Carbon sources and polyethylene glycol on soybean somatic embryo conversion

A embriogênese somática é um eficiente método na produção de células-alvo para a transformação genética de soja. Entretanto, este método ainda apresenta baixas porcentagens de regeneração de plantas, o que pode estar relacionado ao processo de maturação e às altas anormalidades morfológicas dos embriões maturos. Este estudo visou a identificar um meio de maturação que pudesse contribuir com resultados mais eficientes de regeneração de plantas. Foram utilizados conjuntos embriogênicos derivados de cotilédones imaturos de sementes de soja das cultivares Bragg e IAS5 para o desenvolvimento de embriões. Testaram-se diferentes meios de maturação, com a utilização de 6% de maltose, 3% de sacarose ou 6% de sacarose, combinadas ou não com 25 g L-1 do regulador osmótico polietilenoglicol (PEG-8000). Os embriões histodiferenciados foram quantificados e classificados em tipos morfológicos. A porcentagem de embriões convertidos em plantas foi analisada. A cultivar Bragg apresentou maior quantidade de embriões maturos, mas foram obtidas menores porcentagens de conversão em comparação à cultivar IAS5. A adição de PEG não afetou o número de embriões convertidos em plantas. Entretanto, a concentração de 6% de sacarose aumentou significativamente a porcentagem de conversão.Somatic embryogenesis is an efficient method for the production of target cells for soybean genetic transformation. However, this method still offers low percentages of plant regeneration, and perhaps is related to the maturation process and high morphological abnormalities of the matured embryos. This study aimed to identify a maturation medium that could contribute to the outcome of more efficient plant regeneration results. Embryogenic clusters, derived from cotyledons of immature seeds of the soybean cultivars Bragg and IAS5, were used as starting material for embryos development. Different maturation media were tested by using 6% maltose, 3% sucrose or 6% sucrose, combined with or without 25 g L-1 of the osmotic regulator polyethylene glycol (PEG-8000). The histodifferentiated embryos were quantified and classified in morphological types. Percentages of converted embryos were analyzed. Cultivar Bragg resulted in higher matured embryo quantities, but lower percentages were obtained for the conversion in comparison to cultivar IAS5. While the addition of PEG did not affect the number of embryos converted into plants, 6% sucrose enhanced the conversion percent significantly

Two GCC boxes and AP2/ERF-domain transcription factor ORA59 in jasmonate/ethylene-mediated activation of the PDF1.2 promoter in Arabidopsis

Plant defense against microbial pathogens depends on the action of several endogenously produced hormones, including jasmonic acid (JA) and ethylene (ET). In defense against necrotrophic pathogens, the JA and ET signaling pathways synergize to activate a specific set of defense genes including PLANT DEFENSIN1.2 (PDF1.2). The APETALA2/Ethylene Response Factor (AP2/ERF)-domain transcription factor ORA59 acts as the integrator of the JA and ET signaling pathways and is the key regulator of JA- and ET-responsive PDF1.2 expression. The present study was aimed at the identification of elements in the PDF1.2 promoter conferring the synergistic response to JA/ET and interacting with ORA59. We show that the PDF1.2 promoter was activated synergistically by JA and the ET-releasing agent ethephon due to the activity of two GCC boxes. ORA59 bound in vitro to these GCC boxes and trans-activated the PDF1.2 promoter in transient assays via these two boxes. Using the chromatin immunoprecipitation technique we were able to show that ORA59 bound the PDF1.2 promoter in vivo. Finally, we show that a tetramer of a single GCC box conferred JA/ethephon-responsive expression, demonstrating that the JA and ET signaling pathways converge to a single type of GCC box. Therefore ORA59 and two functionally equivalent GCC box binding sites form the module that enables the PDF1.2 gene to respond synergistically to simultaneous activation of the JA and ET signaling pathways

Carbon sources and polyethylene glycol on soybean somatic embryo conversion Fontes de carbono e polietilenoglicol na conversão de embriões somáticos de soja

Somatic embryogenesis is an efficient method for the production of target cells for soybean genetic transformation. However, this method still offers low percentages of plant regeneration, and perhaps is related to the maturation process and high morphological abnormalities of the matured embryos. This study aimed to identify a maturation medium that could contribute to the outcome of more efficient plant regeneration results. Embryogenic clusters, derived from cotyledons of immature seeds of the soybean cultivars Bragg and IAS5, were used as starting material for embryos development. Different maturation media were tested by using 6% maltose, 3% sucrose or 6% sucrose, combined with or without 25 g L-1 of the osmotic regulator polyethylene glycol (PEG-8000). The histodifferentiated embryos were quantified and classified in morphological types. Percentages of converted embryos were analyzed. Cultivar Bragg resulted in higher matured embryo quantities, but lower percentages were obtained for the conversion in comparison to cultivar IAS5. While the addition of PEG did not affect the number of embryos converted into plants, 6% sucrose enhanced the conversion percent significantly.A embriogênese somática é um eficiente método na produção de células-alvo para a transformação genética de soja. Entretanto, este método ainda apresenta baixas porcentagens de regeneração de plantas, o que pode estar relacionado ao processo de maturação e às altas anormalidades morfológicas dos embriões maturos. Este estudo visou a identificar um meio de maturação que pudesse contribuir com resultados mais eficientes de regeneração de plantas. Foram utilizados conjuntos embriogênicos derivados de cotilédones imaturos de sementes de soja das cultivares Bragg e IAS5 para o desenvolvimento de embriões. Testaram-se diferentes meios de maturação, com a utilização de 6% de maltose, 3% de sacarose ou 6% de sacarose, combinadas ou não com 25 g L-1 do regulador osmótico polietilenoglicol (PEG-8000). Os embriões histodiferenciados foram quantificados e classificados em tipos morfológicos. A porcentagem de embriões convertidos em plantas foi analisada. A cultivar Bragg apresentou maior quantidade de embriões maturos, mas foram obtidas menores porcentagens de conversão em comparação à cultivar IAS5. A adição de PEG não afetou o número de embriões convertidos em plantas. Entretanto, a concentração de 6% de sacarose aumentou significativamente a porcentagem de conversão

Categorization of <i>B. napus</i> sequecences matching noncoding and organellar small RNAs.

*<p>Only 18–25 nt reads were considered. The small RNA were clustered according to their origin as follow: ribosome (rRNA); transporter (tRNA); small nuclear (snRNA); small nucleolar (snoRNA); mitochondrial (mtRNA) and chloroplastic (cpRNA).</p