TOWARDS A COMBINATION THERAPY FOR SPINAL CORD INJURY: PRNA-3WJ NANOTHERAPEUTICS AND TRANSPLANTATION OF INDUCED-NEURAL STEM CELLS

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating pathology that has increased in prevalence over the last few decades. Despite improvements in modern medicine leading to a normal life expectancy, there are limited treatment options and still no fully restorative therapies. Several experimental therapies have been employed to ameliorate the hostile injured environment, amongst which stem cell transplantation is a standout. Neural stem cell (NSC) transplantation has shown promising results in promoting functional recovery in SCI models. However, major accessibility, ethical and immunocompatibility issues impede their clinical translation. These barriers can be overcome through the use of induced neural stem cells (iNSCs), obtained by direct reprogramming of autologous somatic cells, leading to the possibility of fully immunocompatible transplants. However, stem cell transplantations in pre-clinical models of SCI showed only limited CNS repair and protection, likely due to limited capacity of transplanted cells to robustly integrate in vivo. In this perspective, we envision that a combination of interventions aiming to first modulate the injured microenvironment will create a more hospitable context for the subsequent stem cell transplantation. Expression of Lipocalin 2 (Lcn2), a siderophore-binding protein implicated in modulation of inflammatory response in CNS diseases, is upregulated in reactive astrocytes that play a major role in inhibiting regeneration in SCI. We aim to ameliorate the deleterious injured environment through the downregulation of Lcn2 expression by delivering packaging RNA (pRNA) nanostructures to create a more amenable niche for improving the engraftment and differentiation of transplanted iNSCs. To achieve this, we first established a reproducible and reliable in vitro protocol for NPC- derived astrocyte differentiation, a more homogeneous population compared to primary astrocyte cultures, subsequently employed for safety and efficacy screening of pRNA nanostructures. NPC- derived astrocytes showed mature astrocytic phenotype after 15 days in vitro culture and gene expression changes upon activation, as observed in vivo. To silence Lcn2 expression we employed pRNA nanostructures, a bio-inspired construct and promising candidates amongst different nanotechnologies. Remarkably, pRNA transfection did not show any cytotoxicity on cultured astrocytes and we observed a specific and significant decrease in the expression of target mRNA upon pRNA transfection, i.e. reduction of classical hallmarks of activated astrocytes (GFAP and vimentin upregulation) here assayed as a proof of concept, and significant reduction in Lcn2 expression as a new therapeutic target. Finally, before combining pRNA transfection and iNSC transplantation in vivo, we first aimed to characterize and compare the therapeutic efficacy of transplanted iNSCs with the well-described NPCs in a murine contusion model of SCI. Preliminary data showed a similar survival rate after transplantation between iNSCs and NPCs and interestingly a similar trend in improvements of fine locomotor recovery 7 weeks after transplantation. Therefore, transplantation of fully immunocompatible iNSCs represents an innovative and promising therapeutic approach for SCI and in vitro results obtained from Lcn2 silencing showed encouraging results for a future promising combinatorial approach that aims at healing the injured environment and promoting functional recovery in SCI

Histo é arte: a didática na imagem

Discute o valor educacional presente nos artesanatos e nas ilustrações científicas que, conforme será argumentado no texto, se encaixam na definição de “arte”. O texto aborda a presença da didática nessas formas de arte, além de reconhecer a natureza intrinsecamente educativa de todas as vertentes artísticas, desde o primórdio da civilização até a galeria modernista. Será montado um panorama a fim de demonstrar o caráter didático nas manifestações culturais humanas, das mais banais às bienais. O trabalho conclui que as atividades humanas são infinitas, e que retemos — deliberadamente ou não — as características de quem nos precedeu e das culturas que nos cercam. Essa discussão é permeada ao longo do texto pela pintura, pelas microscopias histológicas e pelas artes têxteis, que são utilizadas como exemplo da forma com a qual expressamos nossa sabedoria de modo manual e didático, e como transmitimos esses conhecimentos adiante através de seus produtos

Viabilização do uso público de parques nacionais e a disponibilização por particulares de serviços de apoio à visitação

O presente trabalho consiste na análise da participação privada como instrumento de viabilização do uso público de parques nacionais. Na abordagem histórica dos parques nacionais, revelou-se sua vocação para o turismo ecológico e se expôs a inconsistência legislativa e institucional para tratar das unidades de conservação. Constatou-se que a edição da Lei n. 9.985, de 18 de julho de 2000 representou um avanço na sistematicidade da matéria. Sua tramitação legislativa revelou divergências entre as correntes ambientalistas e elevou o desenvolvimento sustentável como princípio que se espraia por todo o Sistema Nacional de Unidades de Conservação. Verificou-se que a Lei n. 9.985/2000 não logrou afastar as dificuldades institucionais e as carências financeiras e técnicas que envolvem a gestão das unidades de conservação. Apreciou-se o panorama dos parques nacionais para constatar que tampouco essa categoria encontrou êxito na sua implementação. Reparou-se que a educação ambiental, a recreação em contato com a natureza e o turismo ecológico, como objetivos imediatos do parque nacional, também figuram como fonte geradora de receitas para a unidade e para o sistema. Para concretizar essas finalidades, verificou-se ser imprescindível a disponibilização de uma infraestrutura mínima e de serviços de apoio à visitação. Para viabilizá-los, percebeu-se ser possível a participação privada, através da outorga de uso privativo de parcela do parque nacional, vinculado à execução de atividades que fomentem a visitação. Abordaram-se os títulos jurídicos que legitimam a presença de particulares no desempenho desses serviços. Abordaram-se os desafios que permeiam o procedimento prévio de seleção e a relação entre a Administração Pública e o particular. Ao final, apresentaram-se propostas para que a execução, pela iniciativa privada, de atividades de apoio ao turismo logre alcançar os objetivos específicos dos parques nacionais, bem como sua finalidade última de conservação da biodiversidade

Increasing Student Confidence in Writing: Integrating Authentic Manuscript Writing into an Online 8-Week Research Program

In various formats, students at the secondary and postsecondary levels participate in multiweek authentic science research projects. There have been many papers explaining the operations of such programs, but few have provided explicit instruction on how to incorporate authentic communication practices into the student research process. In this paper, we describe how we integrated primary literature into an 8-week online research program for 8th to 11th graders. Each week, students were introduced to a specific section of a primary research article reflecting different stages of their research project, and they were guided on how to write that specific section for their own research paper. By the end of the program, students had an outline or first draft of a primary research paper based on their research. Following completion of the program, student participants reported greater self-efficacy and confidence in scientific writing. Here, we describe our approach and provide an adaptable framework for integrating primary literature into research projects

Study of the volatile constituent retention in the drying of pineapple under modiefed atmosphere

Orientadores: Maria Aparecida Silva, Lauro Euclides Soares BarataDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia QuímicaResumo: Modificações da atmosfera ao redor do produto têm sido utilizadas para prolongar o armazenamento de frutas e vegetais frescos. Atualmente, esta técnica tem-se estendido também a processos de secagem, influenciando características sensoriais do produto desidratado. Durante a secagem de frutas, uma fração de compostos volúveis importantes para a composição do aroma é perdida durante a retirada da água. Para muitos produtos alimentícios, a presença de voláteis é um fator fundamental de qualidade. Com o objetivo de verificar a influência da atmosfera modificada na retenção de compostos voláteis, o presente trabalho analisa os experimentos de secagem de abacaxi (Smooth Cayenne) sob composição normal do ar e atmosfera modificada por etanol (0,5% v/v), variando temperatura e velocidade do ar, avaliando a variação da composição volátil durante o processo. Os experimentos de secagem foram conduzidos num túnel, feito com paredes de policarbonato e um sistema de aquisição para controle de dados, onde se pôde acompanhar continuamente o peso da amostra e controlar a temperatura do gás de secagem. Para quantificar a retenção dos voláteis, foi utilizada a metodologia de microextração por fase sólida acoplada a cromatógrafo gasoso com espectrômetro de massa (SPME-GC-MS). A modificação da atmosfera de secagem com vapor de etanol promoveu uma evaporação mais intensa da água, assim como uma maior retenção de compostos voláteis. A composição volátil mudou significativamente durante a secagem, não somente pela perda de alguns componentes, mas também pela produção de outrosAbstract: Modifications of the atmosphere surrounding the product have been used to prolong the storage of fresh fruits and vegetables. Currently, this technique has also been extended to drying processes, influencing sensorial characteristics of the dried product. During the drying of fruits, a fraction of the volatile compounds that are important for the aroma composition is lost during water removal. For many food products, the presence of volatile is a basic factor of quality. To verify the influence of the modified atmosphere on volatiles retention, the present work analyzed experiments of pineapple (Smooth Cayenne) drying under normal air composition and in atmosphere modified by ethanol (0.5% v/v), varying temperature and air velocity, evaluating the variation of the volatile composition of the product during the process. The drying experiments were carried out in a tunnel, with walls made of policarbonate and an acquisition system for data control, which could continuously monitor the weight of the sample and also control the temperature of the drying gas. To quantify the volatiles retention, a solid phase microextration methodology coupled to gas chromatography-mass spectrometry (SPME-GC-MS) was used. The modification of the drying atmosphere with ethanol vapour promoted more intense water evaporation as well as higher volatiles retention. The volatile composition was changed significantly during drying, not only due to the loss of some compounds, but also due to the production of othersMestradoEngenharia de ProcessosMestre em Engenharia Químic

Efeito de polietilenoglicol e polivinilpirrolidona na extração e hibridização de rRNA bacteriano de células expostas a taninos

In order to detect fluctuations in ruminal microbial populations due to forage tannins using 16S ribosomal RNA (rRNA) probes, recovery of intact rRNA is required. The objective of this work was to evaluate the effect of polyethylene glycol (PEG) and polyvinylpirrolidone (PVP) on extraction of bacterial rRNA, in the presence of tannins from tropical legume forages and other sources, that hybridize with oligonucleotide probes. Ruminococcus albus 8 cells were exposed to 8 g/L tannic acid or 1 g/L condensed tannins extracted from Acacia angustissima, banana (Musa sp.) skin, Desmodium ovalifolium, red grape (Vitis vinifera) skin and Inga edulis, or no tannins. Cells were rinsed with Tris buffer pH 7 containing either 8% PEG or 6% PVP prior to cell lysis. Total RNA samples rinsed with either PEG or PVP migrated through denaturing agarose gels. The 16S rRNA bands successfully hybridized with a R. albus species-specific oligonucleotide probe, regardless of tannin source. The effect of rinsing buffers on the density of 16S rRNA bands, as well as on the hybridization signals was compared. There were significant effects (P < 0.01) when the controls were compared to either buffer treatments due to tannin type, buffer used and the interaction of tannin type and buffer. The significant interaction indicates the influence of tannin type on the parameters evaluated.A recuperação de RNA ribossômico (rRNA) intacto é necessária para a detecção de flutuações na população microbiana ruminal decorrentes dos taninos de forrageiras, utilizando-se sondas para 16S rRNA. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de polietilenoglicol (PEG) e polivinilpirrolidona (PVP) na extração de rRNA bacteriano, em presença de taninos de leguminosas forrageiras tropicais e de outras fontes, que possa ser hibridizado com sondas de oligonucleotídeos. Culturas de Ruminococcus albus 8 foram expostas ou não a 8 g/L de ácido tânico ou a 1 g/L de taninos condensados, extraídos de Acacia angustissima, casca de banana (Musa sp.), Desmodium ovalifolium, cascas de uvas vermelhas (Vitis vinifera) e Inga edulis. As culturas foram lavadas com tampão Tris pH 7 contendo 8% PEG ou 6% PVP antes do rompimento das células. Amostras de RNA total lavadas com PEG ou PVP migraram em géis de agarose. Bandas de 16S rRNA hibridizaram com uma sonda de oligonucleotídeos espécie-específica para R. albus, independentemente da fonte de tanino. Comparou-se o efeito dos tampões de lavagem sobre a densidade das bandas de 16S rRNA, assim como sobre a intensidade de hibridização. Ocorreram efeitos significativos para fontes de taninos, tampões e para a interação entre taninos e tampões (P < 0.01). A interação significativa indica a influência do tipo de tanino nos parâmetros avaliados

Análise econômico-financeira dos maiores tomadores de financiamentos junto ao BNDES

Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)O estudo teve como propósito compreender o impacto do financiamento fornecido pelo BNDES nas empresas listadas na B3, ao mesmo tempo em que avaliava o retorno sobre o patrimônio líquido, o retorno operacional e o grau de alavancagem financeira dessas entidades, comparando-as com seus pares setoriais. Para atingir esse objetivo, foram conduzidas análises descritivas dos indicadores das empresas que receberam empréstimos, em contraposição às médias setoriais. Além disso, foram realizados testes de diferenças de médias (Wilcoxon) e de correlações entre as variáveis (Spearman). Os principais achados revelaram uma relação positiva e significativa entre o retorno sobre o patrimônio líquido (ROE), o giro, a margem e o grau de alavancagem financeira (GAF). Também foi observada uma associação positiva entre o múltiplo preço sobre o lucro (MTB) e o ROE, indicando que taxas mais elevadas de retorno sobre o patrimônio atraem investidores. Essa relação positiva foi igualmente observada entre o MTB e o GAF das empresas financiadas pelo BNDES, sugerindo uma valorização por parte dos investidores quando recursos são obtidos do banco público. Esses resultados contribuem para fortalecer o embasamento teórico para as decisões estratégicas da alta administração das organizações, ao mesmo tempo em que destacam o impacto do capital de terceiros na continuidade das operações. Adicionalmente, confirmam a eficácia das atividades do BNDES no contexto econômico, ressaltando sua importância para o desenvolvimento empresarial

A ponderação do fator ambiental na concessão : do planejamento da concessão à gestão do contrato

A presente tese consiste na análise da acomodação do fator ambiental nas concessões. A primeira parte do trabalho prende-se à apresentação da questão ambiental, com o percurso histórico à consolidação do desenvolvimento sustentável como premissa a permear as atividades econômicas. São expostas as características da ordem ambiental, com especial destaque para a incerteza e a tecnicidade que lhe são inerentes. À particularidade da questão ambiental corresponde a constituição de princípios próprios do direito do meio ambiente, descritos no capítulo primeiro. Não obstante o avanço doutrinário e legal, apresentam-se dados que revelam o resultado insatisfatório da proteção ambiental, especialmente considerado o contexto brasileiro. No segundo capítulo, explora-se o licenciamento ambiental, como principal instrumento da Política Nacional de Meio Ambiente. O licenciamento é apresentado sob a perspectiva procedimental, no curso do qual se identificam os impactos ambientais de uma atividade ou empreendimento e se indicam, preventivamente, as medidas para evitar, minimizar e compensar os impactos ambientais. A segunda parte do trabalho traz o instituto concessório. No terceiro capítulo, trata-se da concessão, com um breve escorço histórico, suas características e modalidades e a consolidação do seu objeto como uma colaboração entre o poder público e a iniciativa privada para o desenvolvimento de atividades de interesse público, que não se reportam necessariamente ao serviço público na sua acepção clássica. O quarto capítulo cuida da concessão sob a perspectiva procedimental, que compreende a fase de planejamento, a realização do concurso público para escolha do concessionário, a contratação e a gestão do contrato de concessão. Passa-se, então, à última parte do trabalho, que engloba a aproximação das duas temáticas: a questão ambiental e a concessão. A seção tem por parâmetro a pesquisa das concessões realizadas no âmbito da Administração Pública Federal brasileira. No quinto capítulo, apresenta-se a regulação como denominador comum das duas searas e a sustentabilidade das contratações públicas como ponto de interseção. Analisa-se a sustentabilidade ao redor da concessão e a sua promoção por meio do objeto mesmo da concessão. O último capítulo dedica-se à apreensão da questão ambiental no interior das concessões, com o diagnóstico da comunicação entre as duas temáticas. Apontam-se oportunidades de aprimoramento das interfaces entre a questão ambiental e a concessão, no sentido de melhorar a gestão do contrato de concessão e de, por meio da concessão, promover a sustentabilidade ambiental.The present thesis consists of the analysis of the accommodation of the environmental factor in the concessions. The first part of the work centers on presenting the environmental issue, with the historical path to the consolidation of sustainable development as a premise to permeate economic activities. This part also displays the characteristics of the environmental order, with particular emphasis on the uncertainty and technicality inherent to it. The particularity of the environmental issue relates to the constitution of principles specific to environmental law, presented in the first chapter. Despite the doctrinal and legal evolution, collected data reveals poor results of environmental protection, especially considering the Brazilian context. The second chapter explores environmental licensing, which is the most relevant instrument established in the Brazilian National Environment Policy, from a procedural perspective. It illustrates how licensing activity manages the environmental impacts of a given activity or enterprise, and set up the preventive measures to prevent, minimize, and compensate for environmental impacts. In the second part of the work, the concession is evaluated from different perspectives. It begins with the third chapter, which scrutinizes the concept of concession, with a brief historical foreshortening, its characteristics, and modalities. In addition, it explores the consolidation of concession as an object of collaboration between the public power and the private initiative for the development of activities of public interest, which are not reported necessarily to the public service in its classic sense. The fourth chapter reviews the concession from a procedural perspective, which contains the planning stage, the public tender for the choice of the concessionaire, the contracting and management of the concession contract. The final part of the study comprises an approximation of the two themes: the environmental issue and the concession. The section presents the outcome of a search for concessions made within the scope of the Brazilian Federal Public Administration. The fifth chapter unfolds how regulation has been the common denominator of the two fields and presents the sustainability of public contracts as an intersection point. Accordingly, sustainability is analyzed around the concession and its promotion through the object of the concession. The last chapter dedicates to apprehending the environmental issue within the concessions, diagnosing the communication between the two themes. The study identified opportunities to improve the interfaces between the environmental matter and the concession, to refine the management of the concession contract and, through the concession, promote environmental sustainability