Efectos de diferentes inmunomoduladores en la respuesta inmune a vacunas antiaftosa

La Fiebre Aftosa es la enfermedad viral del ganado que mayor impacto económicoocasiona en Argentina, no solo por los perjuicios directos sobre las especies afectadas, sinotambién por las perdidas indirectas debido al cierre de mercados de exportacion querepresentarían divisas para nuestro país. El principal elemento utilizado en la lucha contra esta enfermedad es la inmunizaciónpreventiva, pero la principal limitante de los inmunógenos en uso es la corta duracion deinmunidad que confieren. En este trabajo se utilizo el modelo murino para estudiar el efecto de tres adyuvantesdiferentes [avridine, extracto de pared celular de Mycobacteria (PCM) y lipopolisacárido de Brucella ovis(LPS)] en la respuesta a vacunas antiaftosa. Se examinó la duración deinmunidad conferida, el estado de protección viral 7 meses post-vacunación, las celulasinmunocompetentes estimuladas, involucradas en la respuesta secundaria de larga duracion ylos isotipos de IgG inducidos por los diferentes adyuvantes. La incorporación de avridine, LPS o PCM en vacunas convencionales indujo unarespuesta de anticuerpos neutralizantes especificos potente y duradera. Los índicesseroneutralizantes de animales vacunados con las nuevas formulaciones fueronsignificativamente mayores que los observados en animales inmunizados con vacunasconvencionales y confirieron proteccion por lo menos durante 7 meses. Los datos que surgen de los ensayos de reconstitución indican que losinmunomoduladores probados participan en la activación de las poblaciones celularesinvolucradas en la memoria de larga duracion, lo que resulta en una respuesta secundaria decélulas B eficiente aún en ausencia de celulas T, si bien es imprescindible la presencia delinfocitos T para la accion primaria de estos adyuvantes. Los linfocitos T se ven estimulados demanera tal que adquieren la capacidad de estimular a linfocitos B primados contra el antígenopara la producción de anticuerpos. Avridine, PCM y LPS estimulan la produccion de IgGl, 2a y 2b. lo cual se encontraríarelacionado con la proteccion conferida por las vacunas formuladas con estosinmunomoduladores. No se detectaron reacciones adversas salvo en el caso del uso de vehículo oleoso con LPS y PCM que produjo una sensibilización de las células esplenicas por la cual no fue posibleextraer células viables en estos caso 180 dias post-vacunación. Los efectos de avridine, LPS y PCM en la respuesta inmune a vacunas antiaftosaobservadas en el modelo murino indican la posibilidad de su inclusión en vacunas para serensayadas en bovinos.Fil: Berinstein, Analía. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Propiedades inmunológicas de proteínas de fusión derivadas del virus de la Fiebre Aftosa expresadas en la superficie de Baculovirus y células de insectos

En este trabajo se demuestra que es posible mejorar la inmunogenicidad de sitios antigénicos simples expresándolos sobre las membranas de células Sf9 o sobre la superficie de Baculovirus en ausencia de adyuvantes. Este hecho hace de este novedoso sistem a de presentación antigénica un método útil y seguro para el desarrollo de vacunas.El presente resumen pertenece a un trabajo financiado por la Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria y de la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica (PICT N9 08-03515).Academia Nacional de Agronomía y Veterinari

Propiedades inmunológicas de proteínas de fusión derivadas del virus de la Fiebre Aftosa expresadas en la superficie de Baculovirus y células de insectos

En este trabajo se demuestra que es posible mejorar la inmunogenicidad de sitios antigénicos simples expresándolos sobre las membranas de células Sf9 o sobre la superficie de Baculovirus en ausencia de adyuvantes. Este hecho hace de este novedoso sistem a de presentación antigénica un método útil y seguro para el desarrollo de vacunas.El presente resumen pertenece a un trabajo financiado por la Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria y de la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica (PICT N9 08-03515).Academia Nacional de Agronomía y Veterinari

Modulation of innate immunity in chickens induced by in vivo administration of baculovirus

Baculoviruses stimulate cytokine production in mammalian cells. They induce a strong innate immune response in animals and have adjuvant properties. The purpose of this work was to study the in vivo effect of baculovirus on chicken innate immune response. SPF chickens were inoculated intravenously with Autographa californica nuclear polyhedrosis virus (BV). Three hours later, chickens were bled, euthanized and their spleen, duodenum and cecal tonsils were excised in order to take samples for RNA extraction and real time PCR, and to isolate lymphocytes, which were stained and analyzed by flow cytometry. The results obtained showed that baculovirus inoculation up-regulates the expression ofIFNg, IL-6 and LITAF in spleen cells. This result (IFNg) correlated with that obtained by ELISA which showed a very strong increase of IFNg in chicken plasma. Flow cytometry analysis revealed that BV inoculation induced in spleen an increase in the percentage of monocyte/macrophage population together with an increase in CD3+CD4+T lymphocytes. On the other hand, BV inoculation decreased the percentage of CD3+CD4+T lymphocytes and increased the percentage of NK cells in cecal tonsils. However, intraepithelial lymphocytes of the gut did not show differences between BV and control treated animals. Even though further studies in order to understand the mechanisms by which BVs affect the avian immune response are needed, results obtained in the present work demonstrate the ability of BVs to stimulate the innate immunity in chickens, modifying the expression pattern of related genes and the profile of the immune cells involved.Fil: Chimeno Zoth, Silvina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Carballeda, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Gómez, Evangelina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Gravisaco, María José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Carrillo, Elisa Cristina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Berinstein, Analía. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Propiedades inmunológicas de proteínas de fusión derivadas del virus de la fiebre aftosa expresadas en la superficie de baculovirus y células de insectos

En este trabajo se demuestra que es posible mejorar la inmunogenicidad de sitios antigénicos simples expresándolos sobre las membranas de células Sf9 o sobre la superficie de Baculovirus en ausencia de adyuvantes. Este hecho hace de este novedoso sistem a de presentación antigénica un método útil y seguro para el desarrollo de vacunas.El presente resumen pertenece a un trabajo financiado por la Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria y de la Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica (PICT N9 08-03515).Academia Nacional de Agronomía y Veterinari

Development of diagnostic tools for IBDV detection using plants as bioreactors

Infectious bursal disease virus (IBDV) is the etiological agent of an immunosuppressive and highly contagious disease that affects young birds, thus causing important economic losses in the poultry industry. Multimeric particles with different architectures based on the capsid protein VP2 have been widely produced for different purposes. We hereby show the production and easy recovery of IBDV subviral particles (SVP) from transiently transformed Nicotiana benthamiana. The SVP, which were observed by electronic microscopy, proved to be antigenically and immunogenically similar to the virion. Indeed, anti-IBDV antibodies from samples of infected birds recognized these SVP and, when injected intramuscularly, these subviral particles also evoked a humoral immune response in chickens. We developed an in-house ELISA using SVP as coating reagent that demonstrated to be highly accurate and in good agreement with a commercial ELISA. This study demonstrates that the recombinant antigen generated and the technology used to produce it are suitable for developing a diagnostic tool against Infectious bursal disease.Fil: Gómez, Evangelina Raquel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Cassani, Maria Florencia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Lucero, María Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Parreño, Gladys Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Chimeno Zoth, Silvina Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Berinstein, Analía. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; Argentin

Recombinant vaccines and infectious bursal disease virus

Infectious Bursal Disease Virus (IBDV) is the etiological agent of Infectious Bursal Disease (IBD), an immunosuppressive and highly contagious disease that affects young birds causing important economic losses in the poultry industry worldwide. Currently, vaccination programmes with inactivated and live attenuated viruses have been used to prevent IBD. However, these vaccines present a number of disadvantages, mainly due to their viral nature. Consequently, in the last two decades, many studies have been conducted in order to replace conventional virus based vaccines by new, rationally designed vaccines that are safer as well as effective. In this review we will present a background on the disease and its causative agent, and focus on the development of new generation vaccines against this significant poultry disease.Fil: Lucero, María Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gómez, Evangelina Raquel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Carballeda, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gravisaco, María José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Chimeno Zoth, Silvina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Berinstein, Analía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentin

Enhanced IRES activity by the 3′UTR element determines the virulence of FMDV isolates

AbstractA reverse genetics approach was used to identify viral genetic determinants of the differential virulence displayed by two field foot-and-mouth disease virus (FMDV) strains (A/Arg/00 and A/Arg/01) isolated in Argentina during the 2000–2001 epidemics. A molecular clone of A/Arg/01 strain and viral chimeras containing the S-fragment or the internal ribosome entry site (IRES) of A/Arg/00 in the A/Arg/01 backbone were constructed and characterized. The IRES appeared as a determining factor of the lower level of A/Arg/00 replication in cell culture. High-throughput RNA probing revealed structural differences between both IRESs. Translation experiments using either synthetic viral RNAs (in vitro) or bicistronic plasmids (in vivo) showed that these IRESs' activities differ when the viral 3′ untranslated region (UTR) is present, suggesting that their function is differentially modulated by this region. This work provides experimental evidence supporting the role of the IRES-3′UTR modulation in determining the level of FMDV replication in field strains

La influencia de la comunicación en el uso de herramientas informáticas para la gestión en un programa del INTA

La Dirección Nacional Asistente de Planificación, Seguimiento y Evaluación del Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), a través de su Gerencia de Control y Planificación, propone la gestión de los instrumentos que integran la cartera de proyectos del organismo utilizando el tablero de comando. El tablero de comando, propuesto por Kaplan y Norton en 1992, es una herramienta que puede resultar muy útil en la implementación de la gestión por resultados (Kaplan & Norton, 1992). Sin embargo, una parte de los coordinadores de proyectos de la mencionada cartera no conoce en profundidad esta herramienta y no logra hacer un uso exhaustivo de ella. El tema elegido para desarrollar en el Trabajo Final de Especialización “Gestión Pública por Resultados” trata la influencia de la comunicación en el uso de herramientas informáticas para la gestión. Se intentó, entonces, relacionar la aceptación, el uso y el provecho del tablero de comando (herramienta informática) por los coordinadores y diferentes integrantes de proyectos de la cartera de INTA, con la capacitación (comunicación) sobre las bondades del mismo. Por medio de la encuesta, seleccionada como metodología a utilizar en este trabajo, se investigó el grado de conocimiento de los actores involucrados en los proyectos sobre la herramienta con la que debían gestionar los instrumentos. Los resultados obtenidos fueron variados acorde al grado de participación de cada actor en el programa seleccionado. Sin embargo, en todos los niveles se detectó la falta de comunicación sobre el valor de la gestión por resultados en general, encontrando incluso personal que desconocía el tema, y el uso del tablero de comando en particular. Del mismo modo, se evidenció la necesidad de una comunicación más fluida entre los participantes de los Programas y la Gerencia de Control y Planificación. En su conjunto, el análisis de los datos obtenidos permite proponer una etapa de capacitación para homogeneizar conocimientos y grado de uso del tablero de comando, y así intentar mejorar sustancialmente la gestión por resultados aplicada en los Programas Nacionales del INTA