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Adaptation of method of analysis of methemoglobin as a biomarker of effect of exposure to the pesticide Diflubenzuron

By Cristiane Barata-Silva, Tatyane Pereira dos Santos, Adherlene Vieira Govêa, Ariane Leites Larentis, Josino Costa Moreira and Paula de Novaes Sarcinelli

Abstract

Este trabalho teve como objetivo adaptar a análise de meta-hemoglobina recomendado por Evelyn-Malloy (espectrofotometria visível), a fim de facilitar a sua aplicação no campo, ou para análise em laboratório clínico, de sites existentes de aplicação diflubenzuron. Os parâmetros alterados foram: velocidade de rotação centrífuga; o tempo entre a recolha da amostra biológica e análise, e da temperatura de armazenamento das amostras; e o volume de reagentes. A comparação da velocidade de rotação (rpm) da metodologia de referência com o número de rotações de um "centrífuga clínica" não revelou uma diferença estatisticamente significativa nos níveis de metemoglobina. O tempo entre a recolha de amostras e análise biológica foi prorrogado por um período de até 48 horas para a conservação por refrigeração e temperatura ambiente, produzindo nenhuma diferença estatisticamente significativa quando comparado com o período padrão de 2 horas. Em relação aos reagentes, a metodologia de referência já utiliza o volume necessário para assegurar a reacção completa, enquanto que uma gama mais ampla do volume recomendado para uma redução de 5 vezes em comparação com a metodologia de referência pode ser utilizado. Concluiu-se que as alterações propostas à metodologia de adaptação da análise são aplicáveis a estudos de campo / exposição no local de trabalho e assegurar a fiabilidade dos resultados. A metodologia foi adaptada inter-laboratórios validado e os parâmetros alterados podem ser seleccionados de acordo com os requisitos do laboratório no qual a metemoglobina é para ser medida.This work aimed to adapt the analysis of methemoglobin recommended by Evelyn - Malloy (visible spectrophotometry), in order to facilitate its application in the field, or to analysis in clinical laboratory, of existing sites of diflubenzuron application. The parameters changed included: centrifuge rotation speed; time between the collection of biological sample and analysis, and storage temperature of the samples; and the volume of reagents. The comparison of the rotation speed (rpm) of the reference methodology with the rpm of a "clinical centrifuge" did not reveal a statistically significant difference in the levels of methemoglobin. The time between the collection of biological sample and analysis was extended for a period of up to 48 hours for both conservation by refrigeration and ambient temperature, producing no statistically significant difference when compared to the standard duration of 2 hours. Regarding the reagents, the reference methodology already uses the volume necessary to ensure complete reaction, whereas a wider range from the recommended volume to a 5-fold reduction in comparison to the reference methodology could be used. It was concluded that the proposed changes to the methodology for adapting the analysis are applicable to studies of field / workplace exposure and ensure the reliability of results. The adapted methodology was inter-laboratory validated and the parameters changed can be selected according to the requirements of the laboratory at which the methemoglobin is to be measured

Topics: Diflubenzuron, Metemoglobina, Espectrofotômetria de UV/Vis, Diflubenzuron, Methemoglobin, UV-VIS spectrophotometry, Diflubenzuron, Metemoglobina, Espectrofotometria Ultravioleta, Praguicidas, Exposição a Praguicidas
Publisher: Sociedade Brasileira de Química
Year: 2015
OAI identifier: oai:agregador.ibict.br.RI_FIOCRUZ:oai:localhost:icict/11053
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