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Caracterização e clonagem do gene uvrA de Corynebacterium pseudotuberculosis, agente infeccioso da linfadenite caseosa

By Rafael Cançado de Faria, Barbara Catarina Teodoro Castro, Bruno Carvalho Resende, Carlos Renato Machado, Vasco Ariston Carvalho de Azevedo, Anderson Miyoshi, Luciana Lara dos Santos and Debora de Oliveira Lopoes

Abstract

A Linfadenite caseosa é uma doença causada por Corynebacterium pseudotuberculosis que afeta ovinos e caprinos. O Reparo de DNA é vital para qualquer organismo, pois evita possíveis efeitos deletérios. O objetivo deste estudo foi caracterizar o gene uvrA de C.psudotuberculosis para futuros ensaios de complementação funcional. Análises in silico foram feitas para verificar os parâmetros físicos e químicos, busca por domínios conservados e modelagem da estrutura 3D. As análises mostram que a proteína tem um peso molecular de cerca de 104,3 kDa e um domínio conservado de exonuclease. A amplificação do gene uvrA foi realizada utilizando um kit de PCR Long Range e o inserto foi clonado no vetor pCR 2.1 TOPO. Linhagens de E. coli DH5a foram eletroporadas com o plasmídeo recombinante e depois estes foram digeridos com enzimas de restrição BamH1 e Xho1  para subsequente clonagem num vetor de expressão pProEX HTB. As construções serão confirmadas por sequenciamento

Topics: Bioquímca / Biologia Celular
Publisher: State University of Londrina
Year: 2013
OAI identifier: oai:periodicos.ibict.br.BBR_Biochemistry:oai:ojs.www.uel.br:article/15402
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