Características histológicas del útero de Sympterygia acuta (Garman, 1877) y Sympterygia bonapartii (Müller & Henle, 1841) (Chondrichthyes; Rajidae)

Los condrictios constituyen un clado sumamente conservado y vulnerable a la explotación, que ha cobrado una importancia creciente en los últimos años. Sin embargo, existe poca información sobre los aspectos morfológicos relacionados con la reproducción; tanto así, que la estructura del útero en hembras grávidas sólo ha sido estudiada en profundidad en una especie ovípara. El presente trabajo describe las características morfológicas, histológicas e histoquímicas del útero de dos especies de Rájidos del género Sympterygia a lo largo del ciclo de vida. Ambas especies presentan úteros pares que desembocan independientemente en un seno urogenital común. El útero de las hembras inmaduras es filiforme, translúcido y poco especializado. Cuando se inicia el desarrollo sexual, todo el sistema genital exhibe un cambio direccional y progresivo. En todas las hembras estudiadas, independientemente del grado de madurez, se encontraron las mismas cuatro túnicas a lo largo del útero: una mucosa, compuesta por un epitelio de revestimiento y un corion, una submucosa, una muscular y una serosa. Los cambios mayores en la estructura del útero a lo largo del ciclo de vida ocurren a nivel de la mucosa. En el útero de hembras maduras, grávidas o no grávidas, se pueden reconocer tres regiones claramente diferenciables, craneal, media y caudal, que varían tanto en la estructura como en la afinidad histoquímica de la mucosa, así como en el grosor de la túnica muscular. Los resultados del presente trabajo se discuten en un contexto fisiológico, filogenético y adaptativo.Chondrichthyes constitute a conserve and vulnerable clade of increasing importance. However, there is scarce knowledge about the morphological aspects of the reproduction, so that only one work exists about the structure of the gravid uterus of an oviparous species. The work presented here describes the morphological, histological and histochemical remarks of the uterus of two Rajids of the Sympterygia genus along the life cycle. Both species presented paired uteri that lead independently to a common urogenital sinus. The uteri of immature females are filiform, translucent and unspecialized tubes. When sexual development starts, all the genital system displays a transitional and progressive change. In all studied females, independently of the maturing stage, the same four layers were present all over the uterus: a mucosa, which comprises the lining epithelium and lamina propria, a submucosa, a muscular and a serosa. The major changes in the structure of the uterus along the life cycle occur in the mucosa. The uteri of mature, gravid and nongravid, females presents three distinguishable areas, cranial, medial and caudal, that vary both in the structure and histochemistry of the mucosa and in the thickness of the muscular layer. The results presented here are discussed in a physiological, adaptive and phylogenetic context.Fil: Díaz Andrade, María Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Lopez Cazorla, Andrea Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Galíndez, Elena Juana. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentin

El sistema reproductor femenino de Zearaja chilensis (Guichenot, 1848) (Chondrichthyes, Rajidae): Gametogénesis y validación microscópica de los criterios de madurez

Los condrictios son extremadamente susceptibles a la explotación pesquera debido, entre otras cosas, a sus adaptaciones reproductivas. Los conocimientos básicos de sus parámetros reproductivos son esenciales, ya sea desde el punto de vista ecológico como económico. Zearaja chilensis constituye un importante recurso económico en América del Sur. En este trabajo se analiza la anatomía microscópica del sistema reproductor femenino y la talla de inicio de la vitelogénesis. El material se fijó en Bouin y se procesó mediante técnicas histológicas de rutina. Ambos ovarios son igualmente funcionales. La foliculogénesis presenta el mismo patrón de otros condrictios. Los folículos con diferentes grados de maduración coexisten en animales maduros, con la excepción de las oogonias, que sólo se observaron en los individuos inmaduros. Los folículos atrésicos se registraron en todas las etapas de la maduración. La talla de inicio de la vitelogénesis, microscópicamente registrada, es inferior a la detectada en el ojo desnudo. La glándula oviductal y el útero muestran similitud con lo reportado en otros peces cartilaginosos lecitotróficos. Este trabajo describe por primera vez, la microanatomía morfofuncional de la especie y pone a prueba la precisión de los criterios comúnmente empleados para la determinación de la madurez sexual, una información crítica para la determinación de las políticas de gestión.Chondrichthyans are extremely susceptible to overfishing due, among other things, to their reproductive adaptations. Basic knowledge of reproductive parameters is essential, both of ecological andfor economic points of view. Zearaja chilensis is a valuable economic resource. This work analyzes the microanatomy of female reproductive system, as well as the size of the onset of vitellogenesis. The material was fixed in Bouin and processed using routine histological techniques. Both ovaries are equally functional. Folliculogenesis depicts the same pattern of other Chondrichthyans. Follicles with different degrees of maturation coexist in mature animals, with the exception of oogonia, which were only found in immature individuals. Likewise, atretic follicles were recorded in all stages of maturation. The size of yolk input, microscopically recorded, is lower than the detected at naked eye. Oviductal glands and uterus show similarity with those reported in other lecitotrophic cartilaginous fish. This work reports, for the first time, the morfofunctional microanatomy of the species, and puts to the test the accuracy of the commonly employed criteria for the determination of sexual maturity, a critical data when determining management policies.Fil: Wehitt, Anahi. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Di Giacomo, Edgardo Ernesto. Universidad Nacional del Comahue. Instituto de Biología Marina y Pesquera Almirante Storni; ArgentinaFil: Galíndez, Elena Juana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina. Universidad Nacional del Comahue. Instituto de Biología Marina y Pesquera Almirante Storni; Argentin

Foliculogénesis Ovárica en la Raya Marmorada, Sympterygia bonapartii (Müller & Henle, 1841) (Chondrichthyes, Rajidae)

Los Condrictios se han convertido en un recurso económico importante en las últimas décadas, siendo Argentina uno de los países que más explota tiburones y rayas, incluso a niveles que exceden los límites de varias especies. A pesar de esto, es poco lo que se conoce sobre la biología reproductiva de este grupo, particularmente en especies del Hemisferio Sur. En este trabajo se estudian los estadios más relevantes de la foliculogénesis en Sympterygia bonapartii. Los resultados muestran que las ovogonias están presentes tanto en ejemplares inmaduros como subadultos. Las características más importantes que varían a lo largo del desarrollo folicular son el número de capas y tipos celulares que constituyen el epitelio folicular, el desarrollo de proyecciones de las células de la granulosa y el grado de desarrollo de las tecas. Las células foliculares son, al menos, de dos tipos y ambos emiten proyecciones que atraviesan la zona pelúcida. La teca externa presenta características compatibles con la actividad sintética. Folículos atrésicos de distintos tamaños están presentes en ejemplares de todos los estadios de madurez sexual. Estos resultados se discuten en un marco fisiológico y adaptativo.Chondrichthyes have become an important economic resource in the last decades, with Argentina as one of the countries that exploits more sharks and skates, even at levels that exceed de limits of many species. However, there is scarce knowledge of the reproductive biology of this group, particularly from species inhabiting the Southern hemisphere. This work shows the most relevant facts during folliculogenesis in Sympterygia bonapartii. Results show that germinal cells are present in immature and maturing females. The most important facts that vary along de follicular development are the number of types and layers of follicular cells, the establishment of thin projections from the follicular cells and the degree of development of the thecae. Follicular cells are, at least, of two different types and both of them emit projections that break through the zona pellucida. The outer theca shows signs of synthetic activity. Atretic follicles of different sizes are present in exemplars of all the reproductive stages. These results are discussed in a physiological and adaptive context.Fil: Díaz Andrade, María Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Galíndez, Elena Juana. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Lopez Cazorla, Andrea Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Estecondo, Silvia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentin

Reproductive biology of the eyespot skate atlantoraja cyclophora (Elasmobranchii: Arhynchobatidae) an endemic species of the southwestern atlantic ocean (34ºs - 42ºS)

Atlantoraja cyclophora is an endemic skate to the continental shelf of the Southwestern Atlantic Ocean (22ºS-47ºS) and a bycatch species in commercial bottom trawl fisheries. The morphometric relationships, the size at maturity and the reproductive cycle of this species were analyzed, with samples collected between 34ºS and 42ºS. The size range was 190 to 674 mm total length (TL) for males and 135 to 709 mm TL for females. Sexual dimorphism between the relationships TL - disc width and TL - total weight was found, with females wider and heavier than males. The mean size at maturity for males was estimated in 530 mm TL and for females in 570 mm TL. The gonadosomatic index (GSI) in mature females varied seasonally and showed the highest value in December. The maximum follicular diameter and oviductal gland width did not show any seasonal pattern. Females with eggs in the uterus were present most of the year. The reproductive activity in males would be continuous throughout the year, evidenced by the lack of variation in the GSI between seasons. The results obtained suggest that A. cyclophora might undergo an annual reproductive cycle, in coincidence to that reported for this species in Brazilian populations.Atlantoraja cyclophora es una raya endémica de las plataformas continentales del Océano Atlántico Sudoccidental (22ºS-47ºS) que se captura incidentalmente en las pesquerías comerciales de arrastre de fondo. Se estudiaron las relaciones morfométricas, el ciclo reproductivo y se estimó la longitud media de madurez sexual de esta especie con muestras colectadas entre 34ºS y 42ºS. El rango de tamaño fue 190 a 674 mm de longitud total (LT) en machos y 135 a 709 mm LT en hembras. Se observó dimorfismo sexual entre las relaciones LT - ancho de disco y LT - peso total, siendo las hembras más anchas y pesadas que los machos. La talla de madurez se estimó en 530 mm LT para machos y en 570 mm LT para hembras. El índice gonadosomático (IGS) en hembras maduras varió estacionalmente, con el valor más alto en Diciembre. No se registró variación estacional respecto al diámetro máximo folicular y al ancho de la glándula oviductal. Se observaron hembras con huevos en los úteros durante la mayor parte del año. La actividad reproductiva en los machos sería continua durante todo el año, dada la falta de variación del IGS entre estaciones. Se sugiere que A. cyclophora experimenta un ciclo reproductivo anual, similar a lo reportado para esta especie en aguas de Brasil.Fil: Wehitt, Anahi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Colonello, Jorge Horacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; ArgentinaFil: Macchi, Gustavo Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata; ArgentinaFil: Galíndez, Elena Juana. Universidad Nacional del Sur; Argentin

Tasa de oviposición de la raya marmolada Sympterygia bonapartii (Elasmobranchii, Rajidae) (Müller & Henle, 1841) mantenida en cautiverio

Se registró la tasa de oviposición de Symperygia bonapartii en cautiverio. En un período de un año una hembra depositó 152 ovicápsulas a una tasa de 0.4 huevos por día y la otra depositó 200 ovicápsulas a una tasa de 0.5 huevos por día.The oviposition rate in captive Sympterygia bonapartii was reported. In a year period one female laid a total of 152 egg cases at a rate of 0.4 egg cases per day and a second one laid a total of 200 egg cases at a rate of 0.5 egg cases per day.Fil: Jañez, Julieta A.. Fundación Temaiken; ArgentinaFil: Sueiro, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Nacional Patagónico; Argentin

Primer registro de anisakis sp. (nematoda, anisakidae) l3 en la cavidad corporal deatlantoraja platana (chondrichthyes, rajidae)

En la presente nota se registra por primera vez el tercer estadio larval de Anisakis sp. infectando a Atlantoraja platana (Günther, 1880). Los hospederos fueron obtenidos en desembarques pesqueros de plantas de procesado de los puertos de San Antonio Oeste (40° 44' S 64° 57' O) y San Antonio Este (40° 49' S 64° 57' O), Provincia de Río Negro, Argentina. Las larvas fueron colectadas en la cavidad visceral de los peces, cerca del órgano epigonal, un tejido linfomieloide estrechamente asociado a las gónadas y exclusivo de los peces cartilaginosos. Hay evidencias documentadas que las altas concentraciones de urea en tejidos y fluídos corporales tornan inhabitable el medioambiente celómico para ser colonizado por helmintos. Los resultados expuestos en este trabajo constituyen el primer reporte de L de Anisakis sp. en la cavidad corporal 3 de un elasmobranquio, en particular A. platana, y demuestran la capacidad de este anisákido para sobrevivir en la masa visceral de estos hospederos.This communication is the first record of the presence of a third stage larva of Anisakis sp. infecting Atlantoraja platana. The hosts were collected from fishery landings at processing plants of San Antonio Oeste (40° 44' S 64° 57' O) and San Antonio Este ports (40° 49' S 64° 57' O), Rio Negro province, Argentina. They were found in the visceral cavity near the epigonal organ, a lymphomyeloid tissue closely associated with gonads and only in cartilaginous fish. The high concentrations of urea in the body fluid and tissues of elasmobranch hosts made an inhospitable environment to the colonization of helminthes. The results produced by this work constitute the first report of L of Anisakis sp. in the body cavity of an elasmobranch, in particular 3 A. platana, and show the capability of this anisakid to survive in the visceral mass of these hosts.Fil: Moya, Ana Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Galíndez, Elena Juana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; ArgentinaFil: Di Giacomo, Edgardo Ernesto. Universidad Nacional del Comahue; ArgentinaFil: Tanzola, Rubén Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Instituto de Ciencias Biológicas y Biomédicas del Sur; Argentin

Growth and reproduction in captivity unveils remarkable life-history plasticity in the smallnose fanskate, Sympterygia bonapartii (Chondrichthyes: Rajiformes)

Analizamos el crecimiento y la reproducción de ejemplares de raya marmorada, Sympterygia bonapartii nacidas en cautiverio. Se obtuvieron ovicápsulas a partir de la oviposición de dos hembras capturadas en la naturaleza y mantenidas en el Acuario Temaikèn. Posteriormente a la eclosión, se analizó el crecimiento en 13 hembras y 21 machos hasta la madurez sexual. Se evaluó el patrón de oviposición y la performance reproductiva en seis de las hembras criadas en cautiverio. Se ajustaron cuatro modelos a los datos de crecimiento, entre los cuales la función logística fue la que logró el mejor ajuste. Para ambos sexos, la mayor tasa de crecimiento se registró durante el primer año de vida. Durante el segundo año, la tasa de crecimiento fue significativamente mayor en hembras que en machos. La talla de primera oviposición fue de 61,7 ± 3,5 cm LT, similar a la estimada en rayas silvestres. Sin embargo, las hembras criadas en cautiverio alcanzaron la madurez antes de los dos años de vida, es decir mucho antes que en el ambiente natural, lo que implica una plasticidad fenotípica significativa en esta especie. La similitud en la talla de madurez y la diferencia en la edad de madurez entre individuos cautivos y silvestres indican que hay un desacople de ambos parámetros mediado por la tasa de crecimiento. Los individuos nacidos en cautiverio se reprodujeron exitosamente y dejaron descendencia viable, lo que indica que el ambiente del Acuario Temaikèn es adecuado para que S. bonapartii complete su ciclo de vida.We analyzed growth and reproduction of captive-born smallnose fanskates Sympterygia bonapartii. Egg cases were obtained from oviposition of two females caught in the wild and held at Temaikèn Aquarium. Following hatching, growth was analyzed in 13 females and 21 males until sexual maturity. Pattern of oviposition activity and reproductive performance were evaluated in six of the captive-reared females. Four models were fitted to growth data, among which the logistic function was the one attaining the best fit. The highest growth rate for both sexes was recorded during the first year of life, whereas growth was significantly higher in females than in males during the second year. Size at first oviposition was 61.7 ± 3.5 cm TL, similar to wild specimens. However, captive-reared females reached maturity before two years of age, i.e. much earlier than wild skates, implying a significant phenotypic plasticity in this species. The similarity in size at maturity and the di ference in age at maturity between captive and wild specimens indicate that there is a decoupling of both parameters mediated through growth rates. Captive-born skates reproduced successfully and yielded viable offspring, indicating that the environment at Temaikèn Aquarium is suitable for S. bonapartii to attain its full life cycle.Fil: Jañez, Julieta. Fundación Temaikén; ArgentinaFil: Meijide, Fernando Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Biodiversidad y Biología Experimental y Aplicada; ArgentinaFil: Lucifora, Luis Omar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Biología Subtropical. Universidad Nacional de Misiones. Instituto de Biología Subtropical; ArgentinaFil: Abraham, Carolina. Fundación Temaikén; ArgentinaFil: Argemi, Federico. Fundación Temaikén; Argentin

Emerging patterns of species richness, diversity, population density, and distribution in the skates (Rajidae) of Alaska

Six years of bottom-trawl survey data, including over 6000 trawls covering over 200 km2 of bottom area throughout Alaska’s subarctic marine waters, were analyzed for patterns in species richness, diversity, density, and distribution of skates. The Bering Sea continental shelf and slope, Aleutian Islands, and Gulf of Alaska regions were stratified by geographic subregion and depth. Species richness and relative density of skates increased with depth to the shelf break in all regions. The Bering Sea shelf was dominated by the Alaska skate (Bathyraja parmifera), but species richness and diversity were low. On the Bering Sea slope, richness and diversity were higher in the shallow stratum, and relative density appeared higher in subregions dominated by canyons. In the Aleutian Islands and Gulf of Alaska, species richness and relative density were generally highest in the deepest depth strata. The data and distribution maps presented here are based on species-level data collected throughout the marine waters of Alaska, and this article represents the most comprehensive summary of the skate fauna of the region published to date

DNA barcoding unveils skate (Chondrichthyes: Rajidae) species diversity in ‘ray’ products sold across Ireland and the UK

Skates are widely consumed across the globe, but many large species are subject to considerable concern regarding their conservation and management. Within Europe such issues have recently driven policy changes so that, for the first time, reports of skate landings now have to be made under species-specific names. Total allowable catches have also been established for many groups, which have been set to zero for a number of the most vulnerable species (e.g., Dipturus batis, Raja undulata and Rostoraja alba. Whilst accurate species identification has become an important issue for landings, the sale of skates is still usually made under a blanket term of “skate” or “ray”. The matter of identifying species of skate is further complicated by their morphologically conservative nature and the fact that they are commercially valued for their wings. Thus, before sale their bodies are usually discarded (i.e., “winged”) and often skinned, making morphological identification impossible. For the first time, DNA barcoding (of the mitochondrial COI gene) was applied to samples of skate wings from retail outlets across the British Isles, providing insight into which species are sold for consumption. A total of 98 wing samples were analysed, revealing that six species were sold; blonde ray (Raja brachyura), spotted ray (Raja montagui), thornback ray (Raja clavata), cuckoo ray (Leucoraja naevus) small-eyed ray (Raja microocellata) and shagreen ray (Leucoraja fullonica). Statistical testing demonstrated that there were significant differences in the species sold in the distinct retail groups which suggests complex drivers behind the patterns of sale in skates. The results also indicate that endangered species are not commonly being passed on to consumers. In addition, the practice of selling skate wings under ambiguous labels is highlighted as it makes it extremely difficult for consumers to exercise a right to avoid species of conservation concern. Interestingly, a single retailer chain labelled their wings as originating from three smaller-growing species (generally to be considered of lower conservation concern); of the six samples analysed from this company a third were mislabelled and originated from the thornback ray (a larger species that is currently undergoing population declines)

Early life sensory ability—ventilatory responses of thornback ray embryos (Raja clavata) to predator-type electric fields

Predator avoidance is fundamental for survival and it can be particularly challenging for prey animals if physical movement away from a predatory threat is restricted. Many sharks and rays begin life within an egg capsule that is attached to the sea bed. The vulnerability of this sedentary life stage is exacerbated in skates (Rajidae) as the compulsory ventilatory activity of embryos makes them conspicuous to potential predators. Embryos can reduce this risk by mediating ventilatory activity if they detect the presence of a predator using an acute electrosense. To determine how early in embryonic life predator elicited behavioral responses can occur, the reactions of three different age groups (1/3 developed, 2/3 developed, and near hatching) of embryonic thornback rays Raja clavata were tested using predator-type electric field stimuli. Egg capsules were exposed to continuous or intermittent stimuli in order to assess varying predator-type encounter scenarios on the ventilatory behavior of different developmental stages. All embryos reacted with a “freeze response” following initial electric field (E-field) exposure, ceasing ventilatory behavior in response to predator presence, demonstrating electroreceptive functionality for the first time at the earliest possible stage in ontogeny. This ability coincided with the onset of egg ventilatory behavior and may represent an effective means to enhance survival. A continuous application of stimuli over time revealed that embryos can adapt their behavior and resume normal activity, whereas when presented intermittently, the E-field resulted in a significant reduction in overall ventilatory activity across all ages. Recovery from stimuli was significantly quicker in older embryos, potentially indicative of the trade-off between avoiding predation and adequate respiration. © 2015 Wiley Periodicals, Inc. Develop Neurobiol 76: 721–729, 201