3 research outputs found

    Сравнительный анализ протеомного профиля кератиноцитов HaCaT с использованием 1DE-гель концентрирования

    Get PDF
    Using tandem mass spectrometry with electrospray ionization, a comparative analysis of HaCaT keratinocyte proteins was carried out before and after exposure of cells to sodium dodecyl sulfate (25 mg/ml) for 48 hours; proteins encoded by human chromosome 18 genes were chosen as the comparison proteins. A total of 2418 proteins were detected in the HaCaT immortalized human keratinocytes, 70% of these proteins were identified by two or more unique peptides. Panoramic mass spectrometry analysis identified 38 proteins encoded by chromosome 18 genes, 27 proteins were common to control HaCaT cells and HaCaT cells exposed to SDS. Using the Metascape database (https://metascape.org), an enrichment analysis of GO terms of the Biological Process category of chromosome 18 gene encoded proteins of HaCaT keratinocytes was performed before and after the SDS exposure. The SDS exposure resulted in a slight enrichment of the GO term "response to stimulus" (GO:0050896) and the related GO term "negative regulation of biological process" (GO:0048519). We found decreased expression levels of membrane proteins encoded by chromosome 18 genes related to cell-cell adhesion (GO:0098609), such as DSC1, DSC3, and DSG1. A decrease in the expression level of desmosomal cadherins is characteristic of malignant neoplasms developing from epithelial tissue cells of various internal organs, mucous membranes, and skin. The method of preparation of HaCaT keratinocyte samples used in this work increased the sensitivity of proteomic analysis of cell culture and made it possible to identify twice as many proteins in one gel strip as compared to the number of proteins (1284) in HaCaT samples subjected to osmotic shock and cleavage by trypsin in solution.Проведена оценка протокола пробоподготовки образцов клеточной культуры кератиноцитов, основанного на солюбилизации белков в присутствии 0.2% додецилсульфата натрия (SDS), процедуре 1DE-гель концентрирования (SDS-PAGE без фракционирования в разделяющем геле) и расщеплении трипсином в геле для углубленного протеомного анализа кератиноцитов НаСаТ в одной полосе белка. С помощью тандемной масс-спектрометрии с электроспрейной ионизацией (LC-MS/MS) проведен сравнительный анализ белков кератиноцитов НаСаТ до и после воздействия SDS в субтоксической дозе (25 мг/мл) в течение 48 ч. В качестве белков сравнения выбраны белки, кодируемые генами хромосомы 18 человека. Всего в иммортализованных кератиноцитах человека линии НаСаТ обнаружено 2418 белков, из них около 70% идентифицировано по двум и более уникальным пептидам. По результатам панорамного масс-спектрометрического анализа удалось идентифицировать 38 белков, кодируемых генами хромосомы 18; из них 27 белков были общими для контрольных клеток и клеток НаСаТ, подвергнутых воздействию SDS. С использованием базы данных Metascape был проведен анализ обогащения терминами онтологии генов (GO) категории биологические процессы (biological process) белков хромосомы 18 кератиноцитов НаСаТ до и после воздействия SDS. Обработка клеточной культуры SDS приводила к незначительному обогащению GO термина “ответ на стимул” (GO:0050896 - response to stimulus) и связанного с ним GO термина “негативная регуляция биологических процессов” (GO:0048519 - negative regulation of biological process). Было обнаружено снижение уровня экспрессии мембранных белков, кодируемых генами хромосомы 18, относящихся к межклеточной адгезии (GO:0098609 - cell-cell adhesion), таких как DSC1, DSC3 и DSG1. Снижение уровня экспрессии десмосомальных кадгеринов характерно для злокачественных новообразований, развивающихся из клеток эпителиальной ткани различных внутренних органов, слизистых оболочек, кожи. Примененный в работе способ подготовки образцов кератиноцитов НаСаТ позволил идентифицировать в одной полосе геля в два раза больше белков по сравнению с образцами НаСаТ, подвергнутыми осмотическому шоку и расщеплению трипсином в растворе

    The structural genesis of a complex (MoVW)5O14(MoVW)_5O_{14} oxide during thermal treatments and its redox behavior at elevated temperatures

    No full text
    The structural genesis of a Mo0.68V0.23W0.09 oxide with Mo5O14-like structure has been examined. A precursor prepared by spray-drying of mixed aqueous metal salt solutions was calcined in air and subsequently treated in helium at different temperatures. X-ray diffraction, HRTEM, 51V MAS NMR, ESR, UV/Vis DR spectroscopy and oxygen and hydrogen adsorption measurements have been applied to monitor the preparation procedure. It was found that a structure closely related to that of Mo5O14 already appears at nano-scale level after calcination of the spray-dried precursor in air at 350°C. At this stage, the material comprises of crystalline particles less than 3 nm in size stabilized by an amorphous matrix. Further heating causes nano-structural rearrangements that lead to the formation of the final Mo0.68V0.23W0.09 oxide with phase-pure polycrystalline structure. Molybdenum and tungsten ions are hexavalent and coordinated in an octahedral environment. Furthermore, vanadium is present as V4+ and V5+ ions which partially occupy octahedral sites, whereas highly distorted trigonal pyramidal sites could be accommodated in pentagonal bipyramids of the Mo5O14 structure, however, displaced away from the center. According to the results of H2 and O2 adsorption the crystalline ternary oxide does not possess accessible micropores. Oxygen pulses at 450oC and reductive treatment with pure hydrogen at 300oC did not cause noticeable changes of the bulk structure thus indicating a remarkable structural stability of the complex MoVW oxide under redox conditions at elevated temperature

    Modern Trends of Organic Chemistry in Russian Universities

    No full text