Alteraciones morfológicas en riñones de ratas sometidos a isquemia reperfusión

Fundamento: La isquemia reperfusión renal es un proceso en donde se involucra una serie de eventos que pueden conducir al daño y muerte celular. Objetivo: Determinar las modificaciones morfológicas que se producen en el riñón a medida que progresa el tiempo en el proceso de isquemia reperfusión. Métodos: Se utilizó como muestra un grupo de 35 ratas Wistar, machos, que fueron divididos en cinco grupos de siete ratas cada uno. Al subgrupo que no se le provocó isquemia se le denominó control (C) y al resto se les nombró experimentales (E). El subgrupo experimental E- I fue sometido a 15 minutos de isquemia, el E-II a 30 minutos, el E-III a 45 minutos y el E-IV a una hora. Luego se tomaron muestras de tejido renal para estudio morfométrico. Resultados: Se produjo una reducción significativa del número de glomérulos y de la fracción de área ocupada por estos tras isquemia reperfusión temporal de 15 minutos (EI), la que parece ser reversible por la ligera mejoría observada tras 30 minutos (EII) a partir del cual sigue recayendo hasta después de una hora de isquemia reperfusión (EIV). Conclusiones: La combinación de isquemia con reperfusión supera el tiempo crítico para provocar lesión irreversible celular del tejido renal

A isquemia/reperfusão intestinal provoca hiper-reatividade brônquica e aumento do TNF-alfa sérico em ratos

INTRODUCTION: Intestinal or hepatic ischemia/reperfusion induces acute lung injury in animal models of multiple organ failure. Tumor necrosis factor (TNF)- alpha is involved in the underlying inflammatory mechanism of acute respiratory distress syndrome. Although the inflammatory cascade leading to acute respiratory distress syndrome has been extensively investigated, the mechanical components of acute respiratory distress syndrome are not fully understood. Our hypothesis is that splanchnic ischemia/reperfusion increases airway reactivity and serum TNF-alpha levels. OBJECTIVE: To assess bronchial smooth muscle reactivity under methacholine stimulation, and to measure serum TNF-alpha levels following intestinal and/or hepatic ischemia/reperfusion in rats. METHOD: Rats were subjected to 45 minutes of intestinal ischemia, or 20 minutes of hepatic ischemia, or to both (double ischemia), or sham procedures (control), followed by 120 minutes of reperfusion. The animals were then sacrificed, and the bronchial response to increasing methacholine molar concentrations (10-7 to 3 x 10-4) was evaluated in an ex-vivo bronchial muscle preparation. Serum TNF-alpha was determined by the L929-cell bioassay. RESULTS: Bronchial response (g/100 mg tissue) showed increased reactivity to increasing methacholine concentrations in the intestinal ischemia and double ischemia groups, but not in the hepatic ischemia group. Similarly, serum TNF-alpha (pg/mL) concentration was increased in the intestinal ischemia and double ischemia groups, but not in the hepatic ischemia group. CONCLUSION: Intestinal ischemia, either isolated or associated with hepatic ischemia, increased bronchial smooth muscle reactivity, suggesting a possible role for bronchial constriction in respiratory dysfunction following splanchnic ischemia/reperfusion. This increase occurred in concomitance with serum TNF-alpha increase, but whether the increase in TNF-alpha caused this bronchial contractility remains to be determined.INTRODUCÃO: A isquemia/reperfusão intestinal ou hepática induz lesão pulmonar aguda em modelos animais de falência de múltiplos órgãos. O fator de necrose tumoral (TNF-alfa) está envolvido no mecanismo inflamatório da síndrome da angústia respiratória aguda. Embora a cascata inflamatória que leva à síndrome da angústia respiratória aguda tenha sido extensamente investigada, os componentes mecânicos desta ainda não são completamente compreendidos. Nós levantamos a hipótese de que a isquemia/reperfusão esplâncnica provoca aumento da reatividade contráctil das vias aéreas, bem como aumento do TNF-alfa sérico. OBJETIVO: avaliar a reatividade da musculatura lisa brônquica sob estimulação com metacolina, e medir os níveis séricos de TNF-alfa após isquemia/reperfusão intestinal e/ou hepática em ratos. MÉTODO: Ratos Wistar foram submetidos a 45 min de isquemia intestinal, ou 20 minutos de isquemia hepática, ou a ambas (isquemia dupla), ou controle, seguidos por 120 min de reperfusão. A resposta brônquica a concentrações molares (10-7 to 3x10-4) de metacolina foi avaliada usando-se uma preparação ex-vivo de musculatura brônquica. RESULTADOS: A resposta brônquica (g/100mg de tecido) mostrou reatividade aumentada a concentrações crescentes de metacolina na isquemia intestinal e isquemia dupla, mas não na isquemia hepática. Similarmente, o TNF-alfa sérico aumentou na isquemia intestinal e isquemia dupla, mas não na isquemia hepática. CONCLUSÃO: Isquemia intestinal, quer isolada ou associada à hepática, provocou hiper-reatividade da musculatura brônquica, sugerindo um possível papel da constrição brônquica na disfunção respiratória conseqüente à isquemia/reperfusão esplâncnica. Este aumento foi simultâneo ao do TNF-alfa sérico, porém o possível efeito causal do TNF-alfa na contractilidade brônquica permanece a ser determinado

A isquemia/reperfusão intestinal provoca hiper-reatividade brônquica e aumento do TNF-alfa sérico em ratos

INTRODUCTION: Intestinal or hepatic ischemia/reperfusion induces acute lung injury in animal models of multiple organ failure. Tumor necrosis factor (TNF)- alpha is involved in the underlying inflammatory mechanism of acute respiratory distress syndrome. Although the inflammatory cascade leading to acute respiratory distress syndrome has been extensively investigated, the mechanical components of acute respiratory distress syndrome are not fully understood. Our hypothesis is that splanchnic ischemia/reperfusion increases airway reactivity and serum TNF-alpha levels. OBJECTIVE: To assess bronchial smooth muscle reactivity under methacholine stimulation, and to measure serum TNF-alpha levels following intestinal and/or hepatic ischemia/reperfusion in rats. METHOD: Rats were subjected to 45 minutes of intestinal ischemia, or 20 minutes of hepatic ischemia, or to both (double ischemia), or sham procedures (control), followed by 120 minutes of reperfusion. The animals were then sacrificed, and the bronchial response to increasing methacholine molar concentrations (10-7 to 3 x 10-4) was evaluated in an ex-vivo bronchial muscle preparation. Serum TNF-alpha was determined by the L929-cell bioassay. RESULTS: Bronchial response (g/100 mg tissue) showed increased reactivity to increasing methacholine concentrations in the intestinal ischemia and double ischemia groups, but not in the hepatic ischemia group. Similarly, serum TNF-alpha (pg/mL) concentration was increased in the intestinal ischemia and double ischemia groups, but not in the hepatic ischemia group. CONCLUSION: Intestinal ischemia, either isolated or associated with hepatic ischemia, increased bronchial smooth muscle reactivity, suggesting a possible role for bronchial constriction in respiratory dysfunction following splanchnic ischemia/reperfusion. This increase occurred in concomitance with serum TNF-alpha increase, but whether the increase in TNF-alpha caused this bronchial contractility remains to be determined.INTRODUCÃO: A isquemia/reperfusão intestinal ou hepática induz lesão pulmonar aguda em modelos animais de falência de múltiplos órgãos. O fator de necrose tumoral (TNF-alfa) está envolvido no mecanismo inflamatório da síndrome da angústia respiratória aguda. Embora a cascata inflamatória que leva à síndrome da angústia respiratória aguda tenha sido extensamente investigada, os componentes mecânicos desta ainda não são completamente compreendidos. Nós levantamos a hipótese de que a isquemia/reperfusão esplâncnica provoca aumento da reatividade contráctil das vias aéreas, bem como aumento do TNF-alfa sérico. OBJETIVO: avaliar a reatividade da musculatura lisa brônquica sob estimulação com metacolina, e medir os níveis séricos de TNF-alfa após isquemia/reperfusão intestinal e/ou hepática em ratos. MÉTODO: Ratos Wistar foram submetidos a 45 min de isquemia intestinal, ou 20 minutos de isquemia hepática, ou a ambas (isquemia dupla), ou controle, seguidos por 120 min de reperfusão. A resposta brônquica a concentrações molares (10-7 to 3x10-4) de metacolina foi avaliada usando-se uma preparação ex-vivo de musculatura brônquica. RESULTADOS: A resposta brônquica (g/100mg de tecido) mostrou reatividade aumentada a concentrações crescentes de metacolina na isquemia intestinal e isquemia dupla, mas não na isquemia hepática. Similarmente, o TNF-alfa sérico aumentou na isquemia intestinal e isquemia dupla, mas não na isquemia hepática. CONCLUSÃO: Isquemia intestinal, quer isolada ou associada à hepática, provocou hiper-reatividade da musculatura brônquica, sugerindo um possível papel da constrição brônquica na disfunção respiratória conseqüente à isquemia/reperfusão esplâncnica. Este aumento foi simultâneo ao do TNF-alfa sérico, porém o possível efeito causal do TNF-alfa na contractilidade brônquica permanece a ser determinado

Effects of angiotensin-I and ischemia on functional recovery in isolated hearts

FUNDAMENTO: A ressuscitação de parada cardíaca pode apresentar disfunção miocárdica determinada pelo tempo da isquemia, e a inibição da enzima conversora de angiotensina (ECA) pode reduzir a disfunção cardíaca durante a reperfusão. OBJETIVO: Investigar os efeitos da angiotensina-I e diferentes períodos de isquemia na recuperação funcional em corações de ratos isolados. MÉTODOS: Os corações isolados de ratos Wistar (n = 45; 250-300 g) foram submetidos a diferentes períodos de isquemia global (20, 25 ou 30 min) e reperfundidos (30 min) com o tampão Krebs-Henseleit, ou com a adição de 400 nmol/L de angiotensina-I, ou com 400 nmol/L de angiotensina-I + 100 µmol/L de captopril durante o período de reperfusão. RESULTADOS: A derivada positiva máxima de pressão (+dP/dt max) e o produto frequência-pressão foram reduzidos nos corações expostos à isquemia de 25 min (~ 73%) e à isquemia de 30 min (~ 80%) vs. isquemia de 20 min. A pressão diastólica final do ventrículo esquerdo (PDFVE) e a pressão de perfusão (PP) foram aumentadas nos corações expostos à isquemia de 25 min (5,5 e 1,08 vezes, respectivamente) e à isquemia de 30 min (6 e 1,10 vezes, respectivamente) vs. isquemia de 20 min. A angiotensina-I ocasionou uma diminuição no +dP/dt max e no produto frequência-pressão (~ 85-94%) em todos os períodos de isquemia e um aumento na PDFVE e na PP (6,9 e 1,25 vezes, respectivamente) apenas na isquemia de 20 min. O captopril foi capaz de reverter parcial ou completamente os efeitos da angiotensina-I na recuperação funcional nas isquemias de 20 e 25 min CONCLUSÃO: Os dados sugerem que a angiotensina-II participa direta ou indiretamente no dano pós-isquêmico e que a capacidade de um inibidor da ECA atenuar esse dano depende do tempo de isquemia.BACKGROUND: Cardiac arrest resuscitation can present myocardial dysfunction determined by ischemic time, and inhibition of the angiotensin-converting enzyme (ACE) can reduce cardiac dysfunction during reperfusion. OBJECTIVE: To investigate the effects of angiotensin-I and different periods of ischemia on functional recovery in isolated rat hearts. METHODS: Isolated hearts from Wistar rats (n=45; 250-300 g) were submitted to different periods of global ischemia (20, 25 or 30 min) and reperfused (30 min) with Krebs-Henseleit buffer alone or with the addition of 400 nmol/L angiotensin-I, or 400 nmol/L angiotensin-I + 100 mmol/L captopril along the reperfusion period. RESULTS: The maximal positive derivative of pressure (+dP/dt max) and rate-pressure product were reduced in hearts exposed to 25 min ischemia (~73%) and 30 min ischemia (~80%) vs. 20 min ischemia. Left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP) and perfusion pressure (PP) were increased in hearts exposed to 25 min ischemia (5.5 and 1.08 fold, respectively) and 30 min ischemia (6 and 1.10 fold, respectively) vs. 20 min ischemia. Angiotensin-I caused a decrease in +dP/dt max and rate-pressure product (~85-94%) in all ischemic periods and an increase in LVEDP and PP (6.9 and 1.25 fold, respectively) only at 20 min ischemia. Captopril was able to partially or completely reverse the effects of angiotensin-I on functional recovery in 20 min and 25 min ischemia. CONCLUSION: These data suggest that angiotensin-II directly or indirectly participates in the post-ischemic damage, and the ability of an ACE inhibitor to attenuate this damage depends on ischemic time.Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nivel Superior (CAPES)CNPqFAPESPFAPERG

Cardioprotective effects of exogenous and endogenous hydrocortisone in the rabbit model of ischemia-reperfusion Efectos cardioprotectores de la hidrocortisona exógena y endógena en el modelo isquemia-reperfusión de conejo

Reducing the infarct size in acute myocardial infarction is one of the most important goals driving new drug research and development. During the last two decades, many clinical studies have found cardioprotective effects of corticosteroids, but their exact role in ischemic preconditioning remains questionable. The aim of the present study was to determine the protective effects of hydrocortisone sodium succinate on myocardial preconditioning in rabbit hearts. Twenty-four male New Zealand rabbits were divided randomly & equally in four groups: 1) control, 2) Infarct, 3) Ischemic preconditioning (IP) and 4) Hydrocortisone (HYD). The HYD group received 50mg/kg Hydrocortisone 45min before major ischemia. Serum levels of cardiac troponin-T(cTNT) and cortisole were measured before and after the protocols. Triphenyl-tetrazolium chloride staining was used to determine the infarcted area. In the present study, exogenous hydrocortisone decreased infarct size by 53 in comparison to the infarct group. Serum level of cortisole was increased in the IP and HYD groups, and was significant in the HYD group (p0.01). In conclusion, we showed that hydrocortisone has cardioprotective effects when injected before the onset of myocardial infarction. In addition, we have proposed for the first time that endogenous hydrocortisone may play a role in ischemic preconditioning phenomena

Efeito protetor do pré-tratamento com ácido ascóbico em modelo experimental de isquemia-reperfusão intestinal: um estudo histomorfométrico

BACKGROUND: Ascorbic acid has shown promise in attenuation of intestinal ischemia-reperfusion (I/R) injury. The aim of this study was to determine the protective effects of ascorbic acid on intestinal morphology during IR injury in rats. MATERIALS AND METHODS: We examined morphological changes in the small intestine of Wistar rats after (i) 40 minutes of ischemia (I), (ii) ischemia followed by 30 min of reperfusion (IR), (iii) ischemia with ascorbic acid (IA), (iv) ischemia followed by reperfusion and ascorbic acid (IRA) and (v) in a sham group (S). We used morphometry to evaluate the amount of villous architecture, crypts, necrosis, hemorrhagic infarcts and inflammatory cells at the mesenteric and antimesenteric borders of the small intestine. RESULTS: Ascorbic acid caused a significant reduction of antimesenteric villous hemorrhagic infarction (pINTRODUÇÃO: O ácido ascórbico tem se mostrado como um agente promissor na atenuação da lesão causada pela isquemia/reperfusão (IR). O objetivo deste estudo foi determinar os efeitos protetores do ácido ascórbico na morfologia intestinal durante a IR em ratos. MATERIAL E MÉTODOS: Examinamos alterações morfológicas no intestino delgado de ratos do tipo Wistar. Após 40 minutos de isquemia (I), isquemia seguida de reperfusão (IR), isquemia com tratamento com ácido ascórbico (IA), isquemia seguida por 30 minutos de reperfusão e tratamento com ácido ascórbico (IRA) e do grupo sham (S). Utilizamos a morfometria para avaliar quantitativamente a arquitetura dos vilos da mucosa intestinal, criptas intestinais, necrose, hemorragia, células inflamatórias nas bordas mesentéricas e antimesentéricas do intestino delgado. RESULTADOS: O ácido ascórbico causou uma redução significativa (

Evaluación de la eficacia de la angioplastia transluminal percutánea en pacientes con isquemia crónica de miembros inferiores

El presente trabajo tiene como propósito demostrar la utilidad de la angioplastia transluminal percutánea (ATP) como una opción terapéutica en pacientes con isquemia crítica de miembros inferiores (MsIs). Se realizó un estudio descriptivo retrospectivo con serie de casos. Durante un período de 33 meses, entre mayo de 2008 y enero de 2011, fueron tratados por vía endovascular por medio de ATP como primera opción terapéutica, 46 pacientes, de los cuales fueron 26 hombres (56%) y 20 mujeres (44%) con isquemia crítica de MsIs según clasificación de Fontaine (grados III y IV), no revascularizables quirúrgicamente. El manejo y control postoperatorio fueron realizados por un grupo de especialistas en Cirugía Vascular y Radiología Intervencionista durante un periodo de 3 meses. El estudio permitió determinar que la ATP, es una excelente opción terapéutica de primera elección en pacientes con isquemia crítica de MsIs que tienen un elevado riesgo de amputació

M1 inhibition dependency on slowing of muscle relaxation after brief and fast fatiguing repetitive movements: preliminary results

[Abstract] This work presents preliminary results on the association between central and peripheral expressions of muscle fatigue induced by unresisted repetitive movements. We tested cortico-spinal excitability and intra-cortical inhibition right at the end of 30 s of maximal rate finger tapping (ft) or after 10 s of rest; the contractile properties of the muscle were also tested. This procedure was repeated 12 times. In half of the repetitions, the evaluation was done during induced muscle isquemia. In all cases ft rate decreased during the 30 s of task. Isquemia produced a slowing of muscle contractile properties in all cases, after ft as well as after 10 s of rest post-ft. Intracortical inhibition increased immediately after ft, but recovered after 10 s, regardless the presence of muscle isquemia. Our results suggest that the increment of inhibition in M1 after fatiguing repetitive movements is central in origin, and not an adaptation to the slowed contractility of the muscle.Ministerio de Economía y Competitividad; DEP2017-87601-

Efectos de la substitución de conexina 43 por conexina 32 en la tolerancia a la isquemia y en la protección por precondicionamiento en corazones aislados de ratón

La conexina 43 es una proteína que juega un papel importante en la fisiopatología de la isquemia - reperfusión y en la señalización de la protección cardíaca. Para investigar si este papel está relacionado con las propiedades específicas de esta isoforma, se utilizó un modelo de corazón aislado de ratones transgénicos knock-in, en los que la conexina 43 se reemplazó por conexina 32. Los resultados de este trabajo demuestran un efecto modulador de la conexina 43 en el metabolismo energético, en la tolerancia a la isquemia y en la protección por precondicionamiento, mediante mecanismos específicos de esta isoforma

ISCHEMIC AND REPERFUSION SYNDROME OF HIND LIMBS: FUNCTIONAL AND HISTOLOGICAL RENAL CHANGES IN RATS

Lesão isquêmica e reperfusão das extremidades pode resultar em síndrome metabólica sistêmica, grave e complexa, caracterizada por insuficiência renal aguda, mioglobinúria, acidose metabólica, produção acentuada de radicais livres e hipercalemia. Neste estudo, investigamos as alterações funcionais e histológicas dos rins após isquemia e reperfusão dos músculos esqueléticos dos membros posteriores. Os ratos foram submetidos à ligadura da aorta infra-renal por 6 e 12 h. Os animais foram randomizados em quatro grupos de 10 ratos: Grupo I, 6 h de isquemia e 24 h de reperfusão; Grupo II, 12 h de isquemia e 24 h de reperfusão; Grupo III, 6 h de isquemia e 10 dias de reperfusão; Grupo IV sham, sem isquemia ou reperfusão. Amostras de sangue ao término da experiência e o volume de urina nas primeiras 24 h de reperfusão no grupo I e II; e no último dia no grupo III foram coletadas para análise funcional. Os parâmetros da função renal estudados foram: creatinina plasmática, depuração de creatinina e a relação urinária do sódio urinário/creatinina. Histologicamente, avaliamos semi-quantitativamente, o índice de lesões túbulo-intersticiais. Os resultados evidenciaram aumento dos níveis plasmáticos de creatinina e alterações estruturais nos rins dos animais dos grupos com isquemia e reperfusão. Dez dias após a reperfusão houve recuperação da função renal embora as alterações histológicas ainda persistissem.Ischemic and reperfusion injury of the extremities may result in a systemic, severe and complex metabolic syndrome, manifested by acute renal failure, myoglobinuria, metabolic acidosis, hipercalemia and free radicals releasing. We investigated the functional and histologic renal changes after ischemia and reperfusion of the hind limb skeletal muscles. Rats were submitted to the ligature of the infrarenal aorta for 6 and 12 h. The animals were then randomized into four groups of 10 rats: Group I, 6 h of ischemia and 24 h of reperfusion; Group II, 12 h of ischemia and 24 h of reperfusion; Group III, 6 h of ischemia and 10 days of reperfusion; and Group IV, Group sham with no ischemia or reperfusion. Blood samples at the end of the experiment and urine volume in the first 24 h of reperfusion in group I and II and in the last day in group III for functional analysis were collected. The folowing renal functional parameters were studied: creatinine plasmatic level, creatinine depuration and sodium urinary/creatinine urinary ratio. The kidneys were removed and a histological tubulo-interstitial lesional index was evaluated for each animal. We found higher plasma creatinine levels and morphologic changes in groups submitted to ischemia and reperfusion. Ten days after reperfusion, the histologic changes persisted despite the recovery of renal function