Mercury transformations at the cell scale : a sulfate-reducing bacteria study

Le mercure est un polluant ubiquiste dont les espèces organiques, telles que le méthylmercure (MMHg), s'accumulent dans la chaîne trophique et sont fortement toxiques pour les organismes vivants. Des microorganismes anaérobies sont capables de transformer le mercure inorganique en MMHg, et inversement, par des processus qui n’ont pas été complètement établis. Cette étude vise à mieux comprendre les transformations du mercure chez des bactéries sulfato-réductrices modèles : D. dechloracetivorans BerOc1, capable de méthyler et déméthyler le mercure, et D. desulfuricans G200, utilisé ici comme témoin non méthylant. Les objectifs de cette étude sont donc de déterminer où ont lieu les processus de méthylation et déméthylation du mercure à l’échelle cellulaire ainsi que d’identifier les ligands du mercure impliqués dans ces processus. Dans un premier temps, la toxicité du mercure inorganique (IHg) et du MMHg a été évaluée sur la croissance des deux souches. Les potentiels de méthylation et de déméthylation, la localisation du mercure et ses ligands ont été déterminés au niveau de la culture et à l’échelle cellulaire. Ces paramètres ont été évalués à différentes concentrations de mercure ainsi qu’au cours d’une cinétique. Ce travail de thèse a mis en avant que IHg et MMHg ont moins d’impact sur la croissance des deux souches étudiées en sulfato-réduction du fait de la forte précipitation du mercure. Une ou des étapes limitantes interviendraient dans le processus de méthylation. De plus, une différence de localisation cellulaire du mercure a été constatée au cours du temps, suggérant un export de ce dernier, et selon la souche bactérienne suggérant des mécanismes cellulaires différents. L’imagerie par TEM EDX et l’analyse élémentaire par nano-fluorescence X ont permis d’observer la co-localisation du mercure avec le soufre. L‘étude de la spéciation par HR XANES a confirmé la prédominance de ligands thiols associés aux processus de méthylation et de déméthylation. Une forme tétragonale est prédominante dans les échantillons exposés à HgCl2 en croissance suggérant que cette espèce est formée via un processus biologique.Mercury is a wide spread pollutant that build up in living tissues. The transformation of mercury into methylmercury is primarily a natural and biological process mediated by anaerobic bacteria. Understanding the parameters influencing the formation of methylmercury is critically important due to its highly toxic, bioaccumulative and persistent nature. Herein we aim to study the mechanism by which model strains used in laboratories can transform inorganic and methylmercury. The objectives of this study are determining where mercury methylation and demethylation processes take place at the cell scale and identifying the mercury ligands involved in these processes. At first, the toxicity of inorganic mercury (IHg) and MMHg were measured on the bacterial growth. The methylation and demethylation potentials, the localization of mercury and its ligands were determined in the culture and at the cell scale. These parameters were evaluated at different concentrations of mercury as well as during kinetic. This study has highlighted that IHg and MMHg have less impact on the growth of both strains in sulfate reduction because of the high precipitation of mercury. One or more limiting steps would occur in the methylation process. In addition, a difference in cell localization of mercury has been observed over time, suggesting an export at 24h of exposure. Mercury localization also depends on the bacterial strain suggesting different cell mechanisms. TEM EDX imaging and elemental analysis by X-ray nano-fluorescence showed mercury co-localized with sulfur. The study of HR XANES speciation confirmed the predominance of thiol ligands associated with methylation and demethylation processes. A tetragonal form is predominant in samples exposed to growing HgCl2 suggesting that this species is formed via a biological process

Impacts à long-terme des éléments traces métalliques sur la biodiversité microbienne de sols amendés par des rejets de STEP: quels indicateurs de biodisponibilité et d’effets des contaminants ?

Impacts à long-terme des éléments traces métalliques sur la biodiversité microbienne de sols amendés par des rejets de STEP: quels indicateurs de biodisponibilité et d’effets des contaminants ?. VIIème colloque de l'Association Francophone d'Ecologie Microbienn

Impacts à long-terme des éléments traces métalliques sur la biodiversité microbienne de sols amendés par des rejets de STEP: quels indicateurs de biodisponibilité et d’effets des contaminants ?

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Relationship Between Hg Speciation and Hg Methylation/Demethylation Processes in the Sulfate-Reducing Bacterium Pseudodesulfovibrio hydrargyri: Evidences From HERFD-XANES and Nano-XRF

International audienceMicroorganisms are key players in the transformation of mercury into neurotoxic methylmercury (MeHg). Nevertheless, this mechanism and the opposite MeHg demethylation remain poorly understood. Here, we explored the impact of inorganic mercury (IHg) and MeHg concentrations from 0.05 to 50 µM on the production and degradation of MeHg in two sulfate-reducing bacteria, Pseudodesulfovibrio hydrargyri BerOc1 able to methylate and demethylate mercury and Desulfovibrio desulfuricans G200 only able to demethylate MeHg. MeHg produced by BerOc1 increased with increasing IHg concentration with a maximum attained for 5 µM, and suggested a saturation of the process. MeHg was mainly found in the supernatant suggesting its export from the cell. Hg L 3-edge High-Energy-Resolution-Fluorescence-Detected-X-ray-Absorption-Near-Edge-Structure spectroscopy (HERFD-XANES) identified MeHg produced by BerOc1 as MeHg-cysteine 2 form. A dominant tetracoordinated βHgS form was detected for BerOc1 exposed to the lowest IHg concentrations where methylation was detected. In contrast, at the highest exposure (50 µM) where Hg methylation was abolished, Hg species drastically changed suggesting a role of Hg speciation in the production of MeHg. The tetracoordinated βHgS was likely present as nano-particles as suggested by transmission electron microscopy combined to X-ray energy dispersive spectroscopy (TEM-X-EDS) and nano-X ray fluorescence (nano-XRF). When exposed to MeHg, the production of IHg, on the contrary, increased with the increase of MeHg Frontiers in Microbiology | www.frontiersin.org