Estudo dos mecanismos envolvidos nas respostas contráteis induzidas por agonistas B1 e B2 para as cininas em cólons de camundongos: influência da colite induzida por TNBS

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em FarmacologiaO presente estudo analisou através de técnicas farmacológicas alguns mecanismos envolvidos na resposta contrátil induzida pelas cininas em cólons normais ou com colite por TNBS. Foi constatado que a contração induzida pela BK e análogos é mediada por receptores do tipo B2 e não por receptores do tipo B1. Além disso, foi demonstrado que a resposta contrátil à BK é mediada pelo influxo de cálcio externo, ativação de canais de cálcio do tipo L e N, liberação neuronal de acetilcolina, pela participação de neuropeptídeos, prostanóides, leucotrienos e pelo TRPV1. Também foi demonstrado que o receptor B1 pode ser induzido in vitro após a montagem das preparações alcançando respostas contráteis máximas em 6-8 h. Também foi evidenciado que a colite promove aumento da resposta contrátil à BK e a des-Arg9-BK sugerindo a indução dos receptores B1 e B2. Essa hipótese foi confirmada através da realização do ensaio de união específica com os ligantes [3H]-BK ou [3H]-des-Arg10-calidina, os quais revelaram aumento na densidade de ambos os receptores sem, no entanto, causar alteração da afinidade desses receptores pelo agonista. Ademais, foi constatado que na colite ocorreu aumento da expressão do RNAm para os receptores das cininas. Confirmou-se também, pela utilização de animais com deleção gênica para os receptores B1 ou B2, que ambos são necessários para a indução do dano tecidual colônico. Por outro lado, foi verificada que a indução in vivo do receptor B1 é dependente de síntese protéica, PI3K?, NF-?B, TNFa e da participação da iNOS. Os estudos também indicam que a resposta contrátil induzida pela des-Arg9-BK envolve o influxo de cálcio externo, a ativação de canais de cálcio do tipo L, da degradação do ácido araquidônico bem como de seus metabólitos, de enzimas iNOS e eNOS e proteínas quinases PKA, PKC, PI3K? e MEK. Os resultados do presente trabalho contribuem para o melhor entendimento dos mecanismos envolvidos nas respostas contráteis mediadas pelos receptores B1 e B2, bem como o papel desses receptores na colite ulcerativa

A Spontaneous Mutation of the Rat Themis Gene Leads to Impaired Function of Regulatory T Cells Linked to Inflammatory Bowel Disease

Spontaneous or chemically induced germline mutations, which lead to Mendelian phenotypes, are powerful tools to discover new genes and their functions. Here, we report an autosomal recessive mutation that occurred spontaneously in a Brown-Norway (BN) rat colony and was identified as causing marked T cell lymphopenia. This mutation was stabilized in a new rat strain, named BNm for “BN mutated.” In BNm rats, we found that the T cell lymphopenia originated in the thymus, was intrinsic to CD4 T lymphocytes, and was associated with the development of an inflammatory bowel disease. Furthermore, we demonstrate that the suppressive activity of both peripheral and thymic CD4+ CD25bright regulatory T cells (Treg) is defective in BNm rats. Complementation of mutant animals with BN Treg decreases disease incidence and severity, thus suggesting that the impaired Treg function is involved in the development of inflammatory bowel disease in BNm rats. Moreover, the cytokine profile of effector CD4 T cells is skewed toward Th2 and Th17 phenotypes in BNm rats. Linkage analysis and genetic dissection of the CD4 T cell lymphopenia in rats issued from BNm×DA crosses allowed the localization of the mutation on chromosome 1, within a 1.5 megabase interval. Gene expression and sequencing studies identified a frameshift mutation caused by a four-nucleotide insertion in the Themis gene, leading to its disruption. This result is the first to link Themis to the suppressive function of Treg and to suggest that, in Themis-deficient animals, defect of this function is involved in intestinal inflammation. Thus, this study highlights the importance of Themis as a new target gene that could participate in the pathogenesis of immune diseases characterized by chronic inflammation resulting from a defect in the Treg compartment

Wir tanzen mit Bällen – Entwicklung und Förderung der Gestaltungskompetenz bei Schülerinnen und Schülern der Grundschule.

Kastrup V, Böer D. Wir tanzen mit Bällen – Entwicklung und Förderung der Gestaltungskompetenz bei Schülerinnen und Schülern der Grundschule. In: Roth A-C, Balz E, Frohn J, Neumann P, eds. Kompetenzorientiert Sport unterrichten – Grundlagen, Befunde, Beispiele. Forum Sportpädagogik. Vol 4. Aachen: Shaker Verlag; 2012: 173-183

Extrato da casca de Syzygium cumini no controle da glicemia e estresse oxidativo de ratos normais e diabéticos

O Syzygium cumini, também conhecido como Jambolão é amplamente utilizado na medicina popular para o tratamento da diabetes melito. Este estudo verificou a eficiência do extrato da casca de Syzygium cumini sobre os níveis glicêmicos e estresse oxidativo de ratos normais e diabéticos induzidos por aloxano. Os animais foram divididos em grupo controle (C), controle tratado (CT), diabético controle (DC) e diabético tratado (DT). A administração oral do extrato aquoso da casca de Jambolão, na dose de 1g/kg de peso vivo, por um período de trinta dias, não resultou em uma redução significativa na glicemia e nos níveis de hemoglobina glicosilada. Neste estudo, o tratamento com o extrato demonstrou um aumento dos níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS) no plasma dos ratos do grupo DT (P<0,05), comparado com o C. A atividade da catalase nos rins dos ratos do grupo DC diminuiu significativamente (P<0,01) e no fígado houve uma elevação significativa dessa enzima no grupo DC (P<0,01). Estes resultados indicam que o extrato da casca do Jambolão não possui efeito hipoglicemiante em ratos diabéticos induzidos pelo aloxano. O efeito antioxidante desta planta não foi suficiente para diminuir significativamente a produção de TBA-RS. A diminuição da atividade da catalase nos rins pode ser devida à exaustão ou inibição desta enzima e seu aumento, no fígado, devido ao estresse oxidativo, ocasionado pelo estado diabético

In vitro effects of L-arginine and guanidino compounds on NTPDase1 and 5'-nucleotidase activities from rat brain synaptosomes

Tissue accumulation of arginine (Arg), N-acetylarginine (NA), argininic acid (AA) and homoarginine (HA) occurs in hyperargininemia, an inborn error of the urea cycle. In the present study, we investigated the in vitro effects of Arg, NA, AA and HA on NTPDase1 and 5′-nucleotidase activities from synaptosomal cerebral cortex of rats. The results showed that Arg enhances NTPDase1 activity at the high concentrations tested (1.5 and 3.0 mM) for both the ATP and ADP nucleotides. Activation was also observed with other guanidino compounds tested: NA, AA and HA activated ATP and ADP hydrolysis in all experiments at the concentration of 25 μM. Besides this, NA and AA activated ATP hydrolysis at a lower concentration (1 μM). In another set of experiments, we verified the effect of Arg on purified apyrase at pH 8.0 and 6.5 and observed an increase in the enzyme activity at all Arg concentrations tested (0.01–3.0 mM). In contrast, Arg and the other guanidino compounds tested did not alter 5′-nucleotidase activity. These results suggest that changes in nucleotide hydrolysis may be involved in the brain dysfunction caused by hyperargininemia amongst other potential pathophysiological mechanisms involved in this condition