Sıçanlarda sosyal izolasyonun oksidan stres ve eritrosit deformabilitesi üzerine etkileri

Amaç: Bu çalışmada amacımız, eritrositlerin biyokimyasal ve mekanik özelliklerinin dolaşımın etkinliğinin belirlenmesindeki önemini dikkate alarak, sosyal izolasyon uygulanan sıçanlarda oluşan oksidatif stresin eritrositlerin deformabilite özellikleri ve antioksidan sistem üzerine etkilerini incelemektir. Gereç ve Yöntemler: Çalışmada 40 adet Sprague Dawley sıçan, 2 aylık (genç) ve 12 aylık (erişkin) olmak üzere iki gruba ayrıldı. Daha sonra her gruptan 10'ar sıçan, 12/12 saat aydınlık/karanlık siklusunda, 21 gün boyunca tek başlarına ayrı kafeslere alınarak, sosyal izolasyon stresi yaratıldı. 21. gün sonunda alınan kan örneklerinde, eritrositlerde antioksidan enzimlerden SOD, CAT ve lipid peroksidasyonun bir göstergesi olarak MDA düzeyleri spektrofotometrik olarak ölçüldü. Plazma nitrik oksit değişiklikleri total nitrit-nitrat ölçümüne dayalı Griess yöntemi ile tayin edildi. Ayrıca hazırlanan eritrosit süspansiyonları %5 hematokrite ayarlanarak, filtrasyon yöntemi ile, relatif filtrasyon hızı (RFR), relatif filtrasyon zamanı (RFT) ve relatif direnç (Rrel) değerleri ölçüldü. Bulgular: SOD ve CAT düzeyleri hem genç hemde erişkin olan sosyal olarak izole edilmiş sıçanlarda istatistiksel açıdan anlamlı derecede düşük bulunmuştur. Sosyal izolasyon uygulanan sıçanlarda ,nitrik oksit düzeyleri de erişkinlerde daha belirgin olmak üzere hem genç hem de erişkinlerde daha düşüktür.Lipid peroksidasyon ürünü MDA düzeyleri de her iki grupta kontrollere göre azalmıştır.Eritrosit deformabilite indekslerinden RFR değerleri izole sıçanlarda önemli derecede yüksek bulunurken, RFT hem genç hem de erişkinlerde kontrollere göre düşük bulunmuştur.Ancak eritrositlerin Rrel değerlerinde önemli derecede bir değişiklik olmamıştır. Sonuç: Verilerimiz sosyal izolasyonun sıçanlarda plazma nitrik oksit düzeylerini azalttığı ve muhtemelen bu azalmayla bağlantılı olarak eritrosit membranında lipid peroksidasyonun da azaldığına işaret etmektedir. Ayrıca, sosyal izolasyon stresi antioksidan enzim aktivitelerini de değiştirmiş ve buda muhtemelen daha uzun süreli ve tekrarlanan yalnızlık durumlarında, özellikle yaşamın ilk dönemlerinde doku perfüzyonu problemlerine yol açabilecek deformabilite değişiklikleri ile sonuçlanabilecektir.Purpose: In this study, our purpose was to investigate effect of oxidative stress composing in isolated rats on erythrocyte deformability and antioxidant system, considering importance of mechanical, and biochemical properties of erythrocytes in efficiency of blood circulation Material and Methods: Fourty Sprague-Dawley rats were divided into two groups according to their ages; where one of them consisted of 2 months old rats and the other 12 months old rats. Then, randomly selected ten rats in each group were isolated separately in a cage and hold 12/12 hour light-dark cycle lasting 21 days. Blood samples were collected at the end of the 21st day, and superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) activities and malondialdehyde (MDA) levels were measured spectrophotometrically. Changes in plasma nitric oxide level were determined by Griess method depending on total nitrite-nitrate. In addition, relative filtration rate (RFR), relative filtration time (RFT) and relative resistance (Rrel) of the erythrocytes were calculated as the indexes of erythrocyte deformability. Results: The SOD and CAT levels were found significantly lower in both of young and adult isolated rats when compared to the young and adult control groups. The nitric oxide levels were also found significantly lower in the young and adult isolated rats when compared to their control groups. The peroxidation of the lipids were also decreased by social isolation, in the erythrocyte membrane of both young and adult isolated rats compared to the controls. The indexes of erythrocyte deformability, RFR was found significantly higher, whereas the RFT was significantly lower in young and adult isolated rats compared to the young and adult controls. However, the Rrel of the erythrocytes were not altered dramatically. Conclusion: As a consequence, our data reveals that the social isolation causes a lack of plasma nitric oxide levels in the socially isolated rats and probably due to this decrease in one of the major oxidants for the erythrocyte membrane results in the decreased lipid peroxidation. Furthermore, our results reveal that the social isolation stress causes alterations in the antioxidant defense system and these alteration results in the changes in erythrocyte deformability reflecting that some tissue perfusion problems can occur with long term and repeated loneliness and especially in the early stages of the life span

Sosyal İzolasyon Stresinin Gastrik Mukusun Bileşimi Üzerine Etkisi

Giriş ve Am a ç : Mide mukozasını örten mukus katmanı patojenik mikroorganizma veto ksinlerle bulaşık gıdalar içeren luminal içeriğe karşı bir bariyer o luşturur. Gastrik mukusmüsin adı verilen yüksek molekül ağırlıklı ka rb o n h id ratta n zengin g lik o p ro te in le r içerir.Gastrik müsinler MUC1, MUC5AC ve MUC6'yı içine alır. Bu çalışmanın amacı stresin gastrikmukus ile je l oluştu ra n bir musin olan MUC5AC içeriği üzerindeki olası etkisininbelirlenmesidir.M a te ry a l ve M e to d : Çalışmada Erciyes Üniversitesi Deneysel ve Klinik Araştırma MerkeziDEKAMj'nden sağlanan 20 adet Sprague Davvley erkek sıçanlar erişkin (10 aylık) kontrol veizolasyon g rubu olmak üzere ikiye ayrıldı. Kontrol grupla rın da k i sıçanlar kafeslere 5'erli: acak şekilde y e rle ş tirile re k DEKAM'daki d iğ e r sıçanların kafesleri ile aynı odadaoulunduruldu. Sosyal izolasyon stresi grubu ise 28 gün süreyle ayrı bir odada ve her biri ayrıKafeste barındırıldı. Çalışma sonunda derin anestezi altındaki sıçanlardan alınan mideörnekleri %10'luk fo rm a ld e h it ve karnoy solüsyonlarında te sp it edildi ve rutin histolojikşlem elerden g e ç irile re k bloklandı. Alınan kesitlere Alcian blue (pH :2 ,5 )-P e rio d ic Acid Schifft,High Iron Diamine - Alcian blue (pH:2,5) ve MUC5AC im munoreaktivitesini belirlemek içins tre p a v id in -b iotin -p e ro k s id a z yöntem i uygulandı. Preparatlar ışık mikroskobundad e ğ e rle n d irile re k fo to ğ ra fla n d ı.B u lg u la r: Kontrol g rubu sıçanların midelerinin kardiya bö lg e s in de yüzey epitelinin nötral vesülfomüsinleri kardiya bezlerinin ise sia lom üs inle ri içerdiği belirlendi. Fundusta yüzey ve'"oveola epitelinin çoğunlukla nötral müsinler olmak üzere sülfatlı müsinleri, bezlerin boyunKısımlarının ise az miktarda sialom üsinleri içerdiği g ö zlendi. Pilorusta ise yüzey ve foveolaepitelinin nötral müsinlerden daha zengin o ld u ğ u, ancak az miktarda sü lfom ü s in le ri ürettiği,bezlerin dip kısımlarının ise sialom üsinleri içerdiği te sp it e d ild i, izolasyon g ru bunda kardiyabölgesinden başlayarak pilorus bölgesine kadar yüzey ve foveola e p ite lin d e sülfalı müsin«çeriğinin arttığı belirle nd i. Kontrol g ru b u n d a midenin her üç bö lümü n d e yüzey ve foveolaeoitelinde gözlenen MUC5AC im mu n o rea k tiv ite s in in , izolasyon g ru bunda fundusbölgesinden başlayarak özellikle pilorus bölgesinde artmış olduğu b e lirle nd i. Pilorusbölgesinde luminal yüzeyde, yüzey ile foveola ep ite lin d e ve pilorus bezlerinde MUC5ACsekresyonunda artış te sp it edildi.T a rtışm a ve S o n u ç : Normal sıçan m idesinde MUC6'nın özellikle antral pilorus bezlerindere fundu su n müköz boyun hücreleri ile esas h ü c re le rin d e b u lunduğu b ild irild iğ i halde buçalışmada izolasyon g ru b u n d a MUC5AC im munoreaktivitesinin özellikle pilorusda artışgöstermesi ve g a s trik müsin içe riğ in de de sülfatlı müsinlerin artması midede mukozalbariyerin b ü tünlüğünün korunmasında MUC5AC'nin ve sülfom ü s in le rin etkin olduğunugöstermektedir.</p

Sosyal İzolasyon Stresinde Epiteliyal Bariyerin Korunmasında E-kaderinin Etkinliği

G iriş ve Am a ç : Kaderinler e riş k in le rde doku bütün lü ğ ü n d en ve gelişim sırasında çeşitliorganların morfo g e ne z is in d e n sorumlu hücre adezyon prote in le rid ir. Kaderin ailesinin üyelerifarklı yerle ş im le r g ö s terirler. E-kaderin epiteliyal doku lard a , N-kaderin nöronlarda, P kaderinplasentada bulunur. Güçlü bir tüm ö r baskılayıcı protein olan E-kaderinin fonksiyonu veyaek spresyonundaki azalma kanserin ilerlemesini veya metastazını kolaylaştırır. Bu çalışmadasosyal izolasyon s tresinde E-kaderinin modüle edilip e d ilm e d iğ inin belirlenmesiamaçlanmıştır.M a te ry a l ve M e to d : Çalışmada Erciyes Üniversitesi Deneysel ve Klinik A raştırm a Merkezi(DEKAM)'nden sağlanan 20 adet Sprague Dawley e rkek sıçanlar erişkin (10 aylık) kontrol veizolasyon grubu olmak üzere ikiye ayrıldı. Kontrol gru p la rınd a k i sıçanlar kafeslere 5'erliolacak şekilde y e rle ş tirile re k DEKAM'daki diğer sıçanların kafesleri ile aynı odadabulu nd u ru ld u . Sosyal izolasyon stresi g rubu ise 28 gün süreyle ayrı bir odada ve her biri ayrıkafeste b a rın d ırıld ı. Çalışma sonunda derin anestezi altındaki s ıçanlardan alınan mideörnekleri %10'luk fo rm a ld e h it ve karnoy solüsyonlarında te sp it edildi ve rutin histolojikişlemelerden g e ç irile re k bloklandı. E-kaderin im m u noreaktivitesini be lirlem ek için Pancadherinantikoru kullanılarak s tre p a v id in -b io tin -p e ro k s id a z yöntemi ile boyanan kesitler ışıkm ik roskobunda d e ğ e rle n d ir ile re k fo to ğ ra fla n d ı.B u lg u la r: Gerek kontrol ve gere k se izolasyon g rubu sıçanlarda midenin kardiya, fu n du s vepilorus b ö lg ele rin de yüzey e p itelinde, ayrıca fu n d u s bölgesinde foveola ep itelin d e ve fundusbezlerinin dip kısımlarında prinsipal hücreler arasında ve bu hücrelerle pariyetal hücrelerarasında, pilorusda da pilorus bez epitel hücreleri arasında E-kaderinin ekspre se olduğubelirlendi. Ancak izolasyon g ru bunda midenin kardiya bölgesinde e k sp resyonun azaldığı,fu n du s ve pilorus bölgesinde ise yüzey epitelin d e odaklar halinde E-kaderin ekspresyonununarttığı te sp it edildi.T a r tışm a ve S o n u ç : Bu çalışma hücre adezyon molekül ekspre s yo n u n u n s trese bağlıdeğişimini gös tere n ilk çalışma olup bu konuyla ilgili herhangi bir araştırmayarastlanmamıştır. Sosyal izolasyon g ru b u n d a midenin fu n du s ve pilorus b ö lg ele rin de Ekaderinek sp re s yo n u n u n a rtmış olması akut veya su b a kut s tres te E-kaderinin modüleolduğunu ve indüklenen olası ülserasyona karşı ga s trik mukozanın bütünlüğününkorunmasında önemli rol oynadığını g ö s te rm e k te d ir.</p