Evaluation of cytochrome P-450 concentration in Saccharomyces cerevisiae strains

Saccharomyces cerevisiae has been widely used in mutagenicity tests due to the presence of a cytochrome P-450 system, capable of metabolizing promutagens to active mutagens. There are a large number of S. cerevisiae strains with varying abilities to produce cytochrome P-450. However, strain selection and ideal cultivation conditions are not well defined. We compared cytochrome P-450 levels in four different S. cerevisiae strains and evaluated the cultivation conditions necessary to obtain the highest levels. The amount of cytochrome P-450 produced by each strain varied, as did the incubation time needed to reach the maximum level. The highest cytochrome P-450 concentrations were found in media containing fermentable sugars. The NCYC 240 strain produced the highest level of cytochrome P-450 when grown in the presence of 20 % (w/v) glucose. The addition of ethanol to the media also increased cytochrome P-450 synthesis in this strain. These results indicate cultivation conditions must be specific and well-established for the strain selected in order to assure high cytochrome P-450 levels and reliable mutagenicity results.Linhagens de Saccharomyces cerevisiae tem sido amplamente empregadas em testes de mutagenicidade devido à presença de um sistema citocromo P-450 capaz de metabolizar substâncias pró-mutagênicas à sua forma ativa. Devido à grande variedade de linhagens de S. cerevisiae com diferentes capacidades de produção de citocromo P-450, torna-se necessária a seleção de cepas, bem como a definição das condições ideais de cultivo. Neste trabalho, foram comparados os níveis de citocromo P-450 em quatro diferentes linhagens de S. cerevisiae e avaliadas as condições de cultivo necessárias para obtenção de altas concentrações deste sistema enzimático. O maior nível enzimático foi encontrado na linhagem NCYC 240 em presença de 20 % de glicose (p/v). A adição de etanol ao meio de cultura também produziu um aumento na síntese de citocromo P-450. Estes resultados indicam que as condições de cultivo devem ser específicas e bem definidas para a linhagem selecionada, garantindo assim elevados níveis de citocromo P-450 e, conseqüentemente, a confiabilidade nos testes de mutagenicidade.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq

Evaluation of cytochrome P-450 concentration in Saccharomyces cerevisiae strains

Saccharomyces cerevisiae has been widely used in mutagenicity tests due to the presence of a cytochrome P-450 system, capable of metabolizing promutagens to active mutagens. There are a large number of S. cerevisiae strains with varying abilities to produce cytochrome P-450. However, strain selection and ideal cultivation conditions are not well defined. We compared cytochrome P-450 levels in four different S. cerevisiae strains and evaluated the cultivation conditions necessary to obtain the highest levels. The amount of cytochrome P-450 produced by each strain varied, as did the incubation time needed to reach the maximum level. The highest cytochrome P-450 concentrations were found in media containing fermentable sugars. The NCYC 240 strain produced the highest level of cytochrome P-450 when grown in the presence of 20 % (w/v) glucose. The addition of ethanol to the media also increased cytochrome P-450 synthesis in this strain. These results indicate cultivation conditions must be specific and well-established for the strain selected in order to assure high cytochrome P-450 levels and reliable mutagenicity results.Linhagens de Saccharomyces cerevisiae tem sido amplamente empregadas em testes de mutagenicidade devido à presença de um sistema citocromo P-450 capaz de metabolizar substâncias pró-mutagênicas à sua forma ativa. Devido à grande variedade de linhagens de S. cerevisiae com diferentes capacidades de produção de citocromo P-450, torna-se necessária a seleção de cepas, bem como a definição das condições ideais de cultivo. Neste trabalho, foram comparados os níveis de citocromo P-450 em quatro diferentes linhagens de S. cerevisiae e avaliadas as condições de cultivo necessárias para obtenção de altas concentrações deste sistema enzimático. O maior nível enzimático foi encontrado na linhagem NCYC 240 em presença de 20 % de glicose (p/v). A adição de etanol ao meio de cultura também produziu um aumento na síntese de citocromo P-450. Estes resultados indicam que as condições de cultivo devem ser específicas e bem definidas para a linhagem selecionada, garantindo assim elevados níveis de citocromo P-450 e, conseqüentemente, a confiabilidade nos testes de mutagenicidade

Construir un puente al álgebra lineal en el entorno Cabri

Este artículo tiene como propósito dar a conocer algunos resultados de un trabajo de investigación que se viene desarrollando en el seno de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y Agrimensura (FaCENA), dependiente de la Universidad Nacional del Nordeste (UNNE), y que surge de la necesidad de dar respuesta a algunos interrogantes con relación a las serias dificultades que se perciben en los estudiantes de primer año, para el logro de la apropiación de los conceptos básicos del Álgebra Lineal. En particular, el estudio se centra en la exploración de los procesos mentales asociados a la utilización del entorno geométrico Cabri, para la iniciación de los estudiantes en el aprendizaje de esta rama de la Matemática, en comparación con el habitual acercamiento algebraico, centrado en la construcción de los conceptos de vector, combinación, dependencia, independencia, transformaciones lineales. Asimismo, intenta caracterizar al menos una vía de acceso que asegure la transición del modo de pensamiento sintético-geométrico, al modo analítico-aritmético y analítico-estructural, de los estudiantes

Secagem e higienizaçao do lodo de esgoto anaeróbio em leitos de secagem através da solarizaçao

Orientadora : Celina WisniewskiCo-orientador : Cleverson V. AndreoliDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias AgráriasResumo: Este trabalho teve por objetivo avaliar eficiência da solarização para higienização e desaguamento de lodo de esgoto anaeróbio, disposto em leitos de secagem. O aparato experimental foi instalado na estação de tratamento de esgotos Guaraituba, localizada no município de Colombo, Estado do Paraná - Brasil, segundo delineamento em blocos em acaso com três tratamentos e três repetições com duração de 60 dias. Os parâmetros monitorados foram: temperatura e umidade externa, temperatura na massa de lodo, contagem e viabilidade de ovos de helmintos e teor de sólidos em duas profundidades. A maior temperatura observada na massa de lodo para o bloco Testemunha foi de 36ºC (camada superior) e 34º (camada inferior). No tratamento Secagem + Solarização observou-se picos de 41,6ºC (camada superficial) e 37'C (camada profunda). Já o tratamento Solarização + Secagem alcançou 43,6ºC (camada superficial) e 3 l ,6ºC (camada profunda). As temperaturas mais elevadas foram observadas na camada superficial do perfil, em todos os tratamentos, quando o filme plástico estava em contato direto com o lodo, comprovando a capacidade de elevação da temperatura na massa de lodo através do efeito estufa, proporcionado pelo filme plástico transparente (solarização). A carga de sólidos utilizada foi de 34,5 kg.ST/m2 , alcançando ao final do experimento teores de sólidos de 36% (Secagem+ Solarização), 45% (Solarização+ Secagem) e 47% (Testemunha). A radiação solar, temperatura ambiente, precipitação e umidade relativa do ar apresentaram grande influência na concentração de sólidos do lodo, uma vez que foram observadas correlações significativas para estas variáveis. A quantidade de ovos de helmintos detectada no lodo reflete o perfil sanitário da população sendo o Ascaris (~80%) o gênero de helminto predominante. Verificou-se em todas as amostragens uma maior concentração dos ovos de helmintos na camada inferior (profunda) no perfil do lodo, apresentando aos 30 dias 67,35% dos ovos na camada inferior e 85,89% aos 60 dias. Concluiu-se que os tratamentos adotados para higienização e secagem do lodo de esgoto anaeróbio não obtiveram a eficiência idealizada para eliminação de ovos de helmintos nas condições climáticas da região metropolitana de Curitiba. Dentro dos tratamentos avaliados o menor índice de ovos de helrnintos verificado foi no lodo do tratamento secagem + solarização com 5,19 ovos/g de MS. Portanto, muito além dos 0,25 ovos/g de MS como preconiza a Instrução Normativa Paranaense. A maior porcentagem de inviabilização dos ovos de helmintos observada no tratamento em relação aos demais, está associada ao alcance de temperaturas mais elevadas, uma vez que a correlação de inviabilização dos ovos de helmintos tende a se relacionar com a temperatura no lodo. Mesmo não alcançando o nível para ovos de helmintos recomendado pela Instrução Normativa Paranaense para uso agrícola do lodo de esgoto, reduziu-se 31, 10% no. número de ovos viáveis, ou seja, aproximadamente 09 milhões de ovos em cada parcela.Abstract: This work had for objective evaluate the efficiency of the solar system for hygienic cleaning and draining of sludge of anaerobic sewer, made use in dry beds. The experimental apparatus was installed in the station of treatment of sewers in Guaraituba, located in the city of Colombo, State of the Paraná - Brazil, according to delineation block-type incidentally with three treatments and three repetitions with duration of 60 days. The monitored parameters had been: temperature and externai hurnidity, temperature in the sludge mass, counting and viability of helminthes egg and solid text in two depths. The biggest temperature observed in the mass of sludge for the block Witness was of 36ºC (superior layer) and 34º (inferior layer). ln the treatment Drying +Solar system observed peaks of 41.6ºC (superficial layer) and 37"C (deep layer). Already the Solar system treatment + Drying reached 43.6ºC (superficial layer) and 31.6ºC (deep layer). The raised temperatures had been observed in the superficial layer of the pro.file, in all the treatments, when the plastic film was in direct contact with the sludge, proving the capacity of rise of the temperature in the mass of sludge through the effect greenhouse, proportionate for the transparent plastic film (solar system). The load ofsolid used was of 34.5 kg.ST/m2, reaching in the end ofthe experiment solid texts of 36% (Drying + Solar system), 45% (Solar system + Drying) and 47% (Witness). The solar radiation, ambient temperature, precipitation and relative humidity of air had presented great influence in the solid concentration of the sludge, in as much as had been observed signifícant correlation between these variable. The amount of eggs of helminthes detected in the sludge reflects the profíle sanitary of the population, being the Ascaris (80%) the predominant sort of helminthes. A bigger concentration of eggs of helminthes in the inferior layer ( deep) in the profíle of the sludge was verifíed in ali the samplings, presenting at 30th day 67.35% of eggs in inferior layer and 85.89% at the 60th day. One concluded that the treatments adopted for hygienic cleaning and drying of the sludge of anaerobic sewer had not gotten the efficiency idealized for elimination of helminthes eggs in the climatic conditions of the region metropolitan of Curitiba. Inside of the evaluated treatments the lesser index of helminthes eggs verifíed was in the sludge of the treatment drying + solar system with 5.19 eggs/g of MS. Therefore, much beyond the 0.25 eggs/g of MS as it praises the Normative Instruction Paranaense. The biggest percentage of make impracticable of helminthes eggs observed in the treatment in relation to the other one, is associated with the reach of higher temperatures, a time that the correlation of make impracticable of helminthes eggs tends to relate with the temperature in the sludge. Exactly not reaching the levei for helminthes eggs recommended by the Normative Instruction Paranaense for agricultura! use of the sewer sludge, 31. l 0% in the viable egg number were diminished, that represents approximately 09 rnillion of egg in each pareei

Descontaminação de drogas vegetais empregando irradiação gama e óxido de etileno: aspectos microbianos e químicos

The sanitary quality of vegetal drugs, as well as the use of decontamination methods are important steps towards the consumer safety, mainly due to the fact that these products are usually used by sick and with weak immunocompromised persons. In Brazil, the RDC 48/ 2004 mention the contamination research as well as the efficacy of the decontaminated product. The purpose of this work is to evaluate the effects of ethylene oxide fumigation and gamma irradiation on the microbial burden and some chemical constituents of ginkgo and guarana. The initial microbial burden was 3,2x10(6), on average, for total aerobic microorganisms and 3,0x10(5) for fungi. Both methods proved to be effective in the microbial burden reduction. The analyses using high performance liquid chromatography revealed the absence of significant alterations in the flavonol glycosides and caffein contents, respectively for ginkgo and guarana.A avaliação da qualidade sanitária de drogas vegetais, bem como a utilização de métodos de descontaminação constituem importantes etapas no que se refere ao aspecto de segurança ao consumidor, principalmente pelo fato de serem usualmente consumidas por pessoas debilitadas, por vezes imunodeprimidas. No Brasil a RDC 48/2004 menciona a pesquisa de contaminantes microbiológicos bem como o estudo da eficácia dos agentes descontaminantes. Os objetivos do presente trabalho foram avaliar os efeitos da fumigação com óxido de etileno e da irradiação gama sobre a carga microbiana, bem como determinar alterações nos constituintes químicos em amostras de Ginkgo biloba e Paulinia cupana H.B.K. (guaraná). A carga microbiana inicial foi, em média, 3,2x10(6) para microrganismos aeróbicos totais e 3,0x10(5) para fungos. Ambos os métodos de descontaminação apresentaram-se eficazes na redução da carga microbiana. As análises por cromatografia líquida de alta eficiência revelaram ausência de alterações significativas nos teores de glicosídeos flavonoídicos e cafeína, respectivamente para ginkgo e guaraná

“Estar em drag é um manifesto”: a performance drag queen e o gênero como posição identitária

Essa pesquisa foi desenvolvida em uma casa de show noturna localizada na cidade de Porto Alegre/RS. Teve como objetivo analisar a dimensão identitária de gênero, articulada com as performances dos/as artistas drags que realizam apresentações nesse espaço. Inspirados nos recursos etnográficos, utilizamos a observação participante como caminho metodológico e o caderno de campo como principal instrumento. Partimos do referencial teórico dos Estudos de Gênero e utilizamos conceitos de Victor Turner e Pierre Bourdieu. Os resultados demonstraram que os modos de ser/estar drag visibilizam uma perfomance estética relacionada aos estilos de vida minoritários, reivindicando reconhecimento social para signos que redefinem os limites simbólicos de pertencimento de gênero, por meio da produção de um habitus drag e de um projeto de vida, relacionados às estratégias de sobrevivência em uma sociedade com normas compulsórias de gênero. E, também, que a emergência do Reality Show RuPaul Drag Race proporcionou, por um lado, uma maior aceitação das Drag Queens por um público que antes não as aceitava, mas, por outro, mudanças de posicionamento político com relação aos usos dessa estética, evidenciadas pela permanência dos preconceitos com os Travestis

Pathophysiological Role and Therapeutic Implications of Vitamin D in Autoimmunity: Focus on Chronic Autoimmune Diseases

Vitamin D is a pleiotropic secosteroid yielding multiple actions in human physiology. Besides the canonical regulatory activity on bone metabolism, several non-classical actions have been described and the ability of vitamin D to partake in the regulation of the immune system is particularly interesting, though far stronger and convincing evidence has been collected in in vitro as compared to in vivo studies. Whether vitamin D is able to regulate at physiological concentrations the human immune system remains unproven to date. Consequently, it is not established if vitamin D status is a factor involved in the pathogenesis of immune-mediated diseases and if cholecalciferol supplementation acts as an adjuvant for autoimmune diseases. The development of autoimmunity is a heterogeneous process, which may involve different organs and systems with a wide range of clinical implications. In the present paper, we reviewed the current evidences regarding vitamin D role in the pathogenesis and management of different autoimmune diseases

Foodborne Salmonellosis in Italy: Characterization of Salmonella enterica Serovar Typhimurium and Monophasic Variant 4,[5],12:i- Isolated from Salami and Human Patients.

Salmonella enterica serovar Typhimurium (STm) and its monophasic variant 4,[5],12:i:- (VMSTm) have been responsible for an increased number of foodborne infections in humans in Europe in recent years. The aim of this study was to investigate the origin of three foodborne salmonellosis outbreaks that occurred in Pavia Province (Lombardy region, northern Italy) in 2010. Phenotypic and genetic characteristics of the STm and VMSTm isolates from patients and from food that were recovered in the framework of the three outbreaks were evaluated through serotyping, phage typing, antimicrobial susceptibility testing, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), and multiple-locus variable-number tandem repeat analysis (MLVA). Salami from three artisan producers, which had all purchased meat from the same slaughterhouse, was the food source of infection in outbreak I. STm isolates were recovered from salami and patients with symptoms of gastroenteritis. These isolates had the same PFGE type and the same rare MLVA profile (3-18-9-NA-211). The same molecular profiles were found in an STm isolate from a salami, which likely was the source of another family outbreak (II). A VMSTm strain with common phenotypic and molecular profiles was isolated from three hospitalized patients and identified as the cause of another putative outbreak (III). During the following 3 years (2011 through 2013), 360 salami produced in Pavia Province were monitored for the presence of S. enterica . In 2011, no STm and VMSTm isolates were recovered from 159 salami tested. During 2012 and 2013, 13.9% of 201 tested salami harbored S. enterica , and half of the isolates were VMSTm, mainly in salami from those artisan producers involved in the previous outbreaks. These isolates were genetically variable, especially in terms of MLVA profiles. The data collected suggest that from 2012, VMSTm has replaced STm in the environments of the salami producers monitored in this study, and these data confirm the dominance of this emergent serovar along the pork supply chain