Estudo de base populacional em um assentamento agr??cola da Amaz??nia brasileira: Influ??ncia gen??tica do ant??genoDuffy/receptor de quimiocinas (DARC) na resposta imune espec??fica contra oPlasmodium vivax

Abstract

A Duffy binding proteindo Plasmodium vivax (PvDBP) e seu receptor na superf??cie dos eritr??citos, o ant??geno Duffy/receptor para quimiocinas (DARC), est??o envolvidos na principal via de invas??o utilizada pelo P. vivax. No presente trabalho, realizou-se por um estudo do tipo coorte aberta, em ??rea de assentamento agr??cola da Amaz??nia brasileira, para avaliar a influ??ncia do receptor DARCna infec????o e resposta imune ao P. vivax. Para isso, foi realizada a genotipagem do ant??geno DARC atrav??s da t??cnica de PCR em tempo real. A pesquisa de anticorpos espec??ficos foi realizada pela sorologia convencional (ELISA) e, por um ensaio funcional que avalia anticopos inibit??rios da intera????o ligante-receptor. Entre os 690 indiv??duos estudados, o gen??tipo FY*A/FY*Bfoi o mais frequente, consistente com a heterogeneidade ??tnica das popula????es que vivem na Amaz??nia brasileira. Na ??rea estudada, n??o foi poss??vel identificar associa????o entre a express??o DARCe a susceptibilidade a infec????o pelo P. vivax. Em rela????o ?? resposta de anticorpos, nenhuma associa????o foi encontrada entre os gen??tipos de DARC e anticorpos IgG anti-PvDBP e nti-MSP119(outra prote??na do P. vivax), ambos detectados pela sorologia convencional (ELISA). Contudo, a resposta de anticorpos inibit??rios foi significativamente mais frequente em indiv??duos heterozigotos carreadores de um alelo DARC-negativo (gen??tipos FY*A/FY*B ES e FY*B/FY*BES). Por ??ltimo, a resposta de anticorpos inibit??rios se manteve est??vel durante todo o per??odo estudado (12 meses). Em conjunto, estes resultados demonstraram, pela primeira vez, que a express??o do receptor DARC pode influenciar na resposta imune inibit??ria contra a PvDBP .The P. vivaxDuffy binding protein (PvDBP) and its erythrocytic receptor, the Duffy antigen receptor for chemokines (DARC), are involved in the major P. vivax erythrocyte invasion pathway. Here, in an agricultural settlement of the Brazilian Amazon area, we carried-out an open cohort study to analyzed DARC genotypes and its relationship to vivax susceptibility and the PvDBP immune response. To answer this question, DARC genotypes were determined by real-time PCR. Antibodies responses were analyzed by conventional serology (ELISA) using recombinant proteins, and byan in vitro functional assay that detect binding inhibitory antibodies (BIAbs) targeting PvDBP . Among 690 individuals enrolled in the study, the distribution of DARC genotypes was consistent with the heterogeneous ethnic origin of the Amazon population, with a predominance of genotype FY*A/FY*B.In the study area, DARC genotypes were not associated with P. vivax susceptibility. Also, there was no association between DARC and anti-PvDBP IgG, as detected by ELISA. However, the follow-up study demonstrated that BIAbs towards to be more frequent in heterozygous carrying a DARC-silent allele (genotypes FY*A/FY*BES and FY*B/FY*BES). In addition, antibodies to PvMSP119, another P. vivaxprotein,were not associated with DARC expression. Moreover, the BIAbs response remained constant during the 12 monthsof the follow up. Together, these results provide the first evidence that DARCexpression may influence the anti-PvDBP inhibitory immune response