The Study on the Optical Properties of GaN Grown by HVPE

In this study, high quality bulk GaN crystals have been grown on sapphire substrates using the HVPE (hydride vapor phase epitaxy) technique. Ammonia, nitrogen, metallic gallium, hydrogen chloride were used as source materials. The effect of growth parameter such as HCl gas flow was investigated by PL (photoluminescence) and optical microscope. Surface quality of samples was clean. As a result of PL, GaN crystalline was improved in 10 sccm of HCl gas flow.Abstract i 1. 서론 1 2. 이론 6 2.1 GaN의 특성 6 2.2 결정성장 14 2.3. 결정특성측정 22 3. 본론 24 3.1 GaN 결정성장 24 3.2 GaN의 광학적 특성 33 4. 실험결과 및 고찰 39 5. 결론 50 참고문헌 5

The Effect of Synovial Fluid from Degenerated Facet on Hypertrophy and Ossification of the Ligamentum Flavum

Study Design In vitro experimental study Objectives To examine the effect of a synovial supernatant on the cell viability, osteogenic phenotype, mRNA expression of the types collagen and various transcriptional factors on osteogenesis in ligamentum flavum (LF) cells stimulated with synovial fluid from a degenerated facet joint. Literature Review In degenerative lumbar spinal stenosis, hypertrophied LF or osteoarthritic hypertrophy of a facet joint often causes neurogenic claudication. The facet joint is a synovial joint with hyaline cartilage on each side. Therefore, osteoarthritis of a facet joint eventually occurs with aging and other degenerative conditions of the spine. In lumbar spinal degeneration, inflammatory mediators or cytokines are released from the facet joint tissue, which consequently affects the adjacent LF because the LF covers posterolateral aspect of the spinal canal near facet joints. However, there are no reports on the relationship between a degenerated facet joint fluid and the LF in the lumbar spine. Materials and Methods LF surgical specimens were obtained from patients with a lumbar spine stenosis, and the cells were isolated by enzymatic digestion. Each of the synovium tissues were weighed and recorded. Each tissue was cut into small pieces with a pair of scissors and then washed 3 times with PBS. The washed tissue pieces were then cultured for 96 hr at 37℃, 5% CO2 in DMEM/F-12-0.1% FBS with a density of 200 mg/ml medium. The supernatant was collected after 96 hr. In order to measure quantitatively the proliferation of cells, the AlamarBlue assay was used. The total cellular RNA was extracted from the cells and amplification reactions specific to the following types of cDNA were performed: the osteogenic master transcription factors, Dlx5, Runx2, osterix, and types collagen and osteocalcin. Alkaline phosphatase staining for the biochemical assay and western blotting for osteocalcin protein expression were performed. Results Human LF cells cultured with the supernatant from the facet synovium showed a slightly stronger AlamarBlue staining than the intensity of the control culture. RT-PCR revealed the upregulation of the osteogenic master transcription factors, Dlx5, Runx2, and osterix in the synovium supernatant group from one hour to 72 hours, and an increase in osteocalcin, types collagen I, III, V, XI levels from one hour to one week. LF cells cultured with the supernatant from the facet synovium showed positive staining for alkaline phosphatase. The level of the osteocalcin protein in the LF cells cultured with the supernatant from the facet synovium was higher than the control group. Conclusions The supernatant of the facet joint from patients with degenerative spinal stenosis affects LF cells by increasing the level of cellular proliferation, upregulating the mRNA expression of osteocalcin, types of collagen, osteogenic transcription factors, positive alkaline phosphatase staining, and osteocalcin protein expression. Therefore, degenerated synovial fluid from the facet joint is an important mechanism of LF hypertrophy and ossification.ope

Phenotypical Stability and Matrix Synthesis of Human Intervertebral Disc Cells in Response to Dexamethasone and Transforming Growth Factor-β1

Study Design: An in vitro experiment. Objectives: To evaluate the mRNA expressions of matrix components, and analyze the cellular proliferation and proteoglycan synthesis of human intervertebral disc cells in response to dexamethasone and TGF-β1 Summary of Literature Review: Corticosteroids are responsible for the regulation of a diverse range of biological processes through modulation of the expression of target genes. The direct injection of methylprednisolone to the intervertebral disc (IVD) has been shown to cause degeneration and calcification of the disc in rabbits. Systemic administration of hydrocortisone induced degeneration of notochordal cells, which accelerated the aging process of the disc in mice. Transforming growth factor beta-1 (TGF-β1) is known as a potent agent for the proliferation, differentiation and matrix synthesis of IVD. Materials and Methods: IVD cells were isolated from ten patients, and subsequently cultured. Various doses of dexamethasone (DEX) and/or TGF-β1 were administered to the IVD cultures. DNA and proteoglycan syntheses were measured by the incorporation of [3H]-thymidine and [35S]-sulfate, respectively. RT-PCRs were performed for the expressions of aggrecan, collagen types I and II, and osteocalcin mRNA. Results: Cultures with DEX showed increased cellular proliferation and decreased proteoglycan synthesis (p<0.05). TGF-β1 potentiated the proliferative effect of DEX, but failed to stimulate proteoglycan synthesis in the cultures containing DEX. There were no recognizable changes in the mRNA expressions of aggrecan, collagen types I and II, and osteocalcin in response to DEX and TGF-β1. Conclusions: DEX demonstrated a proliferative effect on human IVD cells, with the combination of DEX and TGF-β1 showing potentiation of the proliferative effect, while at high doses(100 and 1000nM, the DEX was shown to down-regulate the proteoglycan synthesis. Caution should be exercised in the use of corticosteroid in the therapeutic approaches for the treatment of disc disease or in the regenerative matrix of the IVD.ope

Tissue Engineering of the Intervertebral Disc with Cultured Nucleus Pulposus Cells Using Atelocollagen Scaffold and Gene Therapy

STUDY DESIGN: This is an in-vitro experiment using rabbit intervertebral disc (IVD) cells and growth factors. OBJECTIVES: We wanted to determine the effect of types I, and II atelocollagen and growth factor gene therapy for matrix regeneration of rabbit IVD cells. SUMMARY OF THE LITERATURE REVIEW: Adenovirus-medicated growth factor gene therapy is efficient for matrix regeneration of the IVD. Atellocollagen has provided a favorable environment for matrix synthesis. However, a combined approach using gene and cell therapy in an atelocollagen scaffold has not yet been attempted. MATERIALS AND METHODS: Rabbit IVD cells were transduced with Ad/TGF-beta1 and Ad/BMP-2. The cells were then implanted to the atelocollagen scaffold. The [methyl-3H]thymidine incorporation for DNA synthesis and the [35S]sulfur incorporation for proteoglycan synthesis were measured. RT-PCR was performed for assessing the aggrecan, collagen type I, collagen type II and osteocalcin mRNA expressions. RESULTS: The rabbit IVD cells with Ad/TGF-beta1 and that were cultured in type I atelocollagen showed a 130% increase in new proteoglycan synthesis, while the rabbit IVD cells with Ad/TGF-beta1 and that were cultured in type II atelocollagen showed a 180% increase in new proteoglycan synthesis (p<0.05). The rabbit IVD cells with Ad/BMP-2 and that were cultured in type I atelocollagen showed a 70% increase in new proteoglycan synthesis, while the rabbit IVD cells with Ad/BMP-2 and that were cultured in type II atelocollagen showed a 95% increase (p<0.05). Rabbit IVD cells with Ad/TGF-beta1 and Ad/BMP-2 and that were cultured in type I and II atelocollagen demonstrated increased collagen type I and II mRNA expressions without an osteocalcin mRNA expression (p<0.05). CONCLUSION: Cell and gene therapy in an atelocollagen scaffold provided a efficient mechanism for chondrogenic matrix regeneration of rabbit IVD cells.ope

민요를 활용한 한국무용 수업의 교육적 효과에 관한 조사 연구

현대는 고도로 발달한 인류 문명으로 인하여 여가시간이 부족하고, 새로운 정보를 받아들이는 데에 조급하며, 따라서 정서적으로 불안정한 환경에 있다. 이러한 때에 우리만의 차별적인 독특성을 찾기 위해서는 우리의 문화를 정확히 인식하고 이에 대한 자긍심과 정체성을 확립할 때 가능할 것이다. 본 연구는 한국무용 수업을 활성화하는 방안으로, 우리 장단의 특성과 민족적 정서를 특징으로 하는 민요를 활용하였는데, 민속음악 전문가, 춤사위 용어 분야 전문가의 조언을 구하여, 중학생 연령에 알맞은 한국 무용 수업 계획안을 개발한 후 여자 중학교 두 학급 총 73명을 대상으로 일주일에 한 시간씩 총 6차시동안 이를 적용하였으며, 수업 전에 학생들에 대한 정보를 알기 위한 예비조사와 수업 후의 교육적 효과를 알아보기 위한 사후 설문조사를 실시하였고, 따라서 본 연구를 위한 설문조사의 결과는 다음과 같다. 예비조사의 결과로서, 한국 무용에 대한 일반적 인식정도 영역에서는 대상학생의 11%만이 민속무용 수업에 대한 경험이 있으며, 민요를 활용한 수업은 전원 받아 본 적이 없었고, 민요제목을 몇 가지 알고 있는 학생들은 주로 음악시간을 통해서 습득함으로 음악수업의 중요성을 알 수 있었다. 학교에서 무용 수업을 실시하는 것에 대해서는 대부분 긍정적인 응답을 하였으며, 한국무용 수업을 하는 가장 큰 이유에 대해서는 우리 문화를 이해하기 위한 응답이 가장 많아 한국무용 수업의 문화적 가치에 대해 많이 인식하고 있음을 알 수 있었다. 한국무용의 교육적 가치의 중요성에 대해서는 전통문화 이해의 측면에서 가장 높게 나타났다. 그리고 한국무용과 한국무용 수업, 민요에 대한 평소의 인식정도 영역에서는 학생들이 평소에 한국무용과 민요에 대해서 선입견을 가졌음을 알 수 있었다. 사후 조사에 대한 결과로서, 여섯 가지 영역으로 나뉘며, 첫째, 수업시간에 학습한 지식 내용들에 대한 인식정도 영역에서는 일곱 문항 중 다섯 문항에서 정답의 빈도수가 높았으며, 학생들의 지식적 이해가 높은 것으로 나타났다. 둘째, 한국무용 수업에 대한 흥미도 영역에서는 전체적으로 보통 이상의 평균점수가 나왔고, 동작적 움직임에 대한 흥미정도에서는 다소 낮은 점수를 보였고, 용어 학습에 대한 흥미와 민요의 선율이 주는 유연함에 흥미를 나타내었다. 셋째, 한국 무용에 대한 친숙도 영역에서는 한국무용과 민요에 대한 전반적인 친숙함 보다는 학습한 우리 장단에 대한 친숙정도가 가장 높게 나타났다. 넷째, 신체적 동작 습득에 대한 인식 정도영역에서는 전체적으로 낮은 점수를 보였으나 역시 용어로서 학습한 부분에 대해서는 긍정적인 응답이 많았으며, 움직임 습득을 질문하는 문항들에서 낮은 점수를 보인 것은 민요가 익숙해지고, 신체적 학습의 완전학습이 되기까지는 체계적인 수업방법과 어느 정도의 수업시간이 요구됨을 알 수 있었다. 다섯째, 우리 문화, 정서에 대한 이해 정도 영역에서는 높은 평균 점수를 보였는데, 이는 한국 무용수업이 학교에서 문화적 가치에 가장 비중을 두고 교수-학습이 이루어지고 있음을 학생들이 잘 인식하고 있고, 민요 속에 담긴 정서를 통해 우리 문화에 대한 가치를 가장 많이 느끼고 있다는 증거이다. 마지막 여섯째, 무용 감상에 대한 관심 정도 영역에서는 전체 문항의 평균점수로 보아 무용 전반에 대한 이해와 관심 정도는 다소 낮았으나, 다른 나라의 춤에 대한 관심은 높은 점수를 보였는데 이는 민요가 가지고 있는 우리의 정취를 춤을 통해 경험함으로써 우리의 정서와 멋에 대한 이해와 나아가 다른 나라의 춤들의 특색을 알고자 하는 지적 욕구가 증가하였기 때문이라 판단된다. ;High level of civilization makes people live in emotionally unstable environments these days. They have to struggle to accept new informations and intelligences every day without enough spare time. In the situation, we should have correct understanding, pride and the establishment of the identity of our traditional culture to find out distinctive uniqueness of it. This study is on the programs for Korean dance lesson&amp;apos;s revitalization. I have developed Korean dance lesson programs making use of &amp;quot;Minyo&amp;quot;, Korean folk songs, which has the traditional typical rhythms and original emotion of the people. Professional advices, such as Korean folk-music specialists for music, dance-step-term specialists for dance steps were helpful to develop the project of the study. After modifying the program for the ages of middle school students, I have applied it in class lessons, totally six lessons, one lesson for a week for two classes of 73 girl students of a middle school. I have had preliminary investigation before the program lessons to collect informations of them and post survey at the end of the lessons to check the educational effect of the program lessons. Preliminary investigation&amp;apos;s says as followings; Only 11% of the students have had the lessons of Korean dance. No one has had dance lessons with Minyo. They had learned Minyo through music classes, showing importance of music classes. Most of the students were positive to have dance classes at school. Understanding of Korean culture through Korean dance classes was the major reason. I have found out that they placed high value on Korean dance classes from the cultural point of view. The importances of the educational value was on understanding traditional culture and had the highest average value. I could see from the answers that the students have had negative awareness of Korean traditional folk dance and Minyo before having the project class lessons. Post survey was consisted of 6 fields. First, there were the high frequencies of correct answers in five of the seven questions on intellectual area which they had been taught at class lessons. And their intellectual understandings were high. Second detailed field was about their interests in the program lessons, and I could find abnormal average points generally with a little lower points in physical movement interests field. On the other side, they were interested in dance terminology and the pliable melodies on Minyo. Third, their familiarity to the Korean rhythms lessoned by the program lessons appeared with the highest points in spite of the little low points for general Korean dances and Minyoes in the field of the familiarity to Korean dances. Forth, the points were low generally in the field of the awareness of picking up physical motions in spite of many positive answers for the part of dance lessons with explanations of the step terms. This says that they need systematic lessons with enough time for them to be skillful in Minyo and physical movements and motions. The questions about understanding of Korean traditional culture and emotion were the fifth field, the high level of average points indicates that teaching and learning Korean dance place great deal of weight on cultural value. And also it is the evidence that students understand the value of Korean culture through the atmosphere of Minyo. Sixth as the last, average point of whole questions was low in field about dance appreciation. But, point that interest for dances of the other country is high. We could understand with this outcoming that their intellectual desires are increased to understand our emotion and aroma, more over, specific character of the other country&amp;apos;s dances by the experiences of our atmosphere which Minyo has through dance.논문개요 = ⅵ Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 필요성 및 목적 = 1 B. 연구 문제 = 5 C. 연구의 제한점 = 6 D. 용어의 정의 = 7 Ⅱ. 이론적 배경 = 8 A. 무용교육의 목적과 의의 = 8 1. 무용교육의 목적 = 8 2. 무용교육의 의의 = 10 B. 한국무용의 개요 및 가치 = 12 1. 한국무용의 개요 = 12 2. 한국무용의 교육적 가치 = 15 C. 한국무용 춤사위 = 18 1. 춤사위의 생성요인 = 19 2. 춤사위 용어의 종류 = 20 D. 민요의 개념 = 22 1. 민요의 발생 및 유형 = 23 2. 민요의 특성 = 29 3. 오돌또기와 신고산 타령 = 41 Ⅲ. 연구 방법 = 43 A. 연구 대상 = 43 B. 연구 도구 = 43 1. 수업 내용(수업계획안 구성) = 43 2. 설문지 = 49 C. 자료 수집 및 처리 = 50 Ⅳ. 연구결과 및 논의 = 51 A. 예비조사 = 51 1. 한국무용에 대한 일반적 인식 정도 = 51 2. 한국무용과 한국무용 수업, 민요에 대한 인식 정도 = 56 B. 사후조사 = 60 1. 학습한 지식 내용들에 대한 인식 정도 = 61 2. 한국무용 수업에 대한 흥미도 = 63 3. 한국무용에 대한 친숙도 = 69 4. 신체적 동작 습득에 대한 인식 정도 = 72 5. 우리문화, 정서에 대한 이해 정도 = 76 6. 무용 감상에 대한 관심 정도 = 78 Ⅴ. 결론 및 제언 = 81 A. 결론 = 81 B. 제언 = 83 참고문헌 = 84 ABSTRACT = 88 부록1 = 91 부록2 = 9

Study about Braille pattern of Haptic type for visually handicapped learners

사물과 인간의 촉감 정보는 시각 정보에 의존하지 않아도, 사물의 모양이나 거리와 같은 물리적 특성을 전달해준다. 본 논문에서는 햅틱 디바이스(Haptic Device)가 가지는 이러한 특징을 이용하여, 가상공간상의 점자를 개발하여 시각장애 학습자들이 점자를 촉감으로 읽을 수 있도록 하는 것을 목표로 한다. 이를 통하여 시각장애인은 시각이 아닌 촉감으로 컴퓨터가 제공해 주는 지식을 학습 할 수 있도록 한다. 특히 본 논문에서는 햅틱 디바이스를 활용하여, ‘햅틱형 점자’를 설계 하였으며, 루이 브라유(Louis Braille)가 개발한 6점 점자를 반구모양으로 변형하여 가상공간에서 입체점자가 되게 하였다. 이러한 햅틱형 점자는 상하, 좌우에 파티션(Partition)을 세워 점자 한자의 경계를 나타내었다. 햅틱 커서(Haptic Cursor)의 모양은 어느 방향으로 돌려도 같은 모양인 구 모양을 가진다. 이렇게 설계된 점자 패턴은 점의 크기, 햅틱 커서의 크기, 점과 점사이의 거리, 파티션의 높이 그리고 점의 모양을 달리한 8가지 패턴으로 정의 하여 실험을 진행 하였으며, 시각장애인과 같은 조건을 준 피실험자 4명이 눈을 가리고 실험에 참여 하도록 하였다. 피실험자는 각각의 8개의 점자패턴에서 점자 20개를 읽고, 읽은 시간과 오독문자개수가 분석 되었다. 본 연구에서는 이 실험을 통해 시각장애 학습자가 빠르게 점자를 읽을 수 있고, 오독률이 적은 표준형 ‘햅틱형 점자’을 제시하였다. 본 연구에서 제시된 ‘햅틱형 점자’는 시각장애 학습자가 컴퓨터를 통해 학습이 가능하도록 하는 효과적인 환경매체가 될 수 있으리라 기대하며, 시각의존도가 큰 컴퓨터를 시각장애인도 사용할 수 있게 함으로써, 장애인이 갖는 학습 차별을 줄이고, 학습상황의 한계를 극복한다는 점에서 연구의 의의가 있다.;The objects and human’s tactile sensation information in the imagination environment make us know their physical qualities such as its shape or distance without the sense of sight. In this study, the main purpose of this paper is that it could make that the visually handicapped learners could read braille by Haptic Device through tactile sensation developing the reading braille in the imagination environment Therefore, The computers could contain a lot of information and knowledge production. The visually handicapped can learn lots of knowledge that computer provided through reading braille of the tactile sensation not for vision. Especially, The research contrived the Braille of Haptic type applying the Haptic Device. It makes become three-dimension Braille in the imagination environment by transforming the Louis Braille’s 6 dots Braille into hemisphere shape. The one Braille present it’s boundary standing up-down and right-left partition. Haptic Cursor’s shape has the same shape of hemisphere even though spinning to any direction. These designed Braille pattern re-defined 8 patterns that dot’s size, Haptic Cursors size, distance between two dots, partition’s height and dot’s shape and then experimented with this pattern. he four people who hide their eyes participated in this experiment under the same condition of the visually handicapped. It analyzed the reading time and the number of misreading letter after the reading 8 dots patter and 20 each dots. This study is presenting standard type patterns’ Braille of Haptic type by finding out the fastest reading dots and the less misreading dot pattern for visually handicapped learners. The indicated Braille of Haptic type will be the effective environment medium that visually handicapped learners could study by using computer. This study has a significant contribution for decreasing the leaning distinction and overcoming the study environment of visually handicapped by using the computers that have the high visual dependency.Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 배경 = 1 B. 연구의 목적 = 3 C. 연구의 내용과 방법 = 4 Ⅱ. 선행연구 고찰 = 6 A. 햅틱(Haptic)과 햅틱 디바이스(Haptic Device) = 6 B. 시각장애학습자의 이해 = 10 C. 점자 = 13 Ⅲ. 연구방법 = 17 A. 연구대상 = 17 B. 개발도구 = 17 C. 실험절차 = 19 Ⅳ. 연구결과 및 해석 = 26 A. 점과 커서크기에 따른 점자 인지 = 26 B. 파티션 높이에 따른 점자 인지 = 31 C. 점과 점 사이의 간격에 따른 점자 인지 = 33 D. 점의 모양에 따른 점자 인지 = 36 Ⅴ. 결론 및 논의 = 40 참고문헌 = 43 부록 1. 실험을 위한 안내문 = 45 부록 2. 실험을 위한 점자 테스트지 = 47 ABSTRACT = 4

Attitudes toward Death and End-of-life Care among Nurses in Nursing Homes

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 간호학과 간호학 전공, 2013. 2. 윤순녕.본 연구는 노인요양시설에서 근무하는 간호사의 죽음에 대한 태도와 임종간호에 대한 태도 및 변수 간 상관관계를 파악하기 위한 서술적 조사연구이다. 본 연구결과는 시설에서의 임종간호 실무의 표준을 마련하는 기초자료로 활용하고자 한다. 연구대상자는 2012년 전국 노인요양시설 중 입소정원이 100명 이상인 81개 시설에 근무하는 251명의 간호사를 대상으로 하였다. 자료수집기간은 2012년 7월 말부터 9월 28일까지이고 우편 설문지법을 이용하였다. 본 연구의 독립변수는 일반적 특성, 임상관련 특성 및 죽음과 임종간호 경험이고, 종속변수로는 죽음에 대한 태도와 임종간호태도를 측정하였다. 연구도구로 죽음에 대한 태도는 7점 척도(전적으로 그렇다 ~ 전혀 그렇지 않다)인 Death Attitude Profile-Revised (DAP-R)를, 임종간호에 대한 태도는 5점 척도인 Frommelt Attitudes Toward Care of the Dying Scale (FATCOD)를 사용하였다. 수집된 자료의 통계분석으로는 서술적 통계, t-test 또는 one-way ANOVA, 사후검정 및 상관관계 분석을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 죽음에 대한 태도의 하위영역으로 접근적 수용, 죽음공포나 회피 및 탈출적 수용이 추출되었다. 각각의 평균은 4.19점, 3.13점, 3.47점이었다. 접근적 수용은 일반적 특성 중 연령이 50세 이상 집단이 30대 집단보다, 종교를 가진 집단이 종교가 없는 집단보다 유의하게 높았다. 임상관련 특성에서는 현 시설에서의 근무기간이 5년 이상인 집단이 1년 미만보다 유의하게 높았다. 죽음과 임종간호 경험 중에는 임종간호 교육을 받은 집단이 그렇지 않은 집단보다, 49시간 이상의 교육을 받은 집단이 교육을 받은 적이 없거나 3~8시간, 9~24시간을 받은 집단보다 유의하게 높았다. 죽음공포나 회피는 일반적 특성 중 30~39세 집단이 점수가 가장 높았고 50세 이상 집단이 가장 낮았다. 종교가 없는 집단이 종교가 있는 집단보다 평균이 유의하게 높았다. 죽음과 임종간호 경험 변수 중 임종간호 교육시간이 3~8시간이 집단이 49시간 이상인 집단보다 유의하게 높았다. 또한 죽음토의 제의를 받은 집단이 그렇지 않은 집단보다 통계적으로 유의하게 낮았다. 탈출적 수용은 일반적 특성 중 연령과 종교에 따라 유의한 차이를 나타냈다. 20대 집단이 30대 집단보다, 50세 이상 집단이 30대 집단보다 평균이 유의하게 높았다. 종교를 가진 집단이 없는 집단보다 유의하게 높았다. 임상관련 특성 중에는 이전 병원경력이 25년 이상인 집단이 1년 미만, 1년 이상~5년 미만, 그리고 10년 이상~15년 미만 집단 보다 통계적으로 유의하게 높았다. 2. 임종간호태도의 평균은 4.09점이었다. 일반적 특성으로 연령은 40대 집단이 20대 집단보다, 50세 이상 집단이 20대 집단보다 유의하게 높았고, 종교를 믿는 집단이 종교가 없는 집단보다 높았으며, 학사 이상의 학력을 가진 간호사가 전문학사 집단보다 더 긍정적인 임종간호태도를 보였다. 임상관련 특성에서는 직위가 중간관리자 이상인 집단이 실무간호사보다, 현 시설에서의 근무기간 이 5년 이상 근무한 간호사가 1년 미만인 간호사 보다 임종간호 태도 점수가 유의하게 높았다. 죽음과 임종간호 경험 중에 최근 1년 이내 임종간호를 제공한 횟수가 10회 이상인 집단이 다른 집단보다 평균이 유의하게 높았고, 임종간호 교육을 받은 집단이 그렇지 않은 집단보다, 49시간 이상의 임종간호 교육을 받은 집단이 전혀 받지 않았거나 1~2시간, 3~8시간을 받은 집단보다 높았다. 또한 죽음에 대한 토의를 받은 집단이 그렇지 않은 집단보다 임종간호태도 점수가 유의하게 높았다. 연령, 종교, 현 시설 근무기간, 임종간호 제공 횟수를 통제한 후에도 임종간호 교육시간에 따른 임종간호태도의 평균 차이는 통계적으로 유의하였다. 3. 죽음에 대한 태도 하위영역과 임종간호태도 간 상과관계를 분석한 결과 접근적 수용은 임종간호태도 간에 유의한 정적 상관관계를 나타냈고, 죽음공포나 회피는 임종간호태도와 유의한 부적 상관을 보여주었다. 이상을 종합해볼 때 시설간호사의 특성에 맞는 교육프로그램을 개발하여 죽음에 대한 수용을 높이고, 죽음공포나 회피는 줄이며 긍정적인 임종간호태도를 갖출 수 있도록 하는 것이 필요하다.국문초록 서론 문헌고찰 연구방법 연구결과 논의 결론 및 제언 참고문헌 부록 AbstractMaste

제1형 BMP 수용체인 ALK-2에 의한 인간 중간엽 줄기세포의 조골세포 분화

Dept. of Medical Science/석사[한글] [영문]Human mesenchymal stem cells (hMSCs) render a potential interest to investigators in the fields of tissue engineering, gene therapy and cellular transplantation because hMSCs can differentiate to multifunctional mesenchyme-origin cells. Specially, with respect bone regeneration, many scientists have researched the osteogenic functions of bone morphogenetic proteins (BMPs) with hMSCs. The overexpression of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) gene can stimulate osteogenic differentiation of hMSCs and also induce bone formation in animal model have been reported. As well as, osteogenesis can be induced by the overexpression of type I BMP receptor gene in chondrocytes and myoblasts as similar as BMP-2 gene has been reported. In the present study, we investigated the osteogenic differentiation of hMSCs by the overexpression of activin receptor-like kinase-2 (ALK-2) gene as one of type I BMP receptors by in vitro experiments and verified bone formation in immunodeficiency mice by the implantation of genetic modified hMSCs.hMSCs were isolated from bone marrow of patients with spinal stenosis. Adenoviral vector containing with ALK-2 gene (Ad/ALK-2) was produced from 293A cell. After hMSCs were transduced with Ad/ALK-2, osteogenic staining and RT-PCR to osteogenic marker genes were performed to observe osteogenic differentiation of hMSCs. To verify the overexpression of ALK-2 gene in hMSCs trigger osteogenic cell signaling, westem blot to Smad1/5/8 and MAPK was performed. For 3-dimensional (3D) culture of Ad/ALK-2-transduced hMSCs, cells were seeded to bovine demineralized bone matrix (bDBM) as scaffold and the cell morphology was observed by scanning electron microscopy (SEM). Also, for analyzing newly synthesized surface material of ALK-2-overexpressed hMSCs, SEM-energy-dispersive X-ray spectroscopy (SEM-EDX) was performed. Finally, Ad/ALK-2-transduced hMSCs-adhered bDBMs were implanted to immunodeficiency mice. At 2 and 4 weeks, each group was sacrificed and the implants were harvested. For histological analysis, hematoxylin and eosin (H&E) staining and immunofluorescent (IF) staining were performed. We observed Ad/ALK-2-transduced hMSCs were stained by osteogenic staining and mRNA expression of osteocalcin in hMSCs was increased with depending on virus titer of Ad/ALK-2. Also, mRNA expression of osteogenic transcription factors such as runx2, osterix, dlx5 was activated by ALK-2. Western blot analysis of osteogenic cell signaling protein showed that the overexpression of ALK-2 activated Smad1/5/8 signaling pathway and increased phosphorylation of p38. On 3D culture, a deposit of calcium phosphate at surface on these cells was observed. On the in vivo experiment, the overexpression of ALK-2 could not stimulated enough to bone regeneration compared to the overexpression of BMP-2 as positive control at 2 weeks, but the ALK-2-overexpressed groups stimulated osteogenesis at 4 weeks were observed by histological staining. And ALK-2 protein in Ad/ALK-2-transduced hMSCs-adhered implants was overexpressed for 4 weeks was verified by immunofluorescent (IF) staining. Overexpression of type I BMP receptor, ALK-2 induced osteogenic phenotype in hMSC was verified by in vitro and in vivo studies. Therefore, ALK-2 is a potential therapeutic candidate for osteogenic gene therapy was confirmed by this study.ope

Osteogenic potential of human ligamentum flavum cells induced by recombinant human bone morphogenetic protein-2.

의과학사업단/석사[한글] 인간 척추 황색 인대의 골 형성 잠재력에 대해서는 황색 인대의 비후 혹은 골화에 의해 척추관 협착증이 일어 날 수 있다는 사실이 여러 연구에서 보고됨으로써 간접적으로 증명되었다. 그리고 최근에는 시험관 내에서 퇴행된 황색 인대 세포가 조골 세포 표현형을 자발적으로 나타낸다 점이 입증되었으며, 또한 생체 실험에서도 척추 인대에 BMP-2를 주입하면 황색 인대 조직의 골화를 유도 할 수 있었다. 그러나 BMP-2의 작용에 의한 황색 인대 세포의 조골 세포화에 대한 자세한 연구는 아직 까지 시행되지 않았다. 따라서 본 실험의 목적은 BMP-2에 의한 퇴행된 황색 인대 세포의 골 형성능을 증명하고자 한다. 퇴행되고 비후한 황색 인대는 척추관 협착증에 따른 외과적 척추 감압술 시 채취하였다. 효소 소화법으로 황색 인대의 섬유세포-유사세포를 분리하였다. 재조합 인간 BMP-2는 유전자 재조합 방법으로 생산하였다. 다양한 용량의 BMP-2를 세포 배양에 적용하였고, alkaline phosphatase 활성, von Kossa 염색, Alizarin red 염색, osteocalcin 단백질의 immunocytochemistry 등을 수행하였다. 재조합 인간 BMP-2의 순수도와 활성은 조골 세포와의 배양으로 확인하였다. 재조합 인간 BMP-2를 처리한 조건에서 퇴행된 황색 인대 세포가 조골 세포 표현형을 나타냈으며, 이는 alkaline phosphatase 활성의 증가, osteocalcin 단백질 발현의 증가와 bone nodule의 형성으로 검증하였다. 재조합 인간 BMP-2는 퇴행된 황색 인대 세포에서 조골 세포 표현형을 증가시키며, 이는 생물학적으로 조작된 황색 인대를 척추 유합술에서 자가골의 대체물로서 이용할 수 있는 가능성을 제시하였다. 더욱이 황색 인대의 골 형성능은 조직 공학적인 측면에서도 의의가 있다고 볼 수 있겠다. [영문] Osteogenic potential of ligamentum flavum has been reported by histologic and pathophysiologic researches in spinal stenosis and other ossification of spinal ligament. Recently spontaneous expression of osteogenic phenotype from degenerated ligamentum flavum was demonstrated in-vitro study. Also in-vivo application of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) to spinal ligament resulted in ossification of ligament. However, facilitation of osteogenesis in fibroblast from ligamentum flavum under the influence of BMP-2 has not been investigated. Hence the purpose of this experiment was to prove effect of BMP-2 on osteogenic potential of fibroblast from degenerated ligamentum flavum. Degenerated and hypertrophied ligamentum flavum was obtained from decompressive surgery of lumbar spinal stenosis. Fibroblasts were isolated from tissue by enzymatic digestion. Recombinant human BMP-2 (rhBMP-2) was produced by DNA cloning method. Various dose of rhBMP-2 was administered to cultures. Alkaline phosphatase activity, osteocalcin mRNA expression, von Kosa stain, Alizarin red stain, immunocytochemistry were performed. Purity and biologic activity of rhBMP-2 were confirmed in cultures of osteoblasts. Under the influence of rhBMP-2, fibroblasts from degenerated ligamentum flavum showed enhanced expression of osteogenic phenotypes which were proven by increased alkaline phosphatase activity, increased expression of osteocalcin, formation of bone nodules. rhBMP-2 upregulates osteogenic phenotype in fibroblast from degenerated ligamentum flavum, which signify possibility of biologically modified ligamentum flavum as an alternative material to autogenous bone graft. Further detail study in terms of tissue engineering should be followed.ope

In vivo bone tissue formation induced by calclum phosphate paste composite with demineralizedbone matrix

Demineralized bone matrix (DBM)-calcium phosphate cement (CPC) composites were subjected to cellular test of osteogenic potentials and implantation in animal model. The expression of osteogenic marker gene from mouse preosteoblast cell line MC3T3-E1 adhered to the DBM-CPC composite was much higher than plain CPC. In addition, the DBM-CPC composite implanted nude mice revealed osteoinduction between the implanted composite and adjacent tissues, whereas the plain CPC induced osteoconductionope