Value relevance of financial assets

A Work Project, presented as part of the requirements for the Award of a Masters Degree in Finance from the NOVA – School of Business and EconomicsThis study’s proposal is to examine for the Portuguese market, the value relevance of unrealized fair value gains and losses of financial assets, namely for financial instruments at fair value through profit and loss (which includes held-for-trading securities) and for available-for-sale financial assets. The objective is to obtain a perception of how well stock prices and returns reflect the fair value changes of these two financial assets. For a sample of Portuguese listed companies in a 2005-2007 period, no significant evidence is found regarding the value relevance of both cumulative and incremental unrealized fair value gains and losses associated to the two analyzed financial instruments. Several underlying factors for these results are presented, based on prior research

O efeito da sociosexualidade na relação entre as estratégias de resolução de conflito e a satisfação conjugal

Orientação: Jorge Pereira do Vale Lamela da SilvaA investigação tem demonstrado uma associação estrutural entre as estratégias de resolução de conflito conjugal e a satisfação conjugal (RCC). Não obstante, apesar da plausibilidade da potencial influência da sociosexualidade na associação entre estratégias de RCC e satisfação conjugal, esta hipótese nunca foi, contudo, estudada empiricamente. O presente estudo teve dois objetivos. O primeiro, foi testar as associações entre as estratégias de RCC destrutivas (estratégias de raiva, hostilidade e retraimento) e construtivas e satisfação conjugal. O segundo objetivo foi examinar o efeito moderador das atitudes sociosexuais na associação entre (a) estratégias construtivas de resolução conflito conjugal e a satisfação conjugal e (b) estratégias destrutivas de resolução conflito conjugal e a satisfação conjugal. A amostra foi constituída por 242 mulheres a residir em Portugal, com idades compreendidas entre os 20 e 51 anos de idade (M = 35.30; SD = 5.44), sendo a média de idade de filhos de 3.76 anos (SD = 3.38; variação 2 e 6 anos). Usando um design transversal, foi conduzido um inquérito online de recolha de dados, ao qual as participantes responderam a questões referentemente às variáveis em estudo. A priori à análise de dados, foram implementados procedimentos estatísticos de limpeza de dados para reduzir a possibilidade de respostas enviesadas ou inválidas metodologicamente. Os resultados demonstraram que as estratégias construtivas, estratégias de retraimento, de hostilidade e de raiva de RCC se mostraram preditoras significativas da satisfação conjugal. Relativamente ao potencial efeito moderador das atitudes sociosexuais entre as estratégias de RCC e a satisfação conjugal, verificou-se um efeito moderador das baixas atitudes sociosexuais entre as estratégias de resolução de conflito conjugal construtivas e a satisfação conjugal. A posteriori foram também discutidas as limitações e as implicações clínicas do presente estudo.Research has shown a structural association between marital conflict resolution strategies (RCC) and marital satisfaction. However, despite the plausibility of the potential influence of sociosexuality in the association between RCC strategies and marital satisfaction, this hypothesis has never been studied empirically. The present study had two objectives. The first one was to test the associations between the strategies of destructive RCC (strategies of anger, hostility and withdrawal) and constructive and marital satisfaction. The second objective was to examine the moderating effect of sociosexual attitudes in the association between (a) constructive strategies for solving the marital conflict and marital satisfaction and (b) destructive strategies for solving the marital conflict and marital satisfaction. The sample consisted of 242 women residing in Portugal, aged between 20 and 51 years (M = 35.30; SD = 5.44), with the mean age of children being 3.76 years (SD = 3.38; between 2 and 6 years). Using a cross-sectional design, an online data collection survey was conducted, to which participants answered questions related to the variables under study. A priori to the data analysis, statistical procedures of data cleaning were implemented to reduce the possibility of skewed or methodologically invalid answers. The results showed that the constructive strategies, withdrawal, hostility and anger RCC strategies proved to be a significant predictor of marital satisfaction. With regard to the potential moderating effect of sociosexual attitudes between RCC strategies and marital satisfaction, there was a moderating effect of low sociosexual attitudes between constructive conflict resolution strategies and marital satisfaction. A posteriori the limitations and clinical implications of the present study were also discussed

Estruturas 3D grafeno/matriz biológica estimuláveis mecanicamente para engenharia de tecido ósseo

Bone tissue engineering has gained a high relevance in the past few years due to the potential to generate functional tissue. In bone tissue regeneration, there are several options that can be adopted, being the autologous bone replacement the preferential clinical procedure. However, the use of autologous materials has a drawback that consists of the limited quantity available in the body. As alternatives, significant efforts have been dedicated to developing synthetic materials for the incorporation in the patients to restore the form and function of the injured bone. This work focus on the development of biomaterials for bone regeneration, which must possess relevant specific biological characteristics to be incorporated into the human body. They must mimic the function and structure of the bone extracellular matrix (ECM), in order to provide a three-dimensional (3D) environment capable of improving cellular adhesion, proliferation and differentiation, as well as presenting adequate biophysical and biochemical characteristics to induce and potentiate the bone tissue regeneration. Currently, biomaterials obtained from natural sources are promising options for application in tissue engineering due to their good biological performance. In this work, it was reported for the first time the self-assembly of graphene oxide (GO) nanosheets on the natural spongin skeleton by the layer-by layer (LbL) method. These improved mechanical and biological properties of the MS make it a very relevant candidate to explore as a template for the development of new biomimetic scaffolds with appropriate structural and biochemical cues for bone cells. Firstly, this work was dedicated to the MS purification regarding the removal of some anatomic constituents or contaminants. The chemical composition, structure and mechanical properties of MS were accessed, by FTIR, SEM and mechanical compression tests. The preparation of the bionanocomposites was performed by exploring the self-assembly of GO on the surface of MS using different positive polyelectrolytes (PDDA and PEI). The obtained results showed that the multilayer deposition PEI/GO gives rise to highly efficient surface functionalization of MS. These hybrids materials showed a high mechanical and thermal stability, which allows the preparation of two sets of samples, with reduced(rGO) and non-reduced GO, for the development of biological studies. The in vitro studies performed with osteoblasts under dynamic conditions revealed that the bionanocomposites prepared with GO showed an improved performance in terms of cell viability and mineralization. These results can be mainly attributed to the fact that GO presents more oxygen functional groups in its composition than the samples with rGO. These bionanocomposites were able to promote cell adhesion and proliferation, and more importantly guaranty their structural integrity of during the dynamic test.A engenharia de tecido ósseo ganhou grande relevância nos últimos anos devido ao potencial de gerar tecido funcional. Na regeneração do tecido ósseo, são várias as opções que podem ser adotadas, sendo a substituição óssea autóloga o procedimento clínico preferencial. No entanto, a limitada quantidade disponível de materiais autólogos no corpo, leva a que esta opção seja pouco utilizada. Como alternativas, tem havido esforços significativos no desenvolvimento de materiais sintéticos para incorporação nos pacientes, de modo a restaurar a forma e função do osso lesado. O foco deste trabalho foi o desenvolvimento de biomateriais para regeneração óssea, os quais devem possuir características biológicas específicas relevantes para que sejam incorporados no corpo humano. Estes devem mimetizar a estrutura e função da matriz extracelular (ECM) do osso, a fim de fornecer um ambiente tridimensional (3D) capaz de melhorar a adesão, proliferação e diferenciação celular, assim como possuir características biofísicas e bioquímicas adequadas para induzir e potencializar a regeneração do tecido ósseo. Atualmente, os biomateriais obtidos de fontes naturais são opções promissoras para aplicação em engenharia de tecidos devido ao seu bom desempenho biológico. Neste trabalho foi realizado pela primeira vez o self-assembly de óxido de grafeno (GO) numa matriz de espongina natural (MS) pelo método camada a camada (do inglês layer-by-layer (LbL)). As propriedades mecânicas e biológicas resultantes da modificação da MS tornam-na uma candidata muito relevante para explorar como um modelo no desenvolvimento de novos suportes biomiméticos com características estruturais e bioquímicas adequadas para células ósseas. Inicialmente, este trabalho foi dedicado à purificação da MS no que diz respeito à remoção de alguns constituintes anatómicos ou contaminantes. A composição química, estrutura e propriedades mecânicas da MS foram avaliadas por meio de testes de FTIR, SEM e compressão mecânica. A preparação dos bionanocompósitos foi realizada analisando o self-assembly do GO na superfície da MS utilizando diferentes polieletrólitos positivos (PDDA e PEI). Os resultados obtidos mostraram que a deposição de multicamadas GO / PEI dá origem a uma funcionalização superficial altamente eficiente da MS. Estes materiais híbridos apresentaram elevada estabilidade mecânica e térmica, o que permite a preparação de dois conjuntos de amostras com GO reduzido (rGO) e não reduzido, para o desenvolvimento de estudos biológicos. Os estudos in vitro realizados com osteoblastos em condições dinâmicas revelaram que os bionanocompósitos preparados com GO apresentaram melhor desempenho em termos de viabilidade e mineralização celular. Esses resultados podem ser atribuídos principalmente ao fato de o GO apresentar mais grupos funcionais contendo oxigénio na sua composição do que o rGO. Estes bionanocompósitos foram capazes de promover a adesão e proliferação celular e, mais importante, garantir a sua integridade estrutural durante o teste dinâmico.Mestrado em Materiais e Dispositivos Biomédico

Gellan microspheres application for capture or purification of plasmid DNA vaccine

Cervical cancer is the 4th cause of death among women worldwide and is profoundly associated with HPV infection, due to apoptosis inhibition and uncontrolled cell proliferation caused by oncoproteins E6 and E7 action. At the moment, some prophylactic vaccines are available in the market, but that are only capable of preventing HPV infection. Thus, the development of effective treatment for HPV-infected individuals is fundamental. DNA vaccines emerged as a promising way to prevent and treat several diseases since it can stimulate both cellular and humoral immune responses. The biotechnological process for obtaining plasmid DNA (pDNA) includes several steps, which present an environmental impact and makes it quite expensive to the pharmaceutical industry. Therefore, it is crucial to explore new alternatives. In this work, copper-crosslinked gellan microspheres were produced through a water-in-oil emulsion in order to capture pDNA directly from the Escherichia coli (E. coli) lysate seeking a reduction in the recovery and clarification-associated costs. The lowest diameter of gellan microspheres was achieved with 1.41 % of an aqueous gellan gum solution, previously heated at 90ºC, and dripped through a syringe to the oil solution formerly heated at 100 ºC with constant stirring of 750 rpm at a flow rate of 75 µL/min. Afterwards batch method optimization, the gellan microspheres captured 15.61 % of pDNA with 2.42 % of purity by a strategy based on immobilized metal affinity chromatography (IMAC), by manipulating the pH and ionic strength of binding and elution buffers. Another strategy was developed in order to increase the pDNA capture by precipitating the E. coli lysate with ammonium sulfate. The elimination of major impurities improved the recovery percentage to 32.41 % and the purity degree to 12.43 %. Moreover, copper-crosslinked gellan microspheres were functionalized with polyethylenimine (PEI), in order to increase the pDNA capture by increasing the functional groups in the microspheres surface. This allowed an improvement in the recovery percentage to 88.09 %, but the same did not happen to the purity percentage, 3.18 %. Thus, if the central aim is total pDNA capture from crude lysates without resorting to salts or organic solvents, the strategy in which the microspheres were functionalized with PEI showed great potential. On the other hand, if the main objective is to capture pDNA with higher purity, it is recommended to perform a prior step to the capture with ammonium sulfate, where copper-crosslinked microspheres may be applied or also the ones functionalized with PEI. In conclusion, these simple, fast and low-cost strategies allow lysate clarification since an E. coli lysate usually has 1.07 % of pDNA.O vírus do papiloma humano (HPV) é um vírus sexualmente transmissível e a persistência da sua infeção é considerada a maior causa para o desenvolvimento do cancro do colo do útero. Este potencial oncogénico do HPV está diretamente relacionado com a expressão das oncoproteínas E6 e E7, visto que estas têm a capacidade de interferir na desregulação do ciclo celular, indução da apoptose, entre outros fenómenos biológicos. O cancro do colo do útero corresponde à 4º maior causa de morte nas mulheres a nível mundial. No entanto, com as evoluções alcançadas ao nível científico tem sido possível melhorar e desenvolver novas terapias à base de DNA para tratar vários problemas de saúde como cancro e doenças genéticas. Sendo uma delas, as vacinas de DNA, uma vez que estas têm a capacidade de despoletar todos os tipos de imunidade desejada, através da resposta celular e resposta humoral, evitando a evolução da doença, o que é uma vantagem em relação às vacinas convencionais. Os vetores de DNA plasmídico (pDNA) codificantes de determinados antigénios têm sido muito explorados como vacinas de DNA, uma vez que apresentam baixa toxicidade e são mais simples de desenvolver. O processo biotecnológico de preparação do biofármaco de pDNA compreende etapas sequenciais de produção, clarificação e purificação com objetivo de obter a isoforma superenrolada (sc) com o grau de pureza recomendado pelas agências reguladoras, já que é considerada a conformação de pDNA biologicamente ativa. Contudo, este processo é bastante dispendioso para a indústria farmacêutica e apresenta um impacto ambiental acentuado, devido ao uso de elevadas quantidades de solventes orgânicos (isopropanol) e sais caotrópicos (sulfato de amónio e sulfato de sódio). Desta forma, é fundamental desenvolver novas estratégias de captura ou purificação do pDNA sc de modo a simplificar a amostra e evitar o uso de determinados reagentes, tornando o processo mais “green” e económico. A goma gelana é um exopolissacárido microbiano aniónico que tem a capacidade de, em determinadas condições (presença de catiões, concentração de polímero, temperatura), alterar a sua estrutura conformacional e formar uma rede tridimensional dando origem a um gel termorreversível com diferentes características estruturais e propriedades, consoante o objetivo desejado. A gelana apresenta diversas aplicações na indústria alimentar (espessante, gelificante), farmacêutica (formulações oftálmicas), cosmética (loções, cremes), biotecnológica (substituinte do agar), e devido, a características como a sua biocompatibilidade, hidrofilicidade, porosidade e versatilidade tem vindo a ser explorada nos últimos anos como matriz cromatográfica. Recentemente foi explorada e otimizada por desenho experimental a formulação de microsferas de gelana através do método de emulsão água-em-óleo e reforço com iões divalentes para capturar proteínas em função da sua carga ou afinidade. Assim, o objetivo central deste trabalho foi formular as microsferas de gelana e desenvolver uma estratégia de captura de pDNA sc a partir de um lisado bruto de Escherichia coli (E. coli) aplicando o método de batch. Para tal, a amostra de lisado foi obtida através de uma fermentação em E. coli, com posterior lise alcalina. As microesferas de gelana foram preparadas pelo método de emulsão água–em–óleo, reforçadas com alguns iões divalentes, cobre, níquel, zinco, cobalto, e algumas formulações foram posteriormente funcionalizadas com o polímero de polietilenoimina (PEI). O menor diâmetro das formulações foi obtido com 1.41 % de uma solução aquosa de gelana, previamente aquecida a 90 ºC que foi gotejada através de uma seringa para uma solução de óleo aquecida anteriormente a 100 ºC sob constante agitação de 750 rpm a uma velocidade de 75 µL/min. Ambas as formulações foram caracterizadas relativamente ao diâmetro médio (microscopia de semiótica), à morfologia (SEM), à carga global (potencial zeta) e à composição elementar (EDX e FTIR). Dos resultados obtidos quanto à morfologia, ambas as topologias de microesferas apresentam uma forma esférica e consistente. A estabilidade das duas formulações foi avaliada pela medição do diâmetro médio ao longo de vinte dias e ambas se apresentam estáveis ao longo do período em análise. Em relação ao diâmetro médio, as microesferas funcionalizadas com PEI apresentam um menor diâmetro que as microesferas reforçadas com cobre, o que pode ser devido à formação de uma ligação de coordenação entre o PEI e o cobre tornando a sua estrutura mais compacta. Esta ligação pode ter também um efeito na composição elementar pois, as microesferas reforçadas com cobre apresentam cerca de 9 % de cobre e as que foram funcionalizadas com PEI, apresentam 17 % de aminas e apenas 0.62 % de cobre. As microesferas reforçadas com cobre apresentam uma carga superficial de cerca de – 5 mV e as que que foram funcionalizadas com PEI, apresentam uma carga superficial de cerca de + 5 mV. As estratégias de captura desenvolvidas tiveram por base a interação entre os iões metálicos reticulados nas microesferas e o pDNA presente no lisado celular, uma vez que a carga negativa do polímero de gelana repele os ácidos nucleicos. Após inúmeros estudos de otimização, as melhores condições de ligação do pDNA sc às microesferas de gelana reticuladas com cobre foram obtidas a pH 5.0 e a eluição com 200 mM NaCl em 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0, permitindo assim recuperar 15.61 % de pDNA sc com 2.42 % de pureza. Adicionalmente, outra estratégia desenvolvida para melhorar a captura de pDNA consistiu na precipitação do lisado de E. coli com 2,5 M de sulfato de amónio. Ao eliminar a maior parte das impurezas (RNA e proteínas) a quantidade de pDNA sc capturado aumentou para 32.41 % com um grau de pureza de 12.43 %. Por fim, as microesferas de gelana foram funcionalizadas com PEI, com objetivo de melhorar a captura de pDNA, tendo em conta o aumento de grupos funcionalizados para interagirem com DNA na superfície das microesferas. Nas microsferas funcionalizadas com PEI, o passo de ligação foi realizado com um tampão de 10 mM MES a pH 5.0 e a eluição com 200 mM NaCl em 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 10.5. Nestas condições, foi possível a captura total do pDNA presente na amostra de lisado e uma recuperação/eluição 88.09 % de pDNA sc. Contudo, também ocorreu a retenção de grande parte do RNA da amostra que resultou num decréscimo do grau de pureza para 3.18 %. Assim sendo, se o objetivo principal for a captura total de pDNA de lisados brutos sem recorrer a sais ou solventes orgânicos, a estratégia que apresenta grande potencial é aquela em que as microesferas foram funcionalizadas com PEI. Por outro lado, se o objetivo principal for a captura de pDNA com um grau de pureza mais elevado, é recomendado realizar um passo prévio de tratamento com sulfato de amónio antes do passo de captura, sendo que neste se pode aplicar as microesferas reticuladas com cobre ou também as funcionalizadas com PEI. Concluindo, estas estratégias simples e de baixo custo permitiram a clarificação do lisado sem ser necessário recorrer a solventes orgânicos como o isopropanol, visto que o lisado de E. coli normalmente apresenta cerca de 1.07 % de pDN

Andando pela estrada da memória: uma abordagem de realidade virtual para suporte ao estudo do ajuste mnemónico para a contaminação

Biologically, humans have evolved to adapt against pathogens but, since fighting them can have negative implication to the body, a set of mechanisms have evolved towards avoiding contamination, called the Behavioral Immune System (BIS). To better understand the BIS, Experimental Psychology studies its impact by conducting experiments where a participant is exposed to several objects some of which are presented as having been in contact with a source of contamination (e.g., a sick person).To ensure the safety of the participants, these experiments typically rely on photographs of the objects and individuals and on background stories establishing the connection between both, which requires some imagination effort, from the participant, and affects the realism of the experiment. To move the research on BIS and memory into a potentially more ecologically-valid setting, the current work proposes a Virtual Reality (VR) based approach where 360º videos are used as stimuli, during the experiments. To this end, a set of tools were devised to support creating and cataloging videos, and to configure and control their presentation to the participant, in the virtual environment. At an early stage, a partial version of the platform served as grounds for a pilot study aiming to assess the overall adequateness of the proposal and validate acquisition parameters for the stimuli. The positive outcomes of this study informed the development of the complete Experiment Support System and, at its current stage, results from an evaluation with ten users show a good level of usability. Considering that the proposed system already supports the implementation of the designed experimental protocol, it establishes a promising ground for further evolving the research regarding the Mnemonic Tuning for Contamination.Biologicamente, os seres humanos evoluíram para se adaptarem contra os agentes patogénicos, mas, uma vez que combatê-los pode ter implicações negativas no corpo, um conjunto de mecanismos evoluiu para evitar a contaminação, chamado Sistema Imunológico Comportamental (BIS). Para melhor compreender o BIS, a Psicologia Experimental estuda o seu impacto através da realização de experiências em que um participante é exposto a vários objetos, alguns dos quais são apresentados como tendo estado em contacto com uma fonte de contaminação (por exemplo, uma pessoa doente). Para garantir a segurança dos participantes, estas experiências normalmente contam com fotografias dos objetos e indivíduos e em histórias de fundo que estabelecem a ligação entre ambos, o que requer algum esforço de imaginação, do participante, e afeta o realismo da experiência. Para mover a pesquisa sobre o BIS e a memória para um cenário potencialmente mais válido ecologicamente, o trabalho atual propõe uma abordagem baseada em Realidade Virtual (VR) onde vídeos de 360º são usados como estímulos, durante as experiências. Para tal, foi concebido um conjunto de ferramentas para apoiar a criação e catalogação de vídeos, e para configurar e controlar a sua apresentação ao participante, no ambiente virtual. Numa fase inicial, uma versão parcial da plataforma serviu de base a um estudo piloto com o objetivo de avaliar a adequação global da proposta e validar os parâmetros de aquisição para os estímulos. Os resultados positivos deste estudo informaram o desenvolvimento do sistema completo de suporte a experiências e, na sua fase atual, uma avaliação com dez utilizadores mostrou um bom nível de usabilidade. Tendo em conta que o sistema proposto já apoia a implementação do protocolo experimental concebido, estabelece um terreno promissor para uma maior evolução da investigação do ajuste mnemónico para a contaminação.Mestrado em Engenharia de Computadores e Telemátic

The born global phenomenon: the Portuguese case

A Work Project, presented as part of the requirements for the Award of a Masters Degree in Management from the NOVA – School of Business and EconomicsThe growing significance of companies that conduct international business at or near their funding has been critically challenging previous incremental models of international expansion. This thesis aims to cross-compare, by means of a multiple-case study, eight Portuguese start-ups among themselves and with the theoretical concept of born global firms versus traditional ones. This work project finds that: (1) active entrepreneurs with global vision from inception are essential for the implementation of international strategies; (2) only formal network plays a key role for successful internationalization and (3) inimitable sources of value creation, niche-focused strategies and unique intangible assets are also crucial

Detecção do Ag HLA-B27 por citometria de fluxo e PCR genoQuick

Mestrado em Biologia Molecular e CelularDescoberto na década de 70, o antígeno leucocitário humano (HLA) e a sua relação com as rejeições de órgãos e tecidos transplantados, desde cedo despertou interesse na comunidade científica. Estas moléculas extremamente variáveis, agrupam-se em três classes. As classes I e II têm afinidades estruturais e partilham funções da regulação do sistema imune. As proteínas, da classe III, assumem diferentes funções e não estão estruturalmente relacionadas entre si. O mecanismo de patogénese envolvendo as EAP do HLA-B27, permanece largamente desconhecido, apesar de se saber que a sua principal função imunológica é a de ligar peptídeos antigénios e apresentá-los aos linfócitos T. Porém novas hipóteses estão a ser equacionadas, designadamente a acção protectora que alguns subtipos alélicos parecem conferir aos seus portadores. Este trabalho foca o gene HLA-B27 enquanto fator envolvido em doenças auto-imunes, como as EAP. Entre estas, destaca-se a espondilite anquilosante, com uma prevalência deste antigénio de cerca de 90% em indivíduos caucasianos, sendo o sexo masculino cinco vezes mais afectado. A análise do gene HLA-B27 não é apenas relevante nos indivíduos sintomáticos, mas também em indivíduos assintomáticos aparentados com portadores da doença, que apresentem o fenótipo e risco acrescido de desenvolverem doença. A importância da detecção da molécula da classe I codificada pelo HLA-B27 o mais precocemente possível relaciona-se com a vantagem de iniciar a terapêutica adequada o mais breve possível. O objectivo geral deste trabalho é comparar a abordagem fenotípica correspondente à análise por citometria de fluxo (CF), com a abordagem genotípica correspondente à deteção por PCR com o kit GenoQuick, no estudo de alterações de expressão do gene HLA-B27 e avaliar o valor das duas abordagens no diagnóstico molecular das espondiloartropatias (EAP). Os resultados obtidos permitem concluir que o método baseado em PCR revelou maior sensibilidade, produzindo um maior número de casos positivos uma vez que a análise por PCR deteta sequências no DNA correspondentes às várias formas alélicas enquanto que a análise por citometria deteta os antigénios resultantes da expressão dos genes.Discovered in the 70s, the human leukocyte antigen (HLA) is involved in the rejection of transplanted organs and tissues and since then, it has drew the attention of the scientific community. These molecules are highly variable and can be divided in three classes. The classes I and II are structurally related and share common functions of regulation of the immune system. The class III proteins, have different functions and are not structurally related to each other. The mechanism of pathogenesis involving HLA-B27 in the spondyloarthropathies (SPA) remains largely unknown, although the role of HLA-B27 in connecting peptide antigens and presenting them to T lymphocytes is clearly demostrated. New functions, such as the protective action that some allelic subtypes seem to provide to their carriers, are being explored as newhypotheses. This work focuses on the gene HLA-B27 as a factor involved in autoimmune diseases, such as SPA from which ankylosing spondylitis emerges as a relevant pathology. The prevalence rate of this antigen in caucasian populations is approximately 90 %, being men approximately five times more affected than women. This analysis of HLA-B27 aleles or their expression product is not only relevant in symptomatic individuals, but also in asymptomatic individuals, and especially among the relatives of patients with the disease, because they represent an elevated risk of the disease. It is desirable that the detection of this class I molecule of is achieved at the most early stage possible and that an adequate therapy can be initiated. The objective of this work was to assess the value of the phenotypic analysis by Flow Cytometry (FC), with genotypic analysis by PCR with the kit GenoQuick, in the study of changes in expression of HLA-B27 and in the molecular diagnosis of (SPA). The results show that the genotypic approach based on PCR provides greater sensitivity, producing a larger number of of positive results because it detects sequences in the DNA corresponding to various allelic forms while the cytometric analysis detects the antigenic protein resulting from expression of genes

Avaliação dos efeitos ecológicos de filtros ultravioleta em ecosistemas lóticos portugueses

Organic UV-filters are chemicals present in several personal care products and on other materials (plastics, paints, etc) to protect against ultraviolet radiation. The use of these compounds has been increasing throughout the years and, consequently, they are now considered global emergent contaminants of the aquatic environment. In fact, UV-filters have been frequently found in river and lake waters but to date, only scarce information exists about their effects and it is mostly based in acute or chronic toxicity data for a limited number of species. Due to their physico-chemical properties, UV- filters accumulate in biota and sediments and are expected to co-occur together with other persistent contaminants. Moreover, and despite uncertainties about their specific mode of action, research has shown endocrine disruption caused by exposure to organic UV-filters in several species. Investigation on the ecological effects of organic UV-filters is urgent for a correct environmental risk assessment. For that, studies should be focused on ecotoxicological data from benthic organisms considering relevant endpoints and exposure scenarios including binary mixtures. This will allow to address potential long-term as well as community and ecosystem level effects of organic UV-filters. Thus, the purpose of this thesis was to evaluate the effects of UV-filters using an integrated approach combining sub-organismal, organismal, population and community level responses, aiming to produce comprehensive and sound ecotoxicological data for freshwaters. With that purpose four specific objectives were proposed: i) assess the effects of selected UV-filters (Benzophenone-3 (BP3); 3-(4-methylbenzylidene)camphor (4-MBC) and Octocrylene (OC)) on two aquatic species, the dipteran Chironomus riparius (a model organism widely used in ecotoxicological assays) and the trichopteran Sericostoma vittatum (an endemic species of Iberian peninsula), both aquatic detritivores with an important role in the streams and rivers; ii) assess the effects of binary mixtures of different UV-filters and UV- filters combined with an insect repellent, DEET (N,N-diethyl-3-methylbenzamide) in C. riparius reproductive traits ; iii) assess the long-term effects of BP3 exposure over two consecutive C. riparius generations and iv) assess the effects of 4-MBC in the structure of macroinvertebrates community and functioning of ecosystem using a mesocosms approach. Obtained results showed that selected UV-filters indeed caused deleterious effects on both insect species at environmental relevant concentrations with reductions in the growth, feeding and development rates. At the sub-organismal level, C. riparius and S. vittatum showed different patterns of response to UV-filters exposure and, despite evidences of metabolic costs related with detoxification, no evidences of oxidative stress or neurotoxicity were found. Additionally, results obtained in mixture exposures showed synergistic interactions for some C. riparius reproduction related traits for binary mixture of BP3 and 4-MBC as well as for mixture containing BP3 and DEET. These suggest that individual chemical testing can underestimate toxicity of organic UV-filters under natural conditions. Concerning C. riparius long-term multigenerational exposure to BP3, our results showed that C. riparius fertility is strongly reduced by BP3 exposure being the filial (F1) generation more sensitive than the parental (P) generation. Moreover, the F1 generation exposed under control conditions but whose parents were exposed to BP3 showed to be affected. All these results indicate carry-over effects, pointing out to possible epigenetic/transgenerational effects. Finally, community ecotoxicological experiments using artificial streams (mesocosms) showed no effects of 4-MBC on the structure of macroinvertebrate community nor on leaf litter decomposition. However, primary production was strongly reduced due to 4-MBC exposure. These results, although not in agreement with the previous laboratory assays performed with detritivore species, suggest potential bottom up indirect effects caused by the presence of organic UV-filters in sediments. In conclusion, the results obtained in this work suggest that UV-filters present risk to freshwater benthic invertebrate communities and reinforce the need of using complex and higher tier ecotoxicity studies to a better environmental risk assessment of these emergent contaminants.Os Filtros ultravioleta (filtros UV) são compostos químicos usados em vários produtos de higiene pessoal e materiais (plásticos, tintas, etc.) de modo a proteger contra danos causados pela radiação ultravioleta. O uso destes compostos tem vindo a aumentar nos últimos anos sendo já considerados contaminantes emergentes dos ecossistemas aquáticos. De facto, estes compostos têm vindo a ser detetados em lagos e rios, mas até à data pouca informação existe sobre os seus efeitos nos ecossistemas aquáticos, sendo que os estudos existentes se centram em ensaios laboratoriais e num reduzido número de espécies. Contudo, devido às suas propriedades físico-químicas é esperado que os filtros UV acumulem nos sedimentos e nos organismos e coocorram com outros contaminantes. No entanto, embora o modo de ação dos filtros UV não seja totalmente conhecido, estudos prévios têm mostrado disrupção endócrina causada pela exposição a estes contaminantes em organismos aquáticos. Posto isto, uma avaliação dos efeitos ecotoxicológicos dos filtros UV é urgente para uma correta avaliação do risco ambiental. Assim, os estudos ecotoxicológicos devem-se focar em organismos bentónicos considerando parâmetros e cenários de exposição relevantes, o que nos permitirá determinar potenciais efeitos a longo prazo assim como efeitos ao nível das comunidades dos ecossistemas. Este trabalho propôs avaliar e perceber quais os efeitos dos filtros UV em organismos e comunidades de água doce usando uma abordagem baseada em diferentes níveis de organização biológica e tendo como intuito gerar dados ecotoxicológicos robustos e mais abrangentes. Para tal, foram estabelecidos vários objetivos específicos: 1) avaliar os efeitos de diferentes filtros UV (Benzofenona-3 (BP3); 3-(4-methylbenzylidene)camphor (4-MBC) e Octocrileno (OC)) usando duas espécies de invertebrados aquáticos detritívoros, o díptero Chironomus riparius (uma espécie modelo amplamente utilizada em ensaios ecotoxicológicos) e o tricóptero Sericostoma vittatum (uma espécie endémica da Península Ibérica), ambos com grande importância nos ecossistemas lóticos portugueses; 2) avaliar os efeitos de misturas de diferentes filtros UV, e de filtros UV juntamente com um repelente de insetos (N,N-diethyl-3-methylbenzamide -DEET) em parâmetros relacionados com a reprodução de C. riparius; 3) avaliar os efeitos multigeracionais decorrentes de exposição a BP3 em C. riparius; 4) usando sistemas de rios artificiais avaliar os efeitos do 4-MBC na estrutura e funcionamento dos ecossistemas. Os resultados obtidos mostraram que, de facto, os filtros UV selecionados causaram efeitos tóxicos em ambas as espécies usadas a concentrações ambientalmente relevantes, observando-se reduções ao nível do crescimento e das taxas alimentares assim como atrasos no desenvolvimento. Ao nível subcelular C. riparius e S. vittatum mostraram diferentes padrões de resposta à exposição aos filtros UV e apesar de se observarem custos metabólicos relacionados com os processos de destoxificação, não se observaram efeitos em termos de stress oxidativo nem neurotoxicidade. Adicionalmente, os resultados obtidos na exposição às misturas entre químicos revelaram interações sinergísticas para alguns parâmetros reprodutivos de C. riparius para as ambas as misturas testadas (BP3 – 4-MBC; BP3 - DEET). Estes resultados sugerem que exposições individuais aos filtros UV podem subestimar a toxicidade destes contaminantes em condições naturais. Nos ensaios multigeracionais observou-se também uma forte redução na fertilidade de C. riparius expostos a BP3. Observou-se ainda que a segunda geração foi mais afetada que a geração parental mesmo se mantida em condições controlo, mas cujos pais tinham sido previamente expostos a BP3. Todos estes resultados indicam que a BP3 provoca efeitos latentes na geração parental que são posteriormente observados nos descendentes, apontando assim para efeitos epigenéticos/transgeracionais. Por último, nos ensaios dos mesocosmos, não foram observados efeitos do 4-MBC na estrutura das comunidades de macroinvertebrados nem na degradação da matéria orgânica, em contraste com o forte efeito observado na produção primária. Estes resultados, embora não concordando com os resultados obtidos em ensaios laboratoriais sugerem potenciais efeitos indiretos da presença dos filtros UV nos sedimentos. Em conclusão, os resultados obtidos nesta tese indicam que os filtros UV apresentam risco para os organismos bentónicos e reforçam a necessidade de utilizar abordagens integradas com maior relevância ecológica para uma melhor avaliação do risco ambiental destes contaminantes emergentes.Programa Doutoral em Biologi

Fatal haemorrhage from a lower limb varicose vein rupture: two case reports

The version of record of this article, first published in Egyptian Journal of Forensic Sciences, is available online at Publisher’s website https://ejfs.springeropen.com/articles/10.1186/s41935-022-00285-3Background: Chronic venous disease is one of the most prevalent pathologies today. In Portugal, as in other western countries, its prevalence is high, affecting around 35% of the adult population. It is a chronic and progressive condition that, despite generally benign, may course with major complications, like severe bleeding. Case presentation: We present the cases of a 47-year-old man and of an 82-year-old woman, with chronic venous disease and obesity, whose deaths occurred from lower limb varicose vein rupture. The gathered circumstantial information, the presence of large amounts of blood on the bodies’ surfaces and clothes, and malleolus ulcers agree with the fatalities reported in scientific literature. Conclusions : These cases are peculiar, both from a forensic pathology and from a clinical perspective. We want to raise awareness among the medical community about this major complication that is linked with a disease commonly perceived as benign, but that can result in a medical emergency. We also underline the importance of educating patients to this possible outcomeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio