Engineering of xylose reductase and overexpression of xylitol dehydrogenase and xylulokinase improves xylose alcoholic fermentation in the thermotolerant yeast Hansenula polymorpha

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>The thermotolerant methylotrophic yeast <it>Hansenula polymorpha </it>is capable of alcoholic fermentation of xylose at elevated temperatures (45 – 48°C). Such property of this yeast defines it as a good candidate for the development of an efficient process for simultaneous saccharification and fermentation. However, to be economically viable, the main characteristics of xylose fermentation of <it>H. polymorpha </it>have to be improved.</p> <p>Results</p> <p>Site-specific mutagenesis of <it>H. polymorpha XYL1 </it>gene encoding xylose reductase was carried out to decrease affinity of this enzyme toward NADPH. The modified version of <it>XYL1 </it>gene under control of the strong constitutive <it>HpGAP </it>promoter was overexpressed on a <it>Δxyl1 </it>background. This resulted in significant increase in the K_Mfor NADPH in the mutated xylose reductase (K341 → R N343 → D), while K_Mfor NADH remained nearly unchanged. The recombinant <it>H. polymorpha </it>strain overexpressing the mutated enzyme together with native xylitol dehydrogenase and xylulokinase on <it>Δxyl1 </it>background was constructed. Xylose consumption, ethanol and xylitol production by the constructed strain were determined for high-temperature xylose fermentation at 48°C. A significant increase in ethanol productivity (up to 7.3 times) was shown in this recombinant strain as compared with the wild type strain. Moreover, the xylitol production by the recombinant strain was reduced considerably to 0.9 mg × (L × h)^-1as compared to 4.2 mg × (L × h)^-1for the wild type strain.</p> <p>Conclusion</p> <p>Recombinant strains of <it>H. polymorpha </it>engineered for improved xylose utilization are described in the present work. These strains show a significant increase in ethanol productivity with simultaneous reduction in the production of xylitol during high-temperature xylose fermentation.</p

Morphological and Functional Individual Development of Primary School Children.

У статті визначено морфологічні й функціональні особливості організму дітей молодшого шкільного віку. Охарактеризовано вищу нервову діяльність та елементи поведінкових реакцій молодших школярів у соціумі. The morphological and functional features of primary school children’s organisms are analyzed in the article. The higher nervous activity is investigated the same as primary school children’s social behavior

Volitional Qualities Development of the Students of Cooperative College.

У статті досліджено розвиток вольових якостей студентів кооперативного коледжу. The article focuses on volitional qualities development of the students of cooperative college

ПАБЛІК РИЛЕЙШНЗ ЯК ІНСТРУМЕНТ ФОРМУВАННЯ РЕПУТАЦІЙНОГО КАПІТАЛУ ПІДПРИЄМСТВ СФЕРИ ТУРИЗМУ

Aim. The scientific research is devoted to the disclosure of the essence of "public relations", as one of the components of managerial technology in the tourism industry, as well as an important tool for the formation of their reputational capital. Methodology. The methodological basis of this scientific research is the work of foreign authors, available information of some government structures, as well as other sites. To solve the problems, a number of factors were considered which should be taken into account when introducing "public relations" into the activities of enterprises of the tourism sector, the volumes of tourist flows for 2013-2017 were analyzed and the results were summarized. The author believes that there is a need to build an updated structural model of the program "public relations" for tourism enterprises. Results. The author developed an updated structural model of the "public relations" program for tourism enterprises the introduction of which will in practice contribute to the formation of a higher level of their reputation capital and the individualization of relations with consumers. Scientific novelty. A special difference in the construction of programs "public relations" for enterprises in the sphere of tourism, in modern conditions of their functioning and development, the author considers it necessary to use an individual approach in determining the target audience, for which this program is designed. This need is due to the fact that key messages transmitted to specific target audiences in public relations programs may not be the same for all consumer audiences. Such programs should take into account not only the intentions and objectives of the tourist enterprise but also be balanced in accordance with the goals of the specific consumer audience to which the program is addressed. Practical significance. The implementation in practice of tourism enterprises offered by the author of the revised structural model program "Public Relations" will strengthen their reputational capital in the tourism market and will provide a higher level of individualization relationship with consumers and other interested audiences.Цель. Научное исследование посвящено раскрытию сущности «паблик рилейшнз», как одной из составляющей управленческих технологий в предприятиях сферы туризма, а также как важный инструмент формирования их репутационного капитала. Методика. Методическим основанием данного научного исследования есть труды зарубежных авторов, доступная информация некоторых правительственных структур, а также других сайтов. Для решения поставленных задач было проанализировано ряд факторов, которые стоит учитывать при внедрении «паблик рилейшнз» в деятельность предприятий сферы туризма, проанализировано объемы туристических потоков за 2013 - 2017годы, обобщено полученные результаты. Автор считает, что есть потребность в построении обновленной структурной модели программы «паблик рилейшнз» для предприятий сферы туризма. Результаты. В работе предложено разработанную автором обновленную структурную модель программы «паблик рилейшнз» для предприятий сферы туризма, внедрение которой в практическую деятельность будет содействовать формированию высшего уровня их репутационного капитала, а также индивидуализации отношений с потребителями. Научная новизна. Особенным отличием при построении программ «паблик рилейшнз» для предприятий сферы туризма, в современных условиях их функционирования и развития, автор считает необходимым использовать индивидуальный подход при определении целевой аудитории, на которую эта программа ориентирована. Такая потребность обусловлена тем, что ключевые сообщения, которые передаются конкретным целевым аудиториям в программах«паблик рилейшнз» не могут быть одинаковыми для всех аудиторий потребителей. Такие программы должны учитывать не только намерения и цели туристического предприятия, а также быть сбалансированным и соответственно целей конкретной аудитории потребителей, на которую ориентирована программа. Практическая значимость. Внедрение в практическую деятельность предприятий сферы туризма предложенной автором обновленной структурной модели программы «паблик рилейшнз» будет содействовать формированию их репутационного капитала на рынке туристических услуг, обеспечит высший уровень индивидуализации отношений с потребителями и другими заинтересованными аудиториями.Мета. Наукове дослідження присвячене розкриттю сутності «паблік рилейшнз» як однієї зі складових управлінських технологій у підприємствах сфери туризму, а також як важливого інструменту формування їх репутаційного капіталу. Методика. Методичною основою цього наукового дослідження є праці зарубіжних авторів, доступна інформація деяких урядових структур, а також інших інтернет-ресурсів. Для вирішення поставлених завдань було проаналізовано низку чинників, які варто враховувати при впровадженні «паблік рилейшнз» у діяльність підприємств сфери туризму, проаналізовано обсяги туристичних потоків за 2013 – 2017 роки та узагальнено отримані результати. Автор вважає, що є потреба у побудові оновленої структурної моделі програми«паблік рилейшнз» для підприємств сфери туризму. Результати. У роботі запропоновано розроблену автором оновлену структурну модель програми «паблік рилейшнз» для підприємств сфери туризму, впровадження якої у практичну діяльність сприятиме формуванню вищого рівня їх репутаційного капіталу та індивідуалізації відносин зі споживачами. Наукова новизна. Особливою відмінністю при побудові програм «паблік рилейшнз» для підприємств сфери туризму, в сучасних умовах їх функціонування та розвитку, автор вважає необхідним використовувати індивідуальний підхід при визначенні цільової аудиторії, на яку ця програма розрахована. Така потреба зумовлена тим, що визначальні повідомлення, які передаються конкретним цільовим аудиторіям у програмах «паблік рилейшнз» не можуть бути однаковими для всіх аудиторій споживачів. Такі програми повинні враховувати не лише наміри та цілі туристичного підприємства, а також бути збалансованими відповідно цілей конкретної аудиторії споживачів, якій зазначена програма адресована. Практична значимість. Упровадження у практичну діяльність підприємств сфери туризму запропонованої автором оновленої структурної моделі програми «паблік рилейшнз» сприятиме формуванню їх репутаційного капіталу на ринку туристичних послуг, забезпечить вищий рівень індивідуалізації відносин зі споживачами та іншими зацікавленими аудиторіями

Transcriptional activator Cat8 is involved in regulation of xylose alcoholic fermentation in the thermotolerant yeast Ogataea (Hansenula) polymorpha

Additional file 5. List of primers used in this study (restriction sites are underlined)

Isolation and characterization of mutated alcohol oxidases from the yeast Hansenula polymorpha with decreased affinity toward substrates and their use as selective elements of an amperometric biosensor

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Accurate, rapid, and economic on-line analysis of ethanol is very desirable. However, available biosensors achieve saturation at very low ethanol concentrations and thus demand the time and labour consuming procedure of sample dilution.</p> <p>Results</p> <p><it>Hansenula polymorpha </it>(<it>Pichia angusta</it>) mutant strains resistant to allyl alcohol in methanol medium were selected. Such strains possessed decreased affinity of alcohol oxidase (AOX) towards methanol: the K_Mvalues for AOX of wild type and mutant strains CA2 and CA4 are shown to be 0.62, 2.48 and 1.10 mM, respectively, whereas V_maxvalues are increased or remain unaffected. The mutant AOX alleles from <it>H. polymorpha </it>mutants CA2 and CA4 were isolated and sequenced. Several point mutations in the AOX gene, mostly different between the two mutant alleles, have been identified. Mutant AOX forms were isolated and purified, and some of their biochemical properties were studied. An amperometric biosensor based on the mutated form of AOX from the strain CA2 was constructed and revealed an extended linear response to the target analytes, ethanol and formaldehyde, as compared to the sensor based on the native AOX.</p> <p>Conclusion</p> <p>The described selection methodology opens up the possibility of isolating modified forms of AOX with further decreased affinity toward substrates without reduction of the maximal velocity of reaction. It can help in creation of improved ethanol biosensors with a prolonged linear response towards ethanol in real samples of wines, beers or fermentation liquids.</p