticas relacionadas com poluição da água e do ar, cooperação internacional, desastres naturais, e controlo de indústrias. A análise sugere uma crescente preocupação com as alterações climáticas nas suas políticas governamentais, e uma necessidade cooperação internacional no âmbito das políticas ambientais. Desta forma, o presente estudo oferece contributos relevantes para disciplina de Estudos Internacionais sobre o ambiente. Assim, sugerimos que futuros estudos se foquem no aspeto temporal das políticas ambientais, relacionando-as com a evolução do estado do ambiente e com o contexto nacional e internacional em termos ambientais e de alterações climáticas

Red flags for financial fraud: uncovering the wirecard fraud case

Wirecard AG, a forward-thinking corporation that aimed to reshape the payment industry, declared bankruptcy in June 2020. The company reported missing a total of EUR 1.9 billion, assuming they had probably never existed. This incident harmed the credibility of the German’s financial regulator and the reputation of the external auditors. Wirecard’s Annual Reports and other sources, such as the Financial Times newspaper, were examined in light of the thirty-seven red flags identified in Murcia and Borba’s (2007) study, which was supported on the International Standard Auditing (ISA) 240, to determine whether the red flags included in this standard were sufficient to indicate potential Financial Statement fraud in the Wirecard case. Twenty-four of the thirty-seven red flags examined sign potential fraud. Nineteen of these red flags are included in ISA 240, leading to the conclusion that the red flags present in that standard were sufficient to indicate potential Financial Statement fraud in the Wirecard case, and any outsider analyst could have detected and incorporated these early warning alarms into their decision-making. This also makes clear that auditors neglected the red flags signalization in the Wirecard case. Although ISA 240 proved to be effective, five of the twenty-four red flags were absent in this standard. These red flags are significant since they expose business issues, implying that a modification of ISA 240 to integrate similar essential red flags is required to make this standard more effective. Moreover, the Wirecard case raised six new significant red flags that can be incorporated in ISA 240.Wirecard AG, uma empresa inovadora que prometeu revolucionar a indústria de pagamentos, declarou falência em junho de 2020. A empresa deu como desaparecido um total de 1,9 biliões de euros, assumindo que provavelmente estes nunca tinham existido. Este incidente prejudicou a credibilidade da entidade reguladora alemã e a reputação dos auditores externos. Relatórios Anuais da Wirecard e outras fontes, como o jornal Financial Times, foram analisadas à luz de trinta e sete bandeiras vermelhas identificadas no estudo de Múrcia e Borba (2007), apoiado pela International Standard on Auditing (ISA) 240, para determinar se as bandeiras vermelhas presentes nesta norma eram suficientes para indicar potencial fraude nas Demonstrações Financeiras no caso Wirecard. Vinte e quatro das trinta e sete bandeiras vermelhas examinadas sugerem potencial fraude. Dezanove destas bandeiras vermelhas estão incluídas na ISA 240, permitindo concluir que as bandeiras vermelhas presentes nesta norma eram suficientes para indicar potencial fraude nas Demonstrações Financeiras no caso Wirecard, e qualquer analista externo à empresa poderia ter detetado e incorporado estes sinais prévios na sua tomada de decisão. Esta informação também evidencia que os auditores negligenciaram a sinalização das bandeiras vermelhas. Embora a ISA 240 tenha provado ser eficaz, cinco das vinte e quatro bandeiras vermelhas estavam ausentes nesta norma. Estas bandeiras vermelhas são significativas, pois expõem problemas nas empresas, implicando que uma modificação na ISA 240 para integrar bandeiras vermelhas essenciais similares é necessária de forma a torna-la mais eficaz. Adicionalmente, o caso Wirecard revelou seis novas bandeiras vermelhas significativas que podem ser incorporadas na ISA 240

Spectral and coherence estimates on electroencephalogram recordings during arithmetical tasks

Dissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia Biomédic