75 research outputs found
Diversity of respiratory parameters and metabolic adaptation to low oxygen tension in mesenchymal stromal cells
Objective Cell metabolism has been shown to play an active role in regulation of stemness and fate decision. In order to identify favorable culture conditions for mesenchymal stromal cells (MSCs) prior to transplantation, this study aimed to characterize the metabolic function of MSCs from different developmental stages in response to different oxygen tension during expansion. Materials and methods We cultured human fetal cardiac MSCs and human adult bone-marrow MSCs for a week under hypoxia (3% O2) and normoxia (20% O2). We performed mitochondrial characterization and assessed oxygen consumption- and extracellular acidification-rates (OCR and ECAR) in addition to oxygen-sensitive respiration and mitochondrial complex activities, using both the Seahorse and Oroboros systems. Results Adult and fetal MSCs displayed similar basal respiration and mitochondrial amount, however fetal MSCs had lower spare respiratory capacity and apparent coupling efficiency. Fetal MSCs expanded in either hypoxia or normoxia demonstrated similar acidification rates, while adult MSCs downregulated their aerobic glycolysis in normoxia. Acute decrease in oxygen tension caused a higher respiratory inhibition in adult compared to fetal MSCs. In both sources of MSCs, minor changes in complex activities in normoxic and hypoxic cultures were found. Conclusions In contrast to adult MSCs, fetal MSCs displayed similar respiration and aerobic glycolysis at different O2 culture concentrations during expansion. Adult MSCs adjusted their respiration to glycolytic activities, depending on the culture conditions thus displaying a more mature metabolic function. These findings are relevant for establishing optimal in vitro culturing conditions, with the aim to maximize engraftment and therapeutic outcome.CC BY-NC-ND 4.0Corresponding author: Department of Surgical Sciences, Uppsala University, 751 85, Uppsala, Sweden. E-mail address: [email protected] (K.-H. Grinnemo).Available online 3 February 2022, Version of Record 5 February 2022The project was funded by Karolinska Institute-Mayo Clinic Collaborative Grant 2013; The Swedish Research Council young investigator: 2013â3590; Stockholm county; The Swedish Research Council; The Family Erling-Persson Foundation; ERC-2018-AdG (834860 EYELETS); Uppsala county; Uppsala County Association against Heart and Lung Diseases; and Higher Education of the Russian Federation (agreement no. 075-15-2020-899).</p
Identification of storage conditions stabilizing extracellular vesicles pre
Extracellular vesicles (EVs) play a key role in many physiological and pathophysiological processes and hold great potential for therapeutic and diagnostic use. Despite significant advances within the last decade, the key issue of EV storage stability remains unresolved and under investigated. Here, we aimed to identify storage conditions stabilizing EVs and comprehensively compared the impact of various storage buffer formulations at different temperatures on EVs derived from different cellular sources for up to 2 years. EV features including concentration, diameter, surface protein profile and nucleic acid contents were assessed by complementary methods, and engineered EVs containing fluorophores or functionalized surface proteins were utilized to compare cellular uptake and ligand binding. We show that storing EVs in PBS over time leads to drastically reduced recovery particularly for pure EV samples at all temperatures tested, starting already within days. We further report that using PBS as diluent was found to result in severely reduced EV recovery rates already within minutes. Several of the tested new buffer conditions largely prevented the observed effects, the lead candidate being PBS supplemented with human albumin and trehalose (PBS-HAT). We report that PBS-HAT buffer facilitates clearly improved short-term and long-term EV preservation for samples stored at -80°C, stability throughout several freeze-thaw cycles, and drastically improved EV recovery when using a diluent for EV samples for downstream applications
Recommended from our members
Endothelin-1 supports clonal derivation and expansion of cardiovascular progenitors derived from human embryonic stem cells
Coronary arteriogenesis is a central step in cardiogenesis, requiring coordinated generation and integration of endothelial cell and vascular smooth muscle cells. At present, it is unclear whether the cell fate programme of cardiac progenitors to generate complex muscular or vascular structures is entirely cell autonomous. Here we demonstrate the intrinsic ability of vascular progenitors to develop and self-organize into cardiac tissues by clonally isolating and expanding second heart field cardiovascular progenitors using WNT3A and endothelin-1 (EDN1) human recombinant proteins. Progenitor clones undergo long-term expansion and differentiate primarily into endothelial and smooth muscle cell lineages in vitro, and contribute extensively to coronary-like vessels in vivo, forming a functional humanâmouse chimeric circulatory system. Our study identifies EDN1 as a key factor towards the generation and clonal derivation of ISL1+ vascular intermediates, and demonstrates the intrinsic cell-autonomous nature of these progenitors to differentiate and self-organize into functional vasculatures in vivo
Tissue Factor Produced by the Endocrine Cells of the Islets of Langerhans Is Associated With a Negative Outcome of Clinical Islet Transplantation
MaskininlÀrningsmetoder för felklassificering
This project, conducted at Ericsson AB, investigates the feasibility of implementing machine learning techniques in order to classify dump files for more effi cient trouble report routing. The project focuses on supervised machine learning methods and in particular Bayesian statistics. It shows that a program utilizing Bayesian methods can achieve well above random prediction accuracy. It is therefore concluded that machine learning methods may indeed become a viable alternative to human classification of trouble reports in the near future.Detta examensarbete, utfört pÄ Ericsson AB, Àmnar att undersöka huruvida maskininlÀrningstekniker kan anvÀndas för att klassificera dumpfiler för mer effektiv problemidentifiering. Projektet fokuserar pÄ övervakad inlÀrning och dÄ speciellt Bayesiansk klassificering. Arbetet visar att ett program som utnyttjar Bayesiansk klassificering kan uppnÄ en noggrannhet vÀl över slumpen. Arbetet indikerar att maskininlÀrningstekniker mycket vÀl kan komma att bli anvÀndbara alternativ till mÀnsklig klassificering av dumpfiler i en nÀra framtid
Vad krÀvs av en ERP-leverantör för att i framtiden tillfredstÀlla mindre företag?
Ett ERP-system syftar till att ta hand om företagets resurser och skapa ett enhetligt integrerat system för dessa. ERP-system kan ocksÄ anvÀndas för informationsutbyte mellan företaget, kunden och leverantörens system. Behov av ERP-system finns inom de flesta branscher oavsett storlek och inriktning men kritik har riktats mot att systemen inte lever upp till anvÀndarnas förvÀntningar eller tillfredstÀller anvÀndarens behov. Arbetets fokus ligger koncentrerat pÄ hur mindre företags uppfattning om ERP-system Àr och vad som krÀvs av en ERP-leverantör för att i framtiden tillfredstÀlla mindre företag. En surveyundersökning har anvÀnts för att fÄ fram relevant information för att lösa min problemprecisering. Resultatet av arbetet visar att integrering med företagets externa aktörer, framför allt med kunders informationssystem, Àr det kriterium som Àr mest betydelsefullt i ett ERP-system i framtiden. ERP-leverantörer bör ocksÄ inrikta sig mot att öka integreringen med de interna informationssystemen i företaget
Sexualundervisning i mellanstadiet : En kvalitativ studie av mellanstadielÀrares förutsÀttningar att bedriva undervisning om sexualitet, samtycke och relationer
Denna studie har undersökt vad som pÄverkar mellanstadielÀrares förutsÀttningar att bedriva sexualundervisning. I och med Lgr22 bytte sexualundervisningen namn till sexualitet, samtycke och relationer och stÄr nu med som en del av skolans vÀrdegrund. Sexualitet, samtycke och relationer ska dÀrför behandlas Äterkommande genom skolgÄngen. Den tidigare forskningen som har relevans för studien behandlar aspekter av lÀrares förutsÀttningar att bedriva sexualundervisning, sexualundervisning i svenska skolan och praktiska förutsÀttningar för sexualundervisning. Syftet med studien var att med hjÀlp av ramfaktorteorin synliggöra vad som pÄverkar mellanstadielÀrares förutsÀttningar att bedriva sexualundervisning utifrÄn förÀndringarna i Lgr22. För att besvara syftet genomfördes sex stycken semistrukturerade intervjuer med mellanstadielÀrare pÄ tre olika skolor. Materialet har sedan bearbetats med en tematisk analys. Resultatet visade att det som pÄverkade lÀrarnas förutsÀttningar var tiden, elevgruppen, tillgÄngen till material, relationerna i skolan samt lÀroplanen. Andra Äterkommande teman som intervjupersonerna belyste var att samhÀllsdebatten, lÀrarnas personliga förutsÀttningar samt kontinuitet i undervisningen pÄverkade deras förutsÀttningar. Ett annat resultat var att lÀroplansÀndringarna har pÄverkat sexualundervisningen genom att flera lÀrare tycker att det har blivit ett större gemensamt ansvar bland skolpersonalen att arbeta med sexualitet, samtycke och relationer
Specialpedagogik i förskolan : Pedagogers möjligheter och förutsÀttningar för att bemöta varje enskilt barn i behov av stöd
Syftet med studien Àr att undersöka hur pedagoger i förskolan bemöter barn som Àr i behov av sÀrskilt stöd, hur de arbetar med specialpedagogik och vilka möjligheter och förutsÀttningar som finns för att skapa en inkluderande verksamhet. Studien har utgÄtt frÄn ett sociokulturellt perspektiv. DÀr handlar det om att barnets lÀrande och utveckling inte bara beror pÄ den mentala och biologiska utrustningen, men beror Àven pÄ den sociokulturella miljön och vilka tillgÄngar och resurser som barnet har. Forskningsmetoden som anvÀnts Àr en kvalitativ undersökning med genomförda intervjuer och observationer av pedagoger i förskolor med olika utbildningar och arbetslivserfarenheter. Resultatet visar att arbetet med specialpedagogik Àr komplext och kan uppfattas olika. Resultatet tydliggör Àven hur organisation, specialpedagogisk kompetens och förÀldrasamverkan lÀgger grunden för goda förutsÀttningar för pedagogers bemötande av barn i behov av sÀrskilt stöd.
Improving Knowledge of Truck Fuel Consumption Using Data Analysis
The large potential of big data and how it has brought value into various industries have been established in research. Since big data has such large potential if handled and analyzed in the right way, revealing information to support decision making in an organization, this thesis is conducted as a case study at an automotive manufacturer with access to large amounts of customer usage data of their vehicles. The reason for performing an analysis of this kind of data is based on the cornerstones of Total Quality Management with the end objective of increasing customer satisfaction of the concerned products or services. The case study includes a data analysis exploring how and if patterns about what affects fuel consumption can be revealed from aggregated customer usage data of trucks linked to truck applications. Based on the case study, conclusions are drawn about how a company can use this type of analysis as well as how to handle the data in order to turn it into business value. The data analysis reveals properties describing truck usage using Factor Analysis and Principal Component Analysis. Especially one property is concluded to be important as it appears in the result of both techniques. Based on these properties the trucks are clustered using k-means and Hierarchical Clustering which shows groups of trucks where the importance of the properties varies. Due to the homogeneity and complexity of the chosen data, the clusters of trucks cannot be linked to truck applications. This would require data that is more easily interpretable. Finally, the importance for fuel consumption in the clusters is explored using model estimation. A comparison of Principal Component Regression (PCR) and the two regularization techniques Lasso and Elastic Net is made. PCR results in poor models difficult to evaluate. The two regularization techniques however outperform PCR, both giving a higher and very similar explained variance. The three techniques do not show obvious similarities in the models and no conclusions can therefore be drawn concerning what is important for fuel consumption. During the data analysis many problems with the data are discovered, which are linked to managerial and technical issues of big data. This leads to for example that some of the parameters interesting for the analysis cannot be used and this is likely to have an impact on the inability to get unanimous results in the model estimations. It is also concluded that the data was not originally intended for this type of analysis of large populations, but rather for testing and engineering purposes. Nevertheless, this type of data still contains valuable information and can be used if managed in the right way. From the case study it can be concluded that in order to use the data for more advanced analysis a big-data plan is needed at a strategic level in the organization. The plan summarizes the suggested solution for the managerial issues of the big data for the organization. This plan describes how to handle the data, how the analytic models revealing the information should be designed and the tools and organizational capabilities needed to support the people using the information
Sexualundervisning i mellanstadiet : En kvalitativ studie av mellanstadielÀrares förutsÀttningar att bedriva undervisning om sexualitet, samtycke och relationer
Denna studie har undersökt vad som pÄverkar mellanstadielÀrares förutsÀttningar att bedriva sexualundervisning. I och med Lgr22 bytte sexualundervisningen namn till sexualitet, samtycke och relationer och stÄr nu med som en del av skolans vÀrdegrund. Sexualitet, samtycke och relationer ska dÀrför behandlas Äterkommande genom skolgÄngen. Den tidigare forskningen som har relevans för studien behandlar aspekter av lÀrares förutsÀttningar att bedriva sexualundervisning, sexualundervisning i svenska skolan och praktiska förutsÀttningar för sexualundervisning. Syftet med studien var att med hjÀlp av ramfaktorteorin synliggöra vad som pÄverkar mellanstadielÀrares förutsÀttningar att bedriva sexualundervisning utifrÄn förÀndringarna i Lgr22. För att besvara syftet genomfördes sex stycken semistrukturerade intervjuer med mellanstadielÀrare pÄ tre olika skolor. Materialet har sedan bearbetats med en tematisk analys. Resultatet visade att det som pÄverkade lÀrarnas förutsÀttningar var tiden, elevgruppen, tillgÄngen till material, relationerna i skolan samt lÀroplanen. Andra Äterkommande teman som intervjupersonerna belyste var att samhÀllsdebatten, lÀrarnas personliga förutsÀttningar samt kontinuitet i undervisningen pÄverkade deras förutsÀttningar. Ett annat resultat var att lÀroplansÀndringarna har pÄverkat sexualundervisningen genom att flera lÀrare tycker att det har blivit ett större gemensamt ansvar bland skolpersonalen att arbeta med sexualitet, samtycke och relationer
- âŠ