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Caracterização de sequências potencialmente promotoras de expressão gênica caráter tecido-específica de bananeiras (Musa spp.) utilizando RT-PCR e qPCR

By Luiz Gustavo Teixeira da Silva

Abstract

A bananeira é uma planta tropical de grande importância econômica. Seu fruto é amplamente consumido em todo mundo e sua produção é de grande impacto social, pois fixa a mão de obra no campo e movimenta a economia local, gerando renda e empregos diretos e indiretos. A bananicultura enfrenta problemas em sua produção ligados aos fatores bióticos, sendo os mais danosos os causados por fungos, e também por fatores abióticos como ventos e déficit hídrico que também interferem no ciclo produtivo da bananeira causando prejuízos em sua produção. Sendo a segunda fruta mais produzida no mundo em 2008 com uma produção de 89.099.503 t (FAO, 2010), a banana apresenta diferentes graus de esterilidade, e isso dificulta os programas de melhoramento convencionais. Neste contexto, o emprego de técnicas de engenharia genética, destacando dentre elas a caracterização de promotores tecido-específicos, desponta como uma alternativa bastante viável, favorecendo a aplicação de técnicas mais refinadas da manipulação do genoma, como emprego da cisgenia que visa o manejo dos genes da própria espécie em questão. No presente trabalho, foi utilizado seqüências gênicas previamente selecionadas através de um virtual screening no banco de dados DATAmusa. Estas sequências permitiram desenhar primers que posteriormente foram submetidos a uma reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando cDNA obtidos do RNA extraído de sete diferentes tecidos de duas cultivares de bananeira, Grande Naine e Prata Anã afim de identifica-las no genoma da bananeira em caráter tecido-específico. Desta forma, identificando a seqüência gênica deduz-se a presença do promotor tecido específico, que a partir de sua caracterização, pode-se avançar pelas novas fronteiras conquistadas com a evolução da engenharia genética, como por exemplo, a cisgenia, que consiste na manipulação do próprio genoma do organismo em estudo.Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Vegetal, área de concentração em Biotecnologia Vegetal, para obtenção do título de “Mestre”

Topics: cDNA, Musa spp, Extração de RNA, RT-PCR, Expressão gênica, Banana - Produção, Engenharia genética
Year: 2015
OAI identifier: oai:agregador.ibict.br.RI_UFLA:oai:localhost:1/5247
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