Microbiological quality of fresh sausages and characterization if isolates of Escherichia coli

Abstract

A linguiça do tipo frescal é bem aceita e comercializada no Brasil. Mesmo pronta para o consumo, pode apresentar alguns micro-organismos patogênicos, caracterizando possível falha no seu controle higienicossanitário. A bactéria Escherichia coli destaca-se por ser indicativa de contaminação fecal, por apresentar resistência a antimicrobianos e alta variabilidade genética. O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a qualidade microbiológica de linguiças suínas e de frango, artesanais e industriais, do tipo frescal, segundo a legislação brasileira vigente. Além disso, objetivou-se testar a susceptibilidade a antimicrobianos e identificar o perfil genético dos isolados de E. coli destas linguiças. As amostras foram coletadas nos meses de julho a agosto de 2013, em 43 açougues do Município de Aparecida de Goiânia, Goiás e, para cada uma delas, anotou-se o processo de fabricação, isto é, se artesanal ou industrial. Além disso, aferiu-se a temperatura das linguiças e de seus respectivos balcões de exposição à venda. As amostras foram submetidas à análise microbiológica de acordo com a RDC nº 12 de dois de janeiro de 2001, seguindo metodologia preconizada pela American Public Health Association. O teste de susceptibilidade a antimicrobianos seguiu a técnica de disco difusão em ágar Müeller–Hinton e a variabilidade genética foi observada pela técnica do Pulsed Field Gel Electrophoresis. Obtiveram-se oito isolados de E. coli e sete de Staphylococcus aureus. As linguiças artesanais, assim como as suínas estiveram mais contaminadas do que as industrializadas e de frango. Estas últimas apresentaram temperaturas médias menores do que as amostras suínas (6,0 e 6,5ºC, respectivamente), enquanto que linguiças artesanais apresentaram temperaturas médias superiores às industriais (6,8 e 5,7ºC, respectivamente). A maioria dos isolados de E. coli (71,4%) foi resistente a, no mínimo, um antibiótico testado. Apresentaram ainda maior resistência à tetraciclina e ampicilina (71,4%) e 100,0% apresentaram sensibilidade à ceftazidima, ciprofloxacina, aztreonam e imipenem. Observou-se ainda, alta variabilidade genética entre os isolados pela técnica do PFGE. As linguiças estiveram, em sua maioria, próprias ao consumo humano de acordo com a legislação brasileira, embora os resultados possam indicar falha no controle higienicossanitário, cepas resistentes a antibióticos e alta diversidade genética entre os isolados, indicando fontes diferentes de contaminação.Fresh sausages are well accepted and sold in Brazil. Even ready for consumption, they may contain some pathogenic microorganisms, featuring failure in sanitary control. The Escherichia coli stands out for being indicative of fecal contamination, due to its antimicrobial resistance and high genetic variability. The aim of this research was to evaluate the microbiological quality of pork and chicken sausages, homemade and industrial fresh type, according to Brazilian legislation. In addition, the objective was to test the antimicrobial susceptibility and to identify the genetic profile of E. coli isolated from these sausages. The samples were collected in July and August 2013 in 43 butchers of the city of Aparecida de Goiânia, Goiás and, for each of them, it was noted the manufacturing process, whether homemade or industrial. In addition, the temperature of exposure counters and sausages was measured. The samples were submitted to microbiological analysis according to RDC nº 12 of January 2, 2001, following the methodology proposed by the American Public Health Association. The susceptibility testing to antibiotics followed the diffusion technique in Müeller-Hinton agar and the genetic variability was observed by the technique of Pulsed Field Gel Electrophoresis. Were obtained from sausages, eight isolates of E. coli and seven of Staphylococcus aureus. The homemade sausages, as well as pork sausages were more contaminated than the industrialized and chicken. The chicken sausages presented lower average temperatures than strains pork sausages (6,0 and 6,5ºC, respectively), whereas homemade sausages showed higher average temperatures compared to industrialized (5,7 and 6,8ºC, respectively). The most strains of E. coli (71,4%) were resistant to at least one antibiotic tested. Higher resistance profile were observed to tetracycline and ampicillin, while 100,0% of the isolates were susceptible to ceftazidime, ciprofloxacin, aztreonam and imipenen. There was observed a high genetic variability among isolates by PFGE technique. The sausages were according to the Brazilian law, although the results may indicate failure in sanitary control, antibiotic-resistant strains and high genetic diversity among the isolates, indicating different sources of contamination