El silenciamiento de la proteína priónica celular (PrPC) mediante RNA de interferencia (siRNA) reduce la infección por HSV-1 y HSV-2 en células SK-SY5Y

The transmissible spongiform encephalopathies (TSEs) are neurodegenerative and fatal diseases, affecting humans and some other animal species. The most accepted hypothesis suggests that the infectious agent, named “prion”, is composed mainly by the prion protein scrapie (PrPSc) and it corresponds to an abnormal conformation of a host encoded protein, the cellular prion protein (PrPC), which function is still unknown. However, the ubiquitous expression of PrPC and its highly conserved presence among different species suggests it has a very important role in cell functions. In this work, the PrPC in different cell types, including a primary fish cell culture (Oreochromis spp.), was detected. In addition, based on the human PrPC sequence, we designed a short interfering RNA (siRNA) to silence the PRNP gen in neuronal SK-SY5Y cells. The designed siRNA inhibited the PrPC expression along 96 hours posttransfection and the silenced cells were less susceptible to HSV-1 and HSV-2 infections, in comparison to non siRNA-transfected cells.Las encefalopatías espongiformes transmisibles (EETs) son enfermedades neurodegenerativas fatales que afectan a humanos y ciertas especies animales. La hipótesis más aceptada indica que el agente infeccioso, denotado como prion y compuesto principalmente por la Proteína Priónica Scrapie (PrPSc), corresponde a una conformación anormal de una proteína codificada por el huésped denominada Proteína Priónica Celular (PrPC), cuya función es aún desconocida; sin embargo, la expresión ubicua de PrPC así como su elevado grado de conservación entre especies, sugieren un papel importante para esta proteína. En este trabajo se detectó a la PrPC en diferentes tipos celulares incluyendo un cultivo primario de células de peces (Tilapia, Oreochromis spp.). Además, basándonos en la secuencia de la PrPC humana, se diseñó un RNA de interferencia (siRNA) con el fin de silenciar el gen PRNP en células neuronales SK-SY5Y. El siRNA diseñado inhibió la expresión de PrPC a lo largo de las 96 h post-transfección y las células silenciadas fueron menos susceptibles a la infección por HSV-1 y HSV-2, en comparación con células no transfectadas con el siRNA

Evaluación de harina de soya como fuente primaria en la producción de biomasa de Saccharomyces cerevisiae

Se formuló un medio de cultivo para crecimiento de Saccharomyces cerevisiae a partir de Harina de Soja como fuente principal en dos concentraciones (35 y 47.97 % de proteína bruta) y se reforzó los medios con sacarosa (C6H12O6), fosfato dibásico de Amonio (NH4)2HPO4, ácido fosfórico (H3PO4), Tiosulfato deSodio (Na2S2O3), agua (H2O) y ácido cítrico (C6H8O7) utilizado como buffer en diferentes concentraciones según fueron los requerimientos, bajo flujos de aireación constantes de 0.51 VVM. La evaluación de la producción de biomasa se realizó mediante la cinética de crecimiento con el modelo de Gompertz. El crecimiento en el medio de cultivo con 47.97% de proteína mostró superioridad al medio de cultivo con 35% de proteína; caracterizado por una mayor velocidad específica de crecimiento (μmáx) y menor tiempo de generación (TG) con valores de 0.86 h-1 y 0.80 horas, 0.81 h-1 y 0.86 horas respectivamente para cada medio de cultivo. Para la fase de adaptación (λ) y mayor crecimiento máximo (a) se obtuvieron: 0.97 horas y 1.60 para el medio con 45.97% de Proteína, así como 0.63 horas y 1.46 para el medio con 35% de proteína en la harina de soya respectivamente. La prueba de ANOVA demostró diferencias estadísticas (p< 0.05; IC 95 %), y la prueba de Tukey, demostraron diferencias significativas entre el medio con 35% y 47.97% de proteína