6 research outputs found

    Effects of testicular blood flow changes on ram fertilizing capacity

    No full text
    Fertility is a factor which ensures the income and the financial status of the farms. Periodically evaluation of rams’ reproductive ability is necessary, based on the selection of males after clinical and laboratory evaluation. Ultrasonographic examination of rams’ genital system can be performed in addition to clinical examination, enhancing its reliability. Furthermore, assessment of ram semen quality provides complete laboratory evaluation of spermatozoa’s fertilizing ability, which in combination with the clinical and ultrasonographic examination, provides high prognostic accuracy of male fertility. The objectives of the present thesis were to investigate the effect of the factors that affect ram semen fertilizing ability (age, season, breeding or non-breeding period) during a whole year, by evaluating semen quality characteristics. Moreover, semen quality of very old Chios rams (9-13 years old) was assessed and the benefit of their prolonged preservation at flocks was evaluated. In addition, testicular hemodynamic and echogenicity changes were recorded during a whole year, and the influence of factors affecting testicular vasculature and echotexture (age, season, ejaculation, breeding or non-breeding period) was investigated. Moreover, ram semen quality characteristics were correlated with testicular hemodynamic and echogenicity indices of males of different age, during breeding and non-breeding period. The study was conducted at the Unit of Biotechnology of Reproduction, Farm Animals Clinic, Faculty of Veterinary Medicine, Aristotle University of Thessaloniki and at the Department of Reproduction and Artificial Insemination, Directorate of Veterinary Centre of Thessaloniki. The survey was performed on 7 Chios breed rams divided in two age groups: three rams of 2-6 years old (mature) and four rams of 9-13 years old (old). Semen was collected from each ram biweekly during a year (breeding and non-breeding period). Semen volume and concentration were measured, and sperm motility was assessed subjectively at the laboratory of the Department of Reproduction and Artificial Insemination. Afterwards, semen samples were diluted by Ovixcell® extender (37o C) in final concentration 250x106 spermatozoa/ml and were transported to the Unit of Biotechnology of Reproduction, where the appropriate methods were applied in order to evaluate the following parameters: (i) motility and kinetics (CASA), (ii) viability-membrane integrity (eosin-nigrosin stain), (iii) morphology (SpermBlue stain), (iv) sperm membrane biochemical functionality (Hypo-osmotic swelling test-HOST) and (v) chromatin (DNA) integrity (acridine orange test). The ultrasound Esaote MyLab™One equipped with a linear probe 7.5 MHz for Pulsed wave spectral Doppler, as well as B-mode trans-scrotal scanning, was used. Testicular ultrasonographic examination was performed 24 hours prior to and immediately after ejaculation, for each testis separately. Pulsed wave spectral Doppler was performed on testicular artery to measure (i) Pulsatility index (PI), (ii) Resistive index (RI), (iii) End-diastolic velocity (EDV), (iv) Diameter (D), (v) Time-averaged maximum velocity (TAVM) and (vi) Blood flow volume (BFV). Images by B-mode ultrasound scanning of ram testes parenchyma were analyzed to evaluate: (i) Entropy (E), (ii) Contrast (Con), (iii) Correlation (Cor), (iv) Gradient variance (GV), (v) Standard deviation (StD), (vi) Long run emphasis (LRunEm), (vii) Mean value (MV), (viii) Gray value distribution (GVD), (ix) Runlength distribution (RunLD) and (x) Gradient mean value (GMV). Concerning the results of the effect of season on ram semen quality characteristics, the percentage of hyperactivated spermatozoa was significantly higher in non-breeding, compared to breeding period (p=0.011). The percentage of head abnormalities was higher in non-breeding period (p=0.001), whereas the percentage of tail abnormalities was significantly higher in breeding compared to non-breeding period (p=0.022). Sperm membrane biochemical functionality exhibited seasonal activity since HOST+ spermatozoa were significantly fewer in non-breeding, compared to breeding period (p0.05). The investigation of the effect of season on testicular vascularity revealed higher PI and RI of both testes, before and after ejaculation, in breeding compared to non-breeding season (p0,05). Η διερεύνηση της επίδρασης της εποχικότητας στην αιμάτωση των όρχεων, οδήγησε σε υψηλότερες τιμές των δεικτών αντίστασης και παλμικότητας και των δύο όρχεων, τόσο πριν όσο και μετά την εκσπερμάτιση, κατά την ένοιστρη περίοδο συγκριτικά με την άνοιστρη (p<0,001). Επιπλέον, η διάμετρος της ορχικής αρτηρίας του αριστερού μόνο όρχη, καταγράφηκε μεγαλύτερη κατά την άνοιστρη περίοδο, σε σύγκριση με την ένοιστρη, πριν από την εκσπερμάτιση (p=0,012), αποτέλεσμα το οποίο διαπιστώθηκε και για την παράμετρο BFV (p<0,001). Σε ό,τι αφορά στην επίδραση της ηλικίας των κριών στην αιμάτωση των όρχεων, η διάμετρος της ορχικής αρτηρίας του δεξιού όρχη διαπιστώθηκε μεγαλύτερη στους υπερήλικες κριούς, τόσο πριν όσο και μετά την εκσπερμάτιση (p=0,038 και p<0,001, αντίστοιχα), ενώ του αριστερού όρχη, ήταν σημαντικά μεγαλύτερη μόνο μετά την εκσπερμάτιση (p=0,005). Επιπρόσθετα, ο δείκτης BFV του αριστερού όρχη παρατηρήθηκε μεγαλύτερος μετά την εκσπερμάτιση, στους υπερήλικες κριούς, σε σύγκριση με τους ενήλικες (p<0,001).Διερευνώντας τις εποχικές και ηλικιακές μεταβολές της αιμάτωσης και της ηχητικής υφής των όρχεων των κριών, διαπιστώθηκε ότι η τιμή της παραμέτρου GV του αριστερού όρχη πριν από την εκσπερμάτιση, ήταν μειωμένη κατά την ένοιστρη, συγκριτικά με την άνοιστρη περίοδο (p=0,01). Η τιμή της παραμέτρου Cor του αριστερού όρχη πριν την εκσπερμάτιση, καταγράφηκε μεγαλύτερη κατά την ένοιστρη, συγκριτικά με την άνοιστρη περίοδο (p=0,03). Παράλληλα, πριν την εκσπερμάτιση, οι τιμές των παραμέτρων Con και Cor του δεξιού όρχη διαπιστώθηκαν αυξημένες στην ομάδα των υπερήλικων κριών, ενώ μετά την εκσπερμάτιση, η τιμή της παραμέτρου Ent του δεξιού όρχη παρατηρήθηκε υψηλότερη στην ομάδα των ενήλικων κριών (p=0,03, p=0,05 και p=0,05, αντίστοιχα). Σχετικά με τη διερεύνηση της συσχέτισης μεταξύ των παραμέτρων του σπέρματος και της αιμάτωσης των όρχεων, διαπιστώθηκε ότι ο δείκτης παλμικότητας του αριστερού όρχη των ενήλικων κριών συσχετίσθηκε αρνητικά με τη συγκέντρωση των σπερματοζωαρίων, μετά την εκσπερμάτιση, κατά την ένοιστρη περίοδο (r=-0,5, n=33, p=0,003). Επιπλέον, ο δείκτης αντίστασης και των δύο όρχεων, συσχετίσθηκε αρνητικά πριν την εκσπερμάτιση με τις συνολικές μορφολογικές ανωμαλίες (r=-0,5, n=33, p=0,008/r=-0,4, n=33, p=0,01, αντίστοιχα) και με τις ανωμαλίες της ουράς των σπερματοζωαρίων (r=-0,5, n=33, p=0,004/p=0,008, αντίστοιχα). Κατά την άνοιστρη περίοδο, ο δείκτης παλμικότητας του αριστερού και ο δείκτης αντίστασης του δεξιού όρχη των ενήλικων κριών πριν την εκσπερμάτιση, συσχετίσθηκαν θετικά με τον όγκο του εκσπερματίσματος (r=0,4, n=45, p=0,013 και r=0,6, n=45, p<0,001, αντίστοιχα). Οι δείκτες LRunEm, GVD και RunLD του δεξιού όρχη των υπερήλικων κριών συσχετίσθηκαν αρνητικά κατά την ένοιστρη περίοδο αμέσως μετά την εκσπερμάτιση, με τη βλάβη του DNA των σπερματοζωαρίων (r=-0,9, n=44, p<0,001). Σε ό,τι αφορά στους ενήλικες κριούς, μόνο ο δείκτης LRunEm του δεξιού όρχη συσχετίσθηκε αρνητικά με τη συγκεκριμένη παράμετρο του σπέρματος, πριν την εκσπερμάτιση (r=-0,6, n=33, p=0,001). Επιπλέον, στην ίδια ομάδα κριών, κατά την άνοιστρη περίοδο, ο δείκτης LRunEm του αριστερού όρχη συσχετίσθηκε αρνητικά με τις ανωμαλίες της ουράς και τις συνολικές μορφολογικές ανωμαλίες των σπερματοζωαρίων (r=-0,8/r=-0,7, n=45, p<0,001). Επιπρόσθετα, ο δείκτης Con συσχετίστηκε κατά τη διάρκεια της άνοιστρης περιόδου μετά την εκσπερμάτιση, με τα ακίνητα και τα ζωντανά σπερματοζωάρια (r=-0,6/r=0,6, n=60, p<0,001). Συνοψίζοντας, η ολοκλήρωση της παρούσας διατριβής οδήγησε στα ακόλουθα συμπεράσματα: (i) η εποχικότητα επηρεάζει ορισμένα ποιοτικά χαρακτηριστικά του σπέρματος (WOB, υπερκινητικότητα, ανωμαλίες κεφαλής και ουράς των σπερματοζωαρίων, αντοχή των σπερματοζωαρίων έναντι της καταπόνησης σε υπό-ωσμωτικό διάλυμα), (ii) η ποιότητα του σπέρματος των υπερήλικων κριών διατηρείται σε υψηλά επίπεδα, καθιστώντας χρήσιμη την παραμονή τους στα ποίμνια, (iii) οι τιμές των αιμοδυναμικών δεικτών και των παραμέτρων της ηχητικής υφής των όρχεων των κριών δεν μεταβάλλονται σημαντικά μετά την εκσπερμάτιση, (iv) οι κύριοι δείκτες της αιμάτωσης των όρχεων (PI, RI) επηρεάζονται από την εποχικότητα, αλλά όχι από την ηλικία των κριών, (v) οι τιμές ορισμένων μόνο παραμέτρων της ηχητικής υφής των όρχεων επηρεάζονται από την εποχικότητα και την ηλικία των κριών (GV, Cor, Con, Ent), (vi) οι μεταβολές της αιμάτωσης και της ηχητικής υφής των όρχεων εμφανίζουν μέτριας ισχύος συσχέτιση με τις παραμέτρους του σπέρματος, υπό την επίδραση των παραγόντων της εποχής, της εκσπερμάτισης και της ηλικίας των κριών και (vii) αποδεικνύεται η χρησιμότητα της διά των υπερήχων εξέτασης των όρχεων με τις τεχνικές B-mode και Doppler για την παροχή πρόσθετων πληροφοριών, οι οποίες σε συνδυασμό με την εργαστηριακή ανάλυση του σπέρματος, συμβάλλουν στην ασφαλέστερη επιλογή κατάλληλων κριών για την αναπαραγωγική διαδικασία

    The Role of Ewes&rsquo; Udder Health on Echotexture and Blood Flow Changes during the Dry and Lactation Periods

    No full text
    The objective of the current study was to investigate the echotextural and hemodynamic changes of ewes entering the dry period with or without subclinical mastitis. B-mode and color Doppler ultrasonography were applied to 12 Chios ewes (6 with healthy udders (group A) and 6 with subclinical mastitis (group B)) before the dry period, during the dry period (the involution phase, steady state, and transition phase), and postpartum. The color Doppler of the mammary arteries was used to evaluate them according to the pulsatility index (PI), resistive index (RI), end-diastolic velocity (EDV), time-averaged maximum velocity (TAMV), blood flow volume (BFV), and artery diameter (D). Udder parenchyma images, analyzed by Echovet v2.0, were used to evaluate the mean value (MV), standard deviation (SD), gradient mean value (GMV), gradient variance (GV), contrast (Con), entropy (Ent), gray value distribution (GVD), run length distribution (RunLD), and long run emphasis (LRunEm). In the involution phase, the PI was higher in group B compared to group A (p &le; 0.05). The PI and RI were higher postpartum, whereas the EDV, TAVM, and D were higher in the transition phase (p &le; 0.05). Neither the period nor the ewe group affected the MV, SD, GMV, GV, Con, and GVD values (p &le; 0.05). In the steady state, the LRunEm was higher in group B, but postpartum, it was higher in group A (p &le; 0.05). In conclusion, B-mode and Doppler can reveal differences (i) between healthy ewes and ewes with subclinical mastitis and (ii) among the different periods studied. Further research is needed on the blood flow and echotexture indices of the udders of ewes with unilateral subclinical mastitis

    Effect of Toxoplasma gondii on Ram Sperm Quality after Experimental Infection

    No full text
    International audienceThe aim of this study was to investigate the effect of experimental Toxoplasma gondii infection on ram sperm quality. Five months old, pre-pubertal, rams were divided into four groups (n = 8 per group). Group A was the control group; the remaining animals received per os (p.o.) 5000 oocysts per ram. Group B did not receive treatment post-infection (p.i.). Group C received sulphadimidine (intermuscular injection (i.m.) 33 mg/kg for eight days; every 48 h) two months p.i. and Group D received the same drug twice (24 h p.i. and two months later). Blood samples were collected every 15 days to detect serum immunoglobulin G (IgG). Epididymal sperm samples were analyzed for concentration, kinetics, morphology/viability, functional membrane integrity, DNA integrity, and the presence of parasite DNA. Histopathological examination was performed on the testes. The IgG titres in infected groups raised two weeks p.i. and remained high for four months. Higher values were noticed in viability and functional membrane integrity in positive spermatozoa in the control group compared to other groups, level of significance p < 0.05. Abnormal sperm was higher in groups C and D vs. A and C vs. B (p < 0.05). T. gondii DNA was detected in three sperm samples of the infected rams (12.5%). Histopathology revealed similar findings with little variation among all infected groups, characterized mostly by increased interstitial connective tissue, non-purulent inflammation, and presence of seminiferous tubules with spermatogenic cell depletion, which increased gradually from D to C and B groups. In conclusion Toxoplasmosis in pre-pubertal age negatively affected mature ram sperm quality, while sulphadimidine administration failed to alter this

    Iron Oxide Nanoparticles as an Alternative to Antibiotics Additive on Extended Boar Semen

    No full text
    This study examined the effect of Fe3O4 nanoparticles on boar semen. Beltsville thawing solution without antibiotics was used to extend ejaculates from 5 boars (4 ejaculates/boar). Semen samples of control group (C) and group with Fe3O4 (Fe; 0.192 mg/mL semen) were incubated under routine boar semen storage temperature (17 &deg;C) for 0.5 h and nanoparticles were removed by a magnetic field. Before and after treatment, aliquots of all groups were cultured using standard microbiological methods. The samples after treatment were stored (17 &deg;C) for 48 h and sperm parameters (computer-assisted sperm analyzer (CASA) variables; morphology; viability; hypo-osmotic swelling test (HOST); DNA integrity) were evaluated at storage times 0, 24, 48 h. Semen data were analyzed by a repeated measures mixed model and microbial data with Student&rsquo;s t-test for paired samples. Regarding CASA parameters, Fe group did not differ from C at any time point. In group C, total motility after 24 h and progressive motility after 48 h of storage decreased significantly compared to 0 h. In group Fe, linearity (LIN) after 48 h and head abnormalities after 24 h of storage increased significantly compared to 0 h. The microbiological results revealed a significant reduction of the bacterial load in group Fe compared to control at both 24 and 48 h. In conclusion, the use of Fe3O4 nanoparticles during semen processing provided a slight anti-microbiological effect with no adverse effects on sperm characteristics

    Toxic and Microbiological Effects of Iron Oxide and Silver Nanoparticles as Additives on Extended Ram Semen

    No full text
    The aim of the study was to investigate the effect of iron oxide (Fe) and silver (Ag) nanoparticles (NPs) on ram semen. A skim milk extender without antibiotics was used as a diluent of 21 ejaculates (8 rams; 2–3 ejaculates/ram). The groups of control (C; semen without NPs), Fe NPs (3.072 mg Fe3O4/mL semen), and Ag NPs (2.048 mg Ag-Fe/mL semen) were incubated (15 °C; 30 min), and then a magnetic field was used for NPs’ removal. Standard microbiological procedures were performed for all groups. Post-treated samples were stored (15 °C) for 24 h, and sperm variables (kinetics by computer assisted sperm analysis (CASA); viability; morphology; HOST; DNA integrity) were evaluated at 6 and 24 h. Semen data were analyzed by a mixed model for repeated measures and microbiological data with Student’s t-test for paired samples. At 6 h of storage, VCL and rapid movement-spermatozoa, and at 24 h, total/progressive motility and amplitude of lateral head displacement (ALH) were significantly decreased in group Ag compared to control. In group Fe, progressive/rapid movement-spermatozoa were significantly lower compared to control after 24 h of storage. Only in group Ag was a significant reduction of total bacterial count revealed. In conclusion, the examined Fe NPs demonstrated slight antibacterial effect, while the examined Ag NPs provided higher antibacterial properties accompanied by cytotoxicity
    corecore