In vitro permissivity of bovine cells for wild-type and vaccinal myxoma virus strains

Myxoma virus (MYXV), a leporide-specific poxvirus, represents an attractive candidate for the generation of safe, non-replicative vaccine vector for non-host species. However, there is very little information concerning infection of non-laboratory animals species cells with MYXV. In this study, we investigated interactions between bovine cells and respectively a wild type strain (T1) and a vaccinal strain (SG33) of MYXV. We showed that bovine KOP-R, BT and MDBK cell lines do not support MYXV production. Electron microscopy observations of BT-infected cells revealed the low efficiency of viral entry and the production of defective virions. In addition, infection of bovine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) occurred at a very low level, even following non-specific activation, and was always abortive. We did not observe significant differences between the wild type strain and the vaccinal strain of MYXV, indicating that SG33 could be used for new bovine vaccination strategies

Les vecteurs viraux : outils modernes de vaccination

Les vaccins destinés aux animaux appartiennent à deux grandes catégories : les vaccins à agents vivants, et ceux à agents inertes. Depuis quelques années, dans chacune de ces catégories, les innovations technologiques ont considérablement amélioré et diversifié les stratégies vaccinales disponibles en fonction des contraintes liées à des préoccupations tant d’innocuité, que d’efficacité ou encore de nature économique. C’est dans ce cadre que l’INRA a depuis de nombreuses années orienté les efforts de recherche vers l’élaboration de nouveaux vaccins s’appuyant sur la mise au point de vecteurs viraux adaptés à diverses espèces animales et susceptibles de répondre aux exigences des filières animales. Dans cette revue, nous décrivons ainsi les principes d’obtention et le développement de vecteurs vaccinaux fondés sur l’emploi de poxvirus animaux à spectre d’hôte étroit (virus myxomateux), d’adenovirus humains ou animaux défectifs (c'est-à-dire ayant perdu toute capacité à se multiplier chez l’hôte) ainsi que de rhabdovirus de poissons modifiés par génétique inverse. Des exemples d’application de vaccination non seulement contre des maladies animales d’intérêt économique, mais aussi dans le cadre de modèles de pathologie comparée permettent d’illustrer le potentiel indiscutable de ces vecteurs viraux et d’envisager leur emploi pour le contrôle de maladies animales émergentes ou réémergentes en Europe

Teriflunomide treatment for multiple sclerosis modulates T cell mitochondrial respiration with affinity-dependent effects

International audienceInterference with immune cell proliferation represents a successful treatment strategy in T cell-mediated autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis and multiple sclerosis (MS). One prominent example is pharmacological inhibition of dihydroorotate dehydrogenase (DHODH), which mediates de novo pyrimidine synthesis in actively proliferating T and B lymphocytes. Within the TERIDYNAMIC clinical study, we observed that the DHODH inhibitor teriflunomide caused selective changes in T cell subset composition and T cell receptor repertoire diversity in patients with relapsing-remitting MS (RRMS). In a preclinical antigen-specific setup, DHODH inhibition preferentially suppressed the proliferation of high-affinity T cells. Mechanistically, DHODH inhibition interferes with oxidative phosphorylation (OXPHOS) and aerobic glycolysis in activated T cells via functional inhibition of complex III of the respiratory chain. The affinity-dependent effects of DHODH inhibition were closely linked to differences in T cell metabolism. High-affinity T cells preferentially use OXPHOS during early activation, which explains their increased susceptibility toward DHODH inhibition. In a mouse model of MS, DHODH inhibitory treatment resulted in preferential inhibition of high-affinity autoreactive T cell clones. Compared to T cells from healthy controls, T cells from patients with RRMS exhibited increased OXPHOS and glycolysis, which were reduced with teriflunomide treatment. Together, these data point to a mechanism of action where DHODH inhibition corrects metabolic disturbances in T cells, which primarily affects profoundly metabolically active high-affinity T cell clones. Hence, DHODH inhibition may promote recovery of an altered T cell receptor repertoire in autoimmunity

EVER Proteins, Key Elements of the Natural Anti-Human Papillomavirus Barrier, Are Regulated upon T-Cell Activation

Human papillomaviruses (HPV) cause a variety of mucosal and skin lesions ranging from benign proliferations to invasive carcinomas. The clinical manifestations of infection are determined by host-related factors that define the natural anti-HPV barrier. Key elements of this barrier are the EVER1 and EVER2 proteins, as deficiency in either one of the EVER proteins leads to Epidermodysplasia Verruciformis (EV), a genodermatosis associated with HPV-induced skin carcinoma. Although EVERs have been shown to regulate zinc homeostasis in keratinocytes, their expression and function in other cell types that may participate to the anti-HPV barrier remain to be investigated. In this work, we demonstrate that EVER genes are expressed in different tissues, and most notably in lymphocytes. Interestingly, in contrast to the skin, where EVER2 transcripts are hardly detectable, EVER genes are both abundantly expressed in murine and human T cells. Activation of CD4+ and CD8+ T cells via the TCR triggers a rapid and profound decrease in EVER expression, accompanied by an accumulation of free Zn2+ ions. Thus, EVER proteins may be involved in the regulation of cellular zinc homeostasis in lymphocytes. Consistent with this hypothesis, we show that the concentration of Zn2+ ions is elevated in lymphoblastoid cells or primary T cells from EVER2-deficient patients. Interestingly, we also show that Zn2+ excess blocks T-cell activation and proliferation. Therefore, EVER proteins appear as key components of the activation-dependent regulation of Zn2+ concentration in T cells. However, the impact of EVER-deficiency in T cells on EV pathogenesis remains to be elucidated

Interactions virus myxomateux-cellules hôtes : application à la vaccination chez les ruminant

Myxoma virus (MYXV) belongs to the Poxviridae family. These viruses are attractive tools for replicative or non replicative recombinant vaccines development in different species. Aiming at developing a vaccine against Bluetongue in ruminants, we first studied bovine and ovine cellular tropism of MYXV. We showed that MYXV can not replicate in ruminant cells attesting of the inocuity of such vaccines. Inoculation of recombinant MYXV in sheep was followed by humoral response against specific antigen. A vaccination/protection assay against Bluetongue using recombinant MYXV expressing BTV-2 antigens showed no efficient protection against a virulent challenge. These results promped us to investigate interactions between MYXV and ovine dendritic cells (DC), since these cells are one of the key of immunity. Results showed that Langerhans DC are the main target of MYXV. Infected DC cells become apoptotic at 16 h post-infection. However, the capacity of immune response induction by a cross-presentation mechanism is conceivable. Moreover, we developed a new strategy of vector design which consists in generating recombinant MYXV expressing a fusion between M022L gene, encoding for a structural protein of the virus membrane, and the transgene. We showed that this virus is dramatically attenuated for rabbits and induces specific humoral and cellular immune responses against the product of the transgene in rabbits and non host animal species.Les Poxviridae, dont fait partie le virus de la myxomatose (MYXV), sont des outils de choix pour la génération de vaccins recombinés réplicatifs ou non réplicatifs chez différentes espèces animales. Ayant pour but de développer un vaccin contre la Fièvre Catarrhale Ovine, ou Bluetongue (BT), chez les ruminants, nous avons étudié le tropisme cellulaire du vecteur myxomateux chez les bovins et chez les ovins. Les résultats obtenus montrent que le MYXV ne se réplique pas dans les cellules de ruminant et gagent en partie de l'innocuité de tels vaccins. L'inoculation d'ovins par un virus myxomateux recombiné a montré la mise en place d'une réponse humorale contre le produit d'un transgène témoin. Un essai de vaccination-protection contre le BTV avec des MYXV recombinés exprimant des antigènes du BTV montre que nous n'avons pas de protection efficace. Ces résultats nous ont conduit à étudier l'interaction entre les cellules dendritiques (DC) ovines, clés de l'immunité, et le MYXV. Parmi les DC, les cellules de Langerhans sont les cibles préférentielles du MYXV. Bien que les DC infectées deviennent apoptotiques après 16h d'infection, la capacité à induire une réponse immunitaire via un mécanisme de cross-présentation est envisageable. De plus nous avons développé une stratégie originale visant à utiliser la protéine structurale M022L du MYXV comme molécule présentatrice d'antigène pour améliorer ce vecteur. Les virus recombinés sont non pathogènes pour les lapins et capables d'induire une réponse immunitaire aussi bien humorale (inoculation de souris) que cellulaire (inoculation d'ovins) contre le produit du transgène fusionné à M022L chez des espèces non-cibles

Interactions virus myxomateux-cellules hôtes (application à la vaccination chez les ruminants)

TOULOUSE3-BU Sciences (315552104) / SudocSudocFranceF

Migration et pathogénicité des lymphocytes T CD8 dans les maladies du système nerveux central

Le rôle des lymphocytes T CD8 dans les pathologies infectieuses et inflammatoires du système nerveux central bénéficie d’une attention croissante. Ces cellules effectrices de l’immunité adaptative, cruciales pour le contrôle des infections neurotropes, peuvent toutefois être responsables de dommages tissulaires. Nous détaillerons dans cette revue les mécanismes moléculaires impliqués dans la migration de ces cellules vers le système nerveux central, ainsi que différentes situations pathologiques dans lesquelles leur rôle délétère a été mis en évidence. Nous suggèrerons enfin des stratégies thérapeutiques permettant de cibler cette population cellulaire