Enhancement of glioma cell apoptosis induced by anti-human DR5/DR4 monoclonal antibodies by sub-toxic dose of doxorubicin in human

目的探讨亚毒性剂量的阿霉素影响抗DR4、DR5单克隆抗体(mAb)FMU1.4和FMU1.5诱导3株神经胶质瘤细胞株U343(TRAIL敏感株)、U138(TRAIL部分敏感株)及U373(TRAIL耐受株)凋亡的作用及可能的机制。方法采用流式细胞术检测DR4、DR5的表达及神经胶质瘤细胞中DNA倍增。用MTT比色法检测mAbFMU1.4和FMU1.5对3株神经胶质瘤细胞增殖的抑制作用。用共聚焦显微镜观察3株细胞中Ca2+的浓度。以Westernblot检测细胞内色素C、FLIP[FLICE-inhibitoryprotein,为一组含有死亡效应结构域(DED)的胞浆蛋白]的表达。结果亚毒性剂量的阿霉素作用后,DR5、DR4在3株细胞中的表达提高;而mAbFMU1.4、FMU1.5诱导U138和U373细胞凋亡的作用增强,细胞内细胞色素C的表达提高,FLIP的表达降低,Ca2+浓度增加。结论亚毒性剂量的阿霉素与抗DR4、DR5mAb联合应用后,可提高mAb诱导靶细胞凋亡的效应,其作用机制与DR4、DR5、细胞色素C、FLIP的表达及Ca2+的含量有关。 【英文摘要】 AIM: To study the cytotoxic effects of doxorubicin on apoptosis in glioma cell lines U343, U138, U373 induced by anti-human DR4/DR5 monoclonal antibodies (FMU1.4/FMU1.5) and the underlying mechanism. METHODS: Expression of DR4/DR5 was quantitated by flow cytometry. Cytotoxicity exerted by FMU1.4/FMU1.5 on three cell lines was measured by MTT colorimetry and the induced apoptosis was determined by agarose gel electrophoresis. The expression of cytochrome C, FLIP and Ca 2+ concentration were also measured. RE...教育部跨世纪优秀人才培养计划资助项目(2000年

Fas ligand and Anti-human DR5 monoclonal antibody induce tumor cell lines apoptosis

目的探讨FasL、Anti-DR5mAb对肿瘤细胞Hela、BGC823、MCF-7、L342、H9101、D6的杀伤作用及机制。方法采用RT-PCR、MTT比色法、电泳、DNA倍体分析、Westernblot等方法。结果H9101、Hela细胞株DR5mRNA水平有表达,D6细胞无表达;H9101、L342细胞株FasmRNA水平有表达,D6细胞无表达。H9101、L342细胞株对FasL、Anti-DR5mAb敏感并呈剂量依赖性;MCF-7、BGC823细胞株对FasL敏感,对Anti-DR5mAb相对敏感。Hela对FasL相对敏感,对Anti-DR5mAb敏感;D6对两种凋亡诱导剂耐受。结论FasL、Anti-DR5mAb能不同程度地诱导肿瘤细胞凋亡,其机制与Fas、DR5、Caspase-8、Bcl-2的表达有关。 【英文摘要】 Objective:To study the cytotoxic effects on tumor cell lines Hela,BGC823,MCF-7,L342,H9101,D6 induced by Fas ligand and anti-human DR5 monoclonal antibodies(Anti-DR5 mAb) and the underlying mechanism.Methods:Fas/DR5 mRNA were detected by RT-PCR. Cytotoxicity exerted by FasL/Anti-DR5 mAb on tumor cell lines was measured by MTT colorimetry and the induced apoptosis was determined by agarose gel electrophoresis.Results:The expression of DR5 on BGC823 and Hela cells were higher and DR5 didn’t express in D6. The ...厦门大学科研启动基金(No.Z03103)资

死亡受体5胞外区域的重组、表达及活性鉴定

目的构建死亡受体5(deathreceptor5,DR5)胞外区域(eDR5)的表达载体,表达纯化重组蛋白并鉴定其生物特性。方法通过重叠PCR获得DR5胞外段编码序列,构建pET-22b(+)/DR5表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni2+柱亲和纯化,SDS-PAGE、直接ELISA鉴定纯化产物的纯度和特异性,用MTT法检测eDR5蛋白阻断DR5单克隆抗体FMU1.5和TRAIL诱导人胶质瘤细胞株U343(高表达DR5)、U373(低表达DR5)细胞凋亡的作用。结果获得了DR5胞外段编码序列,目的蛋白在上清及包涵体中都有表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上,蛋白产量达9mg/ml。ELISA结果表明所纯化蛋白为eDR5。eDR5蛋白可部分阻断FMU1.5和TRAIL诱导人胶质瘤细胞株U343细胞凋亡的作用,其阻断率与DR5表达相关。结论死亡受体5胞外段基因的成功重组、表达及纯化,为进一步的功能研究奠定了基础

基于BIM技术的市政工程造价管理研究

市政工程造价管理是运用科学的手段和方法,合理分配人力、物力和财力,达到有限资金下的最大工程价值,而BIM技术在市政工程造价管理中的合理应用,对市政工程造价的有效性具有重要影响,基于此,本文概述了市政工程和BIM技术,阐述了BIM技术在市政工程造价管理中应用的重要性及其主要作用,对BIM技术在市政工程造价管理中的具体应用进行了探讨分析。</jats:p

意大利的人工智能研究

中国科学院赴意大利人工智能访问小组一行四人于八二年九月访问了意大利的有关学术单位和高等学校。本文就这次访问了解到的有参考价值的内容作一概括介绍