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Immunohistochemical changes in kidney glomerular and tubular proteins caused by rattlesnake (Crotalus vegrandis) venom Cambios inmunohistoquímicos en proteínas de túbulo y glomérulo renal causadas por el veneno de la serpiente de cascabel (Crotalus vegrandis)

By María E. Girón, Irma Aguilar and Alexis Rodríguez-Acosta

Abstract

Renal damage is an important cause of death in patients who have survived the early effects of severe crotalid envenomation. Extracellular matrix of renal tissue is altered by Crotalus toxin activities. The aim of this study was to describe how cytoskeletal proteins and basal membrane components undergo substantial alterations under the action of Crotalus vegrandis crude venom and its hemorrhagic fraction (Uracoina-1) in mice. To detect the proteins in question, the immunoperoxidase method with monoclonal and polyclonal antibodies was used. Cell types within renal lesions were characterized by phenotypic identification, by means of immunohistologic analysis of marker proteins using different primary antibodies against mesangial cells, endothelial cells, cytoskeletal proteins (intermediate filament), extracellular matrix and basal membranes. Samples for morphological study by standard procedures (biotin-streptavidin-peroxidase technique) using light microscopy were processed. Positive and negative controls for each antigen tested in the staining assay were included. After crude venom and hemorrhagic fraction inoculation of mice, the disappearance of cytoskeletal vimentin and desmin and collagen proteins in the kidney was observed. In extracellular matrix and basal membranes, collagen type IV from envenomed animals tends to disappear from 24 h to 120 h after venom injection.<br>El daño renal es una causa importante de muerte en pacientes que sobreviven a los efectos iniciales de los severos envenenamientos crotálicos. El objetivo de este estudio ha sido el describir como las proteínas del citoesqueleto y los componentes de membrana basal muestran alteraciones importantes en su manifestación, bajo la acción del veneno crudo de Crotalus vegrandis y una fracción hemorrágica (Uracoina-1) del mismo veneno ya que, la matriz extracelular del tejido renal es alterada por la actividad de estas toxinas. Para detectar las proteínas en cuestión se utilizó el método de inmunoperoxidasa con anticuerpos mono y policlonales. Los tipos celulares dentro de las lesiones renales fueron caracterizados por identificación fenotípica, por medio del análisis inmunohistoquímico de diferentes marcadores de proteínas utilizando anticuerpos primarios contra células mesangiales, endoteliales, proteínas de citoesqueleto (filamento intermedio), matriz extracelular y membrana basal. Se procesaron las muestras para estudio morfológico por procedimientos de rutina (biotina-streptavidina-peroxidasa) y se observaron por microscopía de luz. Fueron incluidos los controles negativos y positivos para cada antígeno probado, en los ensayos de tinción. Se observó también la desaparición en el citoesqueleto, de la expresión de las proteínas vimentina y desmina, luego de la inyección de veneno crudo y Uracoina-1. En la matriz extracelular y la membrana basal de los animales envenenados, la expresión del anti-colágeno Tipo IV, tiende a desaparecer después de las 24 a las 120 horas de la inyección del veneno

Topics: Collagen, Crotalus vegrandis, Extracellular matrix, Kidney, Laminin, Venom, Vimentin, LCC:Medicine (General), LCC:R5-920, LCC:Medicine, LCC:R, DOAJ:Medicine (General), DOAJ:Health Sciences
Publisher: Instituto de Medicina Tropical
Year: 2003
DOI identifier: 10.1590/S0036-46652003000500001
OAI identifier: oai:doaj.org/article:8710c5e069b64691a89a71d88d8835dc
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