Acção colectiva e incentivos económicos para promover a gestão de combustiveis à escala da paisagem

Programa Doutoral em Alterações Climáticas e Políticas de Desenvolvimento Sustentável / Universidade de Lisboa / Universidade Nova de LisboaSem intervenção humana, a propagação de incêndios nos espaços florestais pode representar custos avultados para a sociedade. Nos contextos de pequena propriedade, o carácter de bem público, associado à redução do perigo de incêndio provém da gestão de combustíveis efectuada pelos proprietários, a uma escala (paisagem) que é superior à sua propriedade (parcela). Essa escala requer um esforço adicional de coordenação, com custos (eventualmente) acrescidos para os mesmos. As soluções de coordenação que pretendem incrementar a provisão deste bem público delineando planos de gestão florestal à escala da paisagem não têm sido bem-sucedidas nas áreas onde a susceptibilidade é maior. Pretende-se aqui explorar a introdução de um sistema de incentivos económicos à acção colectiva promovido pelas políticas públicas, com base em contratos com os proprietários florestais, em função da adopção voluntária de compromissos de gestão de combustíveis, por parte dos mesmos. Para esse fim, são usados modelos matemáticos de regressão e técnicas de análise estatística a partir de dados de inquéritos realizados a peritos em ecossistemas florestais e a proprietários florestais, na zona Centro em Portugal. Tendo em conta as suas perspectivas procede-se a uma análise de custo-benefício social, que recorre a um método de valoração contingente, com base em experiências de escolha para determinar a disposição a aceitar esses contratos, técnica nunca testada com proprietários florestais no âmbito da redução do perigo de incêndio Verifica-se que os incentivos económicos à acção colectiva, são apoiados por peritos em ecossistemas florestais e vão de encontro aos interesses e predisposição de um número expressivo de proprietários, quer à coordenação quer à adesão a contratos com compromissos de gestão de combustíveis. Verificou-se ainda que face aos custos económicos que representam a recuperação da situação inicial antes de incêndios de elevada severidade, a gestão de combustíveis resultante da adesão voluntária prevista neste estudo, pode ser elevada a níveis mais eficazes, e mesmo assim, economicamente eficientes, pois ainda não se atingiu o ponto óptimo. O investimento público, justifica-se pelo carácter adicional que a provisão deste bem implica, quer para os proprietários quer para a sociedadeN/

Marketing plan : Organic Alter Real, by Companhia das Lezírias

Mestrado Bolonha em ManagementAs oliveiras são originárias da bacia do Mediterrâneo, zona onde cerca de 95% do azeite mundial é consumido e produzido. Atualmente, Portugal fornece 3% da produção mundial, o que revela que o sector do azeite é estratégico no mercado português. Adicionalmente, a Agricultura Biológica surge como uma oportunidade estratégica para o sector agrícola, uma vez que os produtos biológicos são produzidos utilizando práticas mais sustentáveis, minimizando o impacto da agricultura no ecossistema, e são vistos como produtos mais saudáveis, mais saborosos e mais conscientes do ponto de vista ambiental. O objeto de estudo deste projeto final de mestrado é o desenvolvimento de um plano de marketing para um novo azeite virgem extra: Alter Real Biológico, produzido pela Companhia das Lezírias, a maior empresa de exploração agrícola e florestal em Portugal. As áreas de atuação da empresa incluem a Lezíria de Vila Franca de Xira, a Charneca do Infantado, o Paúl de Magos, a Coudelaria Alter (uma concessão estatal de 30 anos) e o EVOA (o maior centro de observação de aves do país). Adicionalmente, a CL possui uma extensa área de 70 hectares de olival plantado, localizada na Herdade de Catapereiro, com raízes que remontam ao século XVIII. Atualmente, exibe uma seleção diversificada de cinco variedades diferentes de azeitona, incluindo a tradicional variedade "Galega", que é a variedade utilizada na produção do azeite virgem extra Alter Real. Para a elaboração deste Plano de Marketing, foi aplicada uma estratégia de investigação designada por Action Research. Assim sendo, a metodologia utilizada envolve fontes de informação primárias e secundárias, que foram conduzidas através de métodos mistos, nomeadamente métodos qualitativos e quantitativos. No início, foi realizada uma entrevista informal semi-estruturada online ao responsável pela Área de Viticultura e Olivicultura da CL, onde foi possível recolher informações relevantes sobre a empresa. Em seguida, foi realizado um questionário online, cujo principal objetivo era recolher informações sobre os hábitos de compra de azeite dos participantes. Com base nos resultados obtidos, foi possível constatar que 84% dos inquiridos estariam dispostos a comprar uma garrafa de azeite virgem biológico, os cinco aspetos mais importantes na escolha de um azeite, ordenados por importância, são a qualidade (79%), o preço (61%), o nível de acidez (34%), os benefícios para a saúde (25%) e a origem do azeite (22%), 23% dos inquiridos consideram que o preço do azeite biológico deveria ser 15% superior ao do azeite convencional e apenas 35% dos inquiridos referiram conhecer o azeite da Companhia das Lezírias. O novo Alter Real Biológico estará disponível em novos pontos de venda, como lojas de produtos biológicos, mercados gourmet e lojas especializadas em produtos biológicos na Área Metropolitana de Lisboa e Porto. Adicionalmente, para a promoção do novo produto, o Alter Real Biológico apresentará o slogan: Único, Natural, Cheio de História e 100% Português.Olive trees originate from the Mediterranean Basin, an area where around 95% of the world's olive oil is produced and consumed. Currently, Portugal supplies 3% of the world´s production, revealing that the olive oil sector is strategic in the Portuguese market. Additionally, Organic Farming is emerging as a strategic opportunity for the agricultural sector since organic products are produced using more sustainable practices, minimizing the impact of agriculture on the ecosystem, and are perceived as healthier, tastier, and environmentally conscious products. The object of study of this final Master´s Project is developing a marketing plan for a new extra virgin olive oil: Organic Alter Real, produced by Companhia das Lezírias, the largest agricultural and forestry exploitation in Portugal. The company´s areas of operation include Lezíria de Vila Franca de Xira, Charneca do Infantado, Paúl de Magos, Coudelaria Alter (a 30-year state concession), and EVOA (the country's largest bird observation center). Additionally, CL has an extensive area of 70 hectares of olive groves planted, located in Herdade de Catapereiro, with roots dating back to the 18th century. Currently, exhibits a diverse selection of five different olive varieties, including the traditional “Galega” olive variety, which is the variety used to produce Alter Real extra virgin olive oil. To develop this Marketing Plan, a research strategy known as action research was applied. The methodology used involves primary and secondary sources of information, which were conducted through mixed methods, particularly qualitative and quantitative methods. During the initial stage, an informal semi-structured online interview was conducted with the responsible for the Viticulture and Oliviculture Area of CL, where it was possible to gather relevant information about the company. In the second stage, an online questionnaire was conducted, and its main objective was to collect information about the participant's olive oil purchasing habits. Based on the results obtained, it was possible to observe that 84% of the respondents would be willing to buy an organic bottle of virgin olive oil, the five most important aspects when choosing an olive oil, ranked by importance are quality (79%), price (61%), acidity level (34%), health benefits (25%), and origin of the olive oil (22%), 23% of the respondents believe that the price of organic olive oil should be 15% higher than conventional olive oil, and only 35% of respondents mentioned that they were familiar with Companhia das Lezírias´ olive oil. The new Organic Alter Real will be available in new points of sale, such as organic food shops, gourmet markets, and specialized organic shops in the Lisbon and Porto Metropolitan Area. Additionally, for the promotion of the new product, Organic Alter Real will showcase the slogan: Unique, Natural, Full of History, and 100% Portuguese.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Desafios de comprometimento e retenção no setor das TIC : perspetiva da geração Z

Mestrado Bolonha em Gestão de Recursos HumanosO presente estudo pretende identificar os desafios enfrentados pelas organizações portuguesas do setor das TIC para comprometer e reter os seus trabalhadores pertencentes à Geração Z. Assim, o objetivo principal da investigação foi identificar os desafios enfrentados pelas organizações portuguesas do setor das TIC para comprometer e reter os seus trabalhadores pertencentes a esta geração. As questões de investigação abordadas foram: Quais os principais fatores que impactam o turnover no setor das TIC? Em que medida é que as organizações do estudo identificam e incorporam na gestão as características desta Geração? Quais as medidas que estão a ser tomadas pelas organizações do setor para reter os trabalhadores desta geração? Que fatores contribuem para a motivação e satisfação da Geração Z? O que pode ser feito para melhorar o comprometimento destes trabalhadores? A metodologia utilizada no estudo foi qualitativa, com recurso a uma entrevista semiestruturada e a seis grupos focais, permitindo uma análise aprofundada dos desafios e das estratégias para comprometer e reter a Geração Z no setor das TIC. Os resultados permitiram concluir que os principais fatores que impactam o turnover no setor são a procura por melhores condições salariais, planos de carreira transparentes, desafios constantes, mais flexibilidade horária e de regime de trabalho, e equilíbrio entre o trabalho e a vida profissional. Assim, os desafios de comprometimento e retenção das empresas do setor estão relacionados com a gestão do equilíbrio entre trabalho e vida pessoal dos colaboradores, necessidade contínua de formação, fácil desvinculação dos trabalhadores com o propósito organizacional, e com a construção de sistemas de compensação e benefícios personalizados.The present study aims to identify the challenges faced by Portuguese organizations in the IT sector in engaging and retaining their Generation Z employees. Thus, the main objective of the research was to identify the challenges faced by Portuguese organizations in the IT sector in engaging and retaining employees from this generation. The research questions addressed were: What are the main factors impacting turnover in the IT sector? To what extent do the organizations in the study identify and incorporate the characteristics of this Generation into their management? What measures are being taken by organizations in the sector to retain employees from this generation? What factors contribute to the motivation and satisfaction of Generation Z? What can be done to improve the engagement of these employees? The methodology used in the study was qualitative, using a semi-structured interview and six focus groups, allowing for an in-depth analysis of the challenges and strategies for engaging and retaining Generation Z in the IT sector. The results led to the conclusion that the main factors impacting turnover in the sector are the search for better salary conditions, transparent career plans, constant challenges, more flexible working hours and arrangements, and work-life balance. Thus, the challenges of engagement and retention for companies in the sector are related to managing the balance between work and personal life for employees, the continuous need for training, the ease of employees disconnecting from the organizational purpose, and the construction of personalized compensation and benefits systems.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Coagulase negative staphylococci from companion dogs in Angola : a pilot study

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, área científica de Sanidade AnimalAntimicrobial resistance (AMR) represents a global challenge, yet its full extent remains inadequately understood, particularly in low-income countries per capita such as Angola. The absence of adequate monitoring programs in clinical settings in this country, including in veterinary medicine, exacerbates the challenge of AMR management, leaving a critical gap in the knowledge of resistance patterns, including of coagulase-negative staphylococci. Previously considered harmless microbiota residents, bacteria from this group are also associated with nosocomial infections due to their increasing potential for antimicrobial resistance and virulence. This study aims to characterize the resistance and virulence patterns of coagulase negative staphylococci isolated from dogs in Angola, as well as to explore risk factors associated with the presence of resistant and potentially virulent strains. The 55 coagulase-negative staphylococci under study were identified as follows: Staphylococcus sciuri (n= 21; 38%), Staphylococcus xylosus (n=17; 31%), Staphylococcus equorum ( n=7; 13%), Staphylococcus vitulinus (n=4; 7%), Staphylococcus lentus (n=3; 5.5%) and Staphylococcus sp. (n=3; 5.5%). It was possible to classify (n=15; 27%) of the isolates as multidrug resistant, showing frequent resistance to beta-lactam agents, particularly ampicillin (n=42; 76%) and cefoxitin (n=17; 31%). A quarter of the isolates (n=14; 25%) exhibited resistance to meropenem. Moreover, the majority of the isolates (n=51; 93%) were able to produce biofilm, while (n=25; 46%) produced gelatinase and lecithinase. Hemolysin production was less prevalent (n=12; 22%). Furthermore, this study revealed that multidrug-resistant strains were more commonly isolated from samples of female dogs, sick and vaccinated dogs. The coexistence of multidrug resistance and virulence in these bacteria highlights their role as reservoirs of resistance and determinants of virulence, influencing the treatment of infections. These findings underscore the need for further studies on multidrug-resistant bacteria in dogs in Angola, essential to minimize risks to public health due to the proximity between humans and animalsRESUMO – STAPHYLOCOCCI COAGULASE-NEGATIVOS EM CÃES DE COMPANHIA NATURAIS DE ANGOLA: UM ESTUDO PILOTO - A resistência a antimicrobianos (AMR) representa um desafio global, embora a sua extensão real não esteja totalmente compreendida, especialmente em países de baixo rendimento per capita como Angola. A ausência de programas adequados de monitorização nos contextos clínicos deste país, incluindo em medicina veterinária, dificulta a gestão da AMR devido sobretudo a uma grande lacuna no conhecimento dos padrões de resistência, incluindo dos estafilococos coagulase-negativos. Anteriormente consideradas agentes comensais, as bactérias deste grupo também estão associadas a infeções nosocomiais devido ao seu crescente potencial de resistência a antimicrobianos e virulência. Este estudo visa caracterizar os padrões de resistência e virulência de estafilococos coagulase-negativos isolados de cães em Angola, bem como explorar fatores de risco associados à presença de estirpes resistentes e potencialmente virulentas. Os 55 estafilococos coagulase-negativos estudados foram identificados como Staphylococcus sciuri (n= 21; 38%), Staphylococcus xylosus (n=17; 31%), Staphylococcus equorum (n=7; 13%), Staphylococcus vitulinus (n=4; 7%), Staphylococcus lentus (n=3; 5.5%) e Staphylococcus sp. (n=3; 5.5%). Foi possível classificar (n=15; 27%), dos isolados como multirresistentes mostrando resistência frequente a agentes beta-lactâmicos, particularmente à ampicilina (n=42; 76%) e à cefoxitina (n=17; 31%). Um quarto dos isolados (n=14; 25%) exibiu resistência ao meropenem. Além disso, a maioria dos isolados (n=51; 93%) foi capaz de produzir biofilme, enquanto (n=25; 46%) produziram gelatinase e lecitinase. A produção de hemolisina foi menos prevalente (n=12; 22%). Este estudo revelou ainda que estirpes multirresistentes eram isoladas mais comummente a partir de amostras de cadelas, de cães doentes e vacinados. A coexistência de multirresistência e virulência nestas bactérias destaca seu papel como reservatórios de resistência e determinantes de virulência, potencialmente influenciando o tratamento de infeções. Esses resultados ressaltam a necessidade de mais estudos sobre bactérias multirresistentes em cães em Angola, essenciais para minimizar os riscos à saúde pública devido à proximidade entre humanos e animaisN/

Prevalence and characterization of resistant Escherichia coli from captive birds of prey : consequences for public health

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, área científica de Sanidade AnimalABSTRACT - Captive birds of prey are often used for pest control in many urban areas, while also participating in falconry exhibitions and in environmental education activities. Due to their frequent travels across country, these birds may represent a Public Health concern, as they can host pathogenic and zoonotic agents while inhabiting areas occupied by both humans and synanthropic species. In this work, bacteria from captive birds of prey employed in the activities previously mentioned were characterized to determine their pathogenic potential. Cloacal samples from 27 captive birds of prey were collected and processed for Escherichia coli isolation. Isolates were identified though IMViC testing, clustered after clonal typing through ERIC-PCR fingerprinting, and their phylogenetic groups assessed using a quadruplex PCR method. Isolates’ virulence phenotype profile was determined through phenotypical techniques, for detection of the ability for production of enzymes (gelatinase, protease, lecithinase, DNase and haemolysin) and biofilm. Their resistance profile against nine antibiotics was determined using the disk diffusion method, together with their ability to produce extended-spectrum β lactamases (ESBLs). All 84 isolates identified as E. coli were characterised regarding their virulence profiles, with 89% presenting gelatinase activity, 49% were able to produce biofilm and 29% were able to produce α-haemolysin. It was possible to establish a correlation between isolates’ virulence levels and animal species sampled and sampling location, proving that isolates from Santarém were associated with a higher virulence index. It was also observed a positive correlation between gelatinase activity and a higher score of biofilm production. Then, the original 84 isolates were grouped in 33 clonal types by fingerprinting analysis, allowing to select representative isolates for further characterization. Phylogenetic analysis demonstrated that most of these isolates belonged to groups D and B2. Isolates showed higher resistance levels to piperacillin (42%), tetracycline (33%) and doxycycline (30%). Lastly, it was possible to observe that, out of the tested isolates, 6% were able to produce ESBLs. Our results confirm the importance of these birds as reservoirs of bacterial strains with virulence and resistance potential, and as possible dissemination agents of those strains to humans and wildlife, reinforcing the need for more studies on this relationship and its consequences for Public HealthRESUMO – Prevalência e caracterização de Escherichia coli proveniente de aves de rapina em cativeiro : consequências para a saúde pública - Aves de rapina mantidas em cativeiro são frequentemente utilizadas como método de controlo de pragas em diversos centros urbanos, enquanto participam também em exposições de falcoaria ou são utilizadas em atividades de educação ambiental. Devido às suas frequentes deslocações pelo país, é possível estas aves representarem um perigo para a saúde pública, uma vez que podem ser portadoras de agentes patogénicos e zoonóticos, ao mesmo tempo que partilham ambientes ocupados por humanos e outras espécies sinantrópicas. Neste estudo, bactérias isoladas a partir de aves de rapina em cativeiro, utilizadas nas atividades acima mencionadas, foram caraterizadas com vista à avaliação do seu potencial patogénico. Amostras cloacais de 27 aves foram recolhidas e processadas para isolamento de Escherichia coli. Os isolados foram identificados através do teste IMViC, e agrupados após determinação dos seus perfis clonais com recurso a ERIC-PCR e dos seus grupos filogenéticos através de um método de PCR quadruplex. O perfil de virulência dos isolados foi determinado por métodos fenotípicos, para deteção da produção de enzimas (gelatinase, protease, lecitinase, DNase e hemolisinas) e biofilme. O perfil de resistência dos isolados relativamente a nove antibióticos foi determinado através do método de difusão em disco, tendo ainda sido avaliada a sua capacidade de produção de β-lactamases de largo espectro (ESBLs). Todos os 84 isolados foram identificados como pertencentes à espécie E. coli e caracterizados quanto ao seu perfil de virulência, sendo que 89% apresentaram atividade de gelatinase, 49% revelaram-se produtores de biofilme e 29% produziram α-hemolisina. Foi possível estabelecer correlação entre os níveis de virulência dos isolados e a espécie animal e a localização de recolha das amostras, observando-se que os isolados provenientes de amostras de animais recolhidas em Santarém estão associados a um índice de virulência superior. Foi também possível observar uma correlação entre a atividade de gelatinase e um maior nível de produção de biofilme. Através da análise de clonalidade, foi possível agrupar os 84 isolados originais em 33 grupos clonais, e a análise filogenética demonstrou que a maioria dos isolados em estudo pertenciam aos grupos filogenéticos D e B2. Os isolados apresentaram níveis de resistência mais elevados relativamente à piperacilina (42%), tetraciclina (33%) e doxicilina (30%). Foi ainda possível observar que 6% dos isolados testados apresentaram capacidade de produzir ESBLs. Os resultados obtidos neste estudo confirmam a importância destas aves enquanto reservatórios de espécies bacterianas com potencial de virulência e resistência, e potenciais agentes de disseminação destas estirpes para humanos e outros animais selvagens, frisando a necessidade da realização de mais estudos sobre esta ligação e as suas potenciais consequências para a saúde publicaN/

Global evolution history, biogeographical distribution and emergence of drug resistance by the latin american and mediterranean (L4.3) family of mycobacterium tuberculosis

Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A tuberculose (TB) é ainda considerada como uma das principais doenças e que suscita bastante preocupação a nível de saúde pública, em particular entre países membros da Comunidade dos Países de Língua Portuguesa (CPLP). Uma das características distintivas da estrutura populacional do Mycobacterium tuberculosis reside na elevada prevalência da família Latin-American and Mediterranean (LAM), que constitui um clade monofilético sob a linhagem 4.3, parte da Linhagem 4. De uma perspectiva filogeográfica, a L4.3 apresenta uma distribuição bastante ampla cuja origem permanece ainda desconhecida. Acresce que algumas das suas sublinhagens demonstraram já trajetórias microevolutivas distintas que têm vindo a culminar na multirresistência (MDR) e resistência extensiva (XDR), destacando-se em Portugal as estirpes Lisboa3 e Q1. O objetivo deste estudo consistiu na utilização de vastos conjuntos de dados genómicos, publicamente disponíveis, obtidos por sequenciação de alto rendimento e com vista à reconstrução da história evolutiva da sublinhagem 4.3/LAM, região de origem e padrão de dispersão no Mundo. Foi empregue análise filogenética de máxima verosimilhança e Bayesiana integrando informação disponível relativamente ao ano de isolamento e origem década isolado clínico incluído no estudo. Procurou-se ainda caracterizar a associação das diversas sublinhagens de L4.3/LAM com a resistência aos antibacilares e respectivos mecanismos de resistência. Em paralelo, foram pesquisadas assinaturas de seleção positiva em epitopos de células T e B e, em todos os genes presentes no genoma do M. tuberculosis com o intuito de identificar novos mediadores de resposta do hospedeiro e respetivo processo de diversificação. Este estudo compreendeu desta forma uma coleção global de 1695 isolados de M. tuberculosis L4.3/LAM. Os resultados obtidos demonstraram uma estrutura populacional diversificada e de ampla distribuição geográfica, com a maioria dos isolados originários da África (49,8%), Américas (21,6%) e Europa (4,1%). A amostra estudada foi igualmente classificada em 10 sublinhagens diferentes e específicas de L4.3; dentre estes, os mais abundantes foram a L4.3.4.2.1 com 651 (38,4%) isolados, L4.3.3 com 449 (26,5%) e L4.3.4.2 com 204 (12%). Em termos de distribuição de resistência aos antibacilares, com base na predição genotípica in silico, a amostra estudada continha 335 (19,8%) isolados MDR, 116 (6,8%) isolados Pré-XDR, 12 (0,7%) isolados existentes à rifampicina (RR)-TB e 1076 (63,5%) isolados sensíveis. Em relação à distribuição de resistência entre sublinhagens, 157 (46,9%) dos 335 isolados MDR pertencem à L4.3.3, 71 (21,2%) à L4.3.4.2 e 53 (15%) à L4.3.2. Em relação aos isolados pré-XDR, 63 (54,3%) dos 166 isolados pertencem à L4.3.4.2, 42 (36,2%) à L4.3.3 e 7 (6%) à L4.3.4.1. Estes resultados sugerem uma predominância das sublinhagens L4.3.3 e L4.3.4.2 o que diz respeito às estirpes L4.3 resistentes enfatizando uma possível associação a processos de aquisição de resistência mais frequentes. No que diz respeito à v região de origem dos isolados e respetiva relação com a resistência, a maioria dos casos L4.3/LAM MDR ocorre nas Américas (69.3%) e na Europa (20.3%), com a África a compreender apenas 7,2% dos casos. Como resultado, apesar de 844 (49,8%) dos isolados do estudo serem provenientes da África, a MDR-TB por L4.3/LAM encontra-se associada principalmente às Américas e Europa. Em paralelo, foi possível identificar e examinar a distribuição de variantes associadas à resistência para prever a resistência fenotípica a amostra estudada. São descritas as sublinhagens com maior número de isolados resistentes e foram encontradas evidências que corroboram que mutações duplas específicas tendem a estar associadas a sublinhagens específicas. Em seguida, para examinar a evolução, diversificação e dispersão global da L4.3/LAM, reconstruímos a filogenia da sublinhagem L4.3/LAM com base em 58,129 SNPs genómicos de elevada qualidade. A árvore filogenética de máxima verosimilhança é congruente com a existência de quatro clades principais (Clades A-D). O clade A compreende L4.3 sensu stricto, L4.3.1 e L4.3.1.1 que neste estudo são predominantemente encontrados na Europa e Ásia e estão associados principalmente a estirpes pansusceptíveis. O clade B compreende L4.3.2 e L4.3.2.1 e reflete uma divisão claramente visível entre ambas as sublinhagens não apenas do ponto de vista filogenético, mas também em relação à sua distribuição na América do Sul e África Austral, respetivamente. Ainda assim, dentro deste clade, é discernível um cluster MDR que se acredita ter surgido na Argentina (65,5%) e, portanto, estar na base de um maior grau de associação de L4.3.2 com MDR comparativamente a L4.3.2.1. Os clades C (compreendendo apenas L4.3.3) e D (compreendendo L4.3.4, L4.3.4.1, L4.3.4.2 e L4.3.4.2.1) consistem em dois clades irmãos e dos quais o clade C é notoriamente associado à América do Sul e diferentes regiões do Europa, enquanto o clade D está principalmente associado à África Oriental, América do Sul e Sul da Europa. A análise baseada em SNPs permitiu ainda identificar 206 clusters genómicos distintos tendo em conta um limiar de 5 SNP. De um modo geral, e examinando a fração de isolados agrupados de cada sublinhagem, os dados mostram taxas de clustering que variaram entre 0-1, destacando-se a L4.3.2 com 57% (n=66/116) de isolados agrupados, L4.3.2.1 49% (n=43/87), L4.3.4.2 53% (n=109/204), e L4.3.4.2.1 60% (n=392/651). Estes resultados sugerem uma maior transmissibilidade por M. tuberculosis LAM/4.3 dos clades B (L4.3.2) e D (L4.3.4) e que também é corroborado pelas menores distâncias médias terminais observados na árvore filogenética. De forma a complementar e enquadrar a análise filogenética no espaço e no tempo, foi realizada a reconstrução ancestral e datação molecular através de métodos de máxima verosimilhança e/ou análise Bayesiana. Segundo as estimativas obtidas, as estirpes LAM/4.3 vi terão surgido pela primeira vez na América do Sul na primeira metade do século XVI. Tendo isso em mente, os resultados sugerem que a disseminação da estirpe L4.3/LAM estará intimamente associada à história do colonialismo e expansão marítima europeia com especial ênfase para o papel de Portugal na disseminação desta estirpe no Mundo. Finalmente, dois métodos diferentes foram usados para analisar e caracterizar a diversificação corrida em epitopos de células T e B, bem como a diversificação génica na história evolutiva das estirpes L4.3/LAM. Apenas dois epitopos em dois genes distintos apresentaram evidências de seleção positiva com suporte estatístico, ambos genes PPE envolvidos na resposta do hospedeiro e cujos resultados aqui encontrados carecem de estudos adicionais a confirmar a importância e ocorrência destas mutações na resposta imunitária do hospedeiro. Relativamente ao conjunto de genes analisados, foram identificados vários genes envolvidos na virulência e resistência a antibióticos, incluindo Rv1196 (mtb39a), Rv3426, Rv2170, Rv0277c (vapC25), Rv2158c (murE), Rv2363 (amiA2), Rv2380c (mbtE) e Rv3869, sob seleção positiva. Estes resultados sugerem que existirão diversos genes com papel relevante no processo adaptativo decorrente da evolução da sublinhagem L4.3/LAM. Concluindo, os resultados aqui apresentados destacam a importância da família ou sublinhagem L4.3/LAM num contexto macroepidemiológico global, destacando-se o enorme grau de associação de por algumas sublinhagens à resistência os antibacilares, incluindo a diversidade de mecanismos que lhe está subjacente. Importa ainda caracterizar de forma mais profunda os mecanismos que estão na base funcional do sucesso desta estirpe e qual o papel inerente aos fenómenos de diversificação dos genes e epitopos aqui identificados.Tuberculosis (TB) is still regarded as a devastating disease in many countries, particularly those that are members of the Community of Portuguese Speaking Countries (CPLP). One of the distinguishing characteristics of Mycobacterium tuberculosis population structure in these countries is the high prevalence of its Latin American and Mediterranean family, which forms a monophyletic clade under Lineage 4.3, which is part of Lineage 4, the most geographically widespread cause of human tuberculosis. The phylogeographic range of L4.3 is broad, and its origin is still unknown. Furthermore, known phylogenetic sub-clades, such as the Lisboa3 and Q1 clades in Portugal, have demonstrated distinct microevolutionary trajectories toward extensively drug resistance. The goal of this project was to use large publicly available genomic datasets obtained through Next Generation Sequencing to reconstruct the evolutionary history of this specific lineage in order to better understand where it originated and how it evolved. Maximum- likelihood and Bayesian molecular analysis were used to evaluate the phylogeographic range and dissemination, with country-level clustering serving as a proxy for transmission. Resistance emerging dynamics and epitope diversification were also studied. In this study, we examined a global collection of 1695 Mycobacterium tuberculosis lineage 4.3/LAM whole genome isolates from 31 countries. Results show that lineage 4.3 has a diverse population and a wide geographic distribution, however, mainly being prevalent in Africa, South America, and Europe. Moreover, this study shows a clear distinction between sublineages in terms of geographic distribution, drug resistance, and transmissibility. We also reconstructed this lineage's evolutionary history and found that the most likely origin of the emergence was South America, around the 1500s. Furthermore, we discovered that several genes involved in virulence and antibiotic resistance, including Rv1196 (mtb39a), Rv3426, Rv2170, Rv0277c (vapC25), Rv2158c (murE), Rv2363 (AmiA2), Rv2380c (mbtE), and Rv3869, were under positive selection (eccB1). In summary, drug resistance, virulence, adaptation, and transmissibility are undeniably a source of concern regarding this lineage, and proper prevention methods are required.Faculdade da Farmacia da Universidade de Lisboa

Casuística do tratamento de craniossinostoses e disostoses craniofaciais no CHULN-HSM no período 2002-2021

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2022Introdução: As craniossinostoses definem-se como a fusão prematura de uma ou mais suturas cranianas (craniostenose). Nas disostoses craniofaciais, para além da fusão prematura das suturas da calote craniana, verifica-se a fusão prematura das sincondroses da base do crânio, com compromisso do crescimento facial. O Hospital de Santa Maria (CHULN-HSM) é um centro de referência português para esta intervenção desde 2001. Objetivos: Descrever a casuística do tratamento das craniossinostoses realizadas no CHULN-HSM no período 2002-2021. Realizar um estudo retrospetivo com análise do follow-up dos doentes e posterior estudo de correlações entre os antecedentes pessoais, as técnicas cirúrgicas implementadas e complicações precoces e tardias descritas. Comparar os resultados deste estudo com estudos a nível internacional. Metodologia: Revisão da literatura mais recente relativa a craniossinostoses e o seu tratamento, seguido de estudo retrospetivo com levantamento de casuística e análise estatística dos dados. Resultados: Os 283 processos clínicos analisados incluíram 376 cirurgias. A média da idade na 1ª cirurgia, excluindo cirurgias ortognáticas, foi de 11 meses, com predomínio do sexo masculino (66%). As craniossinostoses simples e múltipla mais comuns foram a escafocefalia (45%) e a pansinostose (2,5%), respetivamente. 40 doentes apresentavam síndrome genético associado, sendo o mais comum o Crouzon (5,3%). A cranioplastia foi a técnica mais comum (215 vs 68 distrações ósseas), sendo de destacar o predomínio da pi-plastia modificada (30%). A complicação precoce e tardia mais comum foi síndrome febril (5%) e presença de irregularidades na calote (29%), respetivamente. Apresentar síndrome genético e craniossinostose múltipla está associado a complicações precoces e tardias. Foi visualizada associação entre complicações e a sutura afetada. A cranioplastia demonstrou levar a 2x mais complicações tardias que a distração óssea. Conclusão: A casuística analisada demonstra compatibilidade com estudos semelhantes publicados na literatura. Foram observadas correlações significativas entre os antecedentes do doente e a presença de complicações precoces ou tardias.Introduction: Craniosynostosis are defined as the premature fusion of one or more cranial sutures, which result in craniostenosis. In craniofacial dysostosis syndromes, both the cranial vault sutures and the cranial base synchondroses are prematurely fused, resulting in compromised midfacial growth. CHULN-HSM is a reference centre in Portugal for this intervention since 2001. Aims: Describe the casuistic of the craniosynostosis treatment in the CHULN-HSM, between 2002-2021. Perform a retrospective study and analysis of the patient’s follow-up and consequent study of plausible correlations between patients’ personal history, surgical techniques used, and complications described. Compare the results of this Portuguese study with similar studies worldwide. Methods: Literature review of craniosynostosis and its treatment, followed by a retrospective study of the CHULN-HSM casuistic and statistical data analysis. Results: There were 283 clinical processes analysed, which included 376 surgeries. The median age of the first surgery was 11 months (excluding orthognathic surgery), and male patients were more prevalent (66%). The most common simple and multiple craniosynostosis were scaphocephaly (44,9%) and pansynostosis (2,5%), respectively. Forty patients had a genetic syndrome associated, being Crouzon the most common (5,3%). Cranioplasty was the most performed technique (215 vs 68 bone-distractions), with modified pi-plasty being the most common (30%). The most common early complication was febrile syndrome and late complication was irregularity of the cranial vault (29%). There is an association between having a genetical syndrome or multiple craniosynostosis and early/late complications. Furthermore, the type of suture affected showed association with the presence of complications. Cranioplasty demonstrated 2x more probability of leading to late complications than bone-distraction. Conclusion: The casuistic analysed showed similarity with worldwide studies published. There were important correlations proved between patients’ history and the presence of early and late complications

Neuronal and behavioral alterations after intake of N-ethylpentylone in CD-1 mice

Tese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.As Catinonas Sintéticas (CSs) são um grupo de Novas Substâncias Psicoativas sintetizadas de modo a contornar a lei e escapar a toda a regulamentação associada a drogas ilícitas. Os seus principais consumidores consistem em adolescentes e jovens adultos frequentadores de festas noturnas. Os efeitos adversos destas substâncias já foram extensivamente incluídos em relatórios de intoxicação, e incluem nomeadamente taquicardia, psicose, desidratação, alterações comportamentais (particularmente agressividade), náuseas e vómitos, podendo culminar em morte. A N-etilpentilona (NEP) é uma das CSs mais recente, tendo sido reportada pela primeira vez na Europa em 2016. Deste modo, o seu perfil farmacocinético e toxicológico ainda estão por esclarecer. No entanto, já foram descritas as suas propriedades ansiolíticas, e que o seu mecanismo recai sobre a inibição de transportadores de monoaminas, especialmente de dopamina. Foram igualmente reportados efeitos secundários devido ao consumo de NEP semelhantes aos de outras CSs, o que reforça a importância da elucidação relativamente ao impacto de NEP na saúde pública. Esta tese foi então desenvolvida no âmbito de melhorar e aumentar o conhecimento das consequências comportamentais e neurológicas do consumo de NEP, particularmente em aprendizagem, memória, ansiedade, neuroinflamação, neurodegeneração e alterações nos sistemas de dopamina, noradrenalina e serotonina. Durante o plano de trabalhos pretendemos: 1) averiguar se a administração de NEP induziria efeitos aditivos; 2) comparar os efeitos de uma administração crónica versus uma administração aguda em regime de binge; 3) bem como avaliar as consequências do consumo agudo de NEP a longo prazo, até 6 meses depois da toma. Deste modo, usámos animais CD-1 com 1 mês de idade, para mimetizar a adolescência humana, divididos em 2 grupos. Estes grupos foram utilizados para comparar os efeitos de um regime crónico versus um agudo e pontual. Durante o regime crónico os animais foram injetados com uma solução salina, 4mg/kg, 8mg/kg ou 16mg/kg de NEP durante 4 dias consecutivos, enquanto para o regime agudo as administrações ocorreram num só dia, com duas injeções de solução salina ou 16mg/kg ou 32mg/kg de NEP, separadas por um intervalo de 2 horas (regime binge). Os animais em regime binge foram depois subdivididos em 3 subgrupos, sendo sacrificados 1 semana, 1 mês e 6 meses após o dia das injeções. Os testes comportamentais incluíram o Conditioned Place Preference (CPP) que nos permitiu avaliar as propriedades aditivas de NEP e foi realizado no grupo de administração crónica. Também executamos o Morris Water Maze (MWM) para analisar os défices em aprendizagem e em memória que o consumo de NEP pode causar, e finalmente o Marble Burying Test (MBT) como indicador de ansiedade. Após o sacrifício dos animais, avaliámos em cortes sagitais de encéfalo a neurodegeneração por marcação com Fluorojade-B, bem como a reactividade microglial e astrocitária, após imunohistochimica para Iba1 e GFAP, respetivamente, focando-nos essencialmente na área do hipocampo. Além disso, analisámos a expressão de transportadores de monoaminas e de citocinas pro- e anti-inflamatórias no córtex, cerebelo e hipocampo dos ratinhos. Neste trabalho demonstramos que a NEP tem um significante potencial aditivo e de propriedades de recompensa dose-dependentes, como esperado. Também demonstramos que uma única dose em binge de NEP pode atrasar processos de aprendizagem até um mês após o consumo, assim como causar sequelas na memória que também podem persistir mais a longo prazo. Adicionalmente, observámos igualmente que a NEP induz um comportamento ansiolítico dependente da concentração usada, o que está de acordo com a literatura prévia. A análise da expressão dos transportadores de monoaminas após a administração de NEP revelou que o regime crónico teve menos impacto, quando comparado com o regime agudo. Neste último, a expressão dos transportadores de serotonina e noradrenalina foi significativamente reduzida após as injeções em binge de NEP. Relativamente aos grupos do regime agudo, observamos um decréscimo global na expressão de todos os transportadores avaliados, nas três regiões do cérebro, o que revela que o impacto de NEP nestes sistemas poderá persistir até 6 meses depois de uma única administração em binge. Na avaliação dos níveis de expressão de proteínas sinápticas o regime crónico também demonstrou alterações, enquanto o regime agudo induziu um decréscimo na expressão de sinaptofisina no cerebelo, mas um aumento no córtex e no hipocampo. A expressão de PSD-95 também aumentou após a injeção em binge de NEP a 16mg/kg no córtex, apesar de no cerebelo e no hipocampo se ter verificado o efeito contrário. Verificamos que a administração aguda de NEP pode aumentar o número de neurónios em degeneração até uma semana depois da exposição, apesar de este efeito desvanecer 1 mês e 6 meses depois. Tanto a administração crónica como a administração aguda desta CS causaram um aumento dose-dependente da expressão do GFAP, revelando reatividade nos astrócitos do hipocampo. Este efeito manteve-se até 6 meses depois da administração aguda de 16 e 32mg/kg de NEP. Relativamente à microglia, somente a administração aguda mostrou ser impactante, aumentando de forma dose-dependentemente o número de células Iba1+, refletindo maior reatividade por parte destas células após consumo de NEP. Este efeito prolongou-se até um mês após a administração binge, não se verificando após 6 meses da administração. Finalmente, os ensaios com citocinas pro- e anti-inflamatórias resultaram em dados contraditórios, uma vez que a variação da sua expressão foi dependente da região do cérebro avaliada. Por exemplo, a administração aguda de NEP causou um decréscimo na expressão de TNF-α no cerebelo, e um aumento no córtex e no hipocampo. Já para a IL-1β, a NEP induziu níveis mais elevados de expressão no córtex, e mais reduzidos no cerebelo e hipocampo, alterações estas que desaparecerem ao fim de seis meses do tratamento. O presente estudo permitiu concluir que a NEP tem, de facto, propriedades aditivas, assim como os psicoestimulantes convencionais. Também verificámos que quando consumida de uma forma aguda pode ter impacto nas capacidades de aprendizagem e de memória em animais adolescentes, que se poderão manter até 1 mês após a administração. Adicionalmente, observámos que a NEP tem propriedades ansiolíticas, algo que também poderá contribuir para o interesse do público-alvo, podendo resultar em consequências graves quando tomada em doses mais elevadas. Além disso, induz alterações nos sistemas monoaminergicos, que eventualmente poderão estar associadas a neuroinflamação e, por conseguinte, ao défice cognitivo. A propósito, notámos que a administração crónica da NEP teve um efeito quase imediato na reatividade de astrócitos, apesar de o mesmo não se ter observado na microglia. Por outro lado, uma semana e um mês, após a injeção a NEP a densidade microglial no hipocampo dos ratinhos aumentou para ambas as doses, refletindo a resposta da microglia à exposição à droga. No entanto, este efeito começou a desvanecer aos 6 meses. Contrariamente, a área de astrócitos após as injeções em binge de NEP aumentaram dose-dependentemente para os 3 subgrupos estudados, revelando que a reatividade dos astrócitos se manteve constante até 6 meses após administração de NEP. De notar também que uma semana após a toma desta droga em regime binge, ocorreu um aumento da neurodegeneração. Finalmente, verificamos que a administração aguda de NEP induzia alterações na expressão de citocinas pro- e anti-inflamatórias, nomeadamente no córtex e cerebelo, revelando a desregulação que esta CS pode ter na neuroinflamação local. Em conclusão, esta tese mostrou o impacto que a NEP pode ter tanto ao nível da cognição, como ao nível neuronal, tendo os nossos resultados contribuído para a introdução de novo conhecimento desta CS na comunidade científica. Deste modo, incentivamos à regulamentação e ao controlo legal desta substância, e promovemos a cessação do seu consumo, particularmente em adolescentes e jovens adultos.Synthetic cathinones (SCs) are a group of New Psychoactive Substances, synthesized to circumvent the law and escape legal regulation. Their target audience includes mainly young party attendees and their adverse effects have been widely documented in intoxication reports, which sometimes include deaths. N-ethylpenthylone (NEP) is one of the most recent SCs, thus having insufficient information regarding its toxicological profile. Deaths caused by NEP have already been reported, which further develops concerns around this public health issue. This project aimed to improve knowledge in the neurological and behavioral consequences of NEP consumption, mainly regarding its effects in cognition, anxiety like symptoms, neuroinflammation and neurodegeneration. To achieve this, we exposed CD-1 young mice (1 month-old) to repeated (4mg/kg, 8mg/kg and 16mg/kg) and acute dosing of NEP (16mg/kg or 32mg/kg). The acute cohort was evaluated one week, one month and six months after exposure. The Conditioned Place Preference experiment showed that repeated administration of NEP induces a rewarding behavior in young mice. Both learning and memory deficits were observed 1-week and 1-month post-administration of NEP during the Morris Water Maze, indicating cognitive impairments that may persist long-term. During the Marble Burying Test, the number of buried marbles decreased 1-week and 1-month post-administration of NEP when compared to the control group, confirming that this drug has anxiolytic properties. Flurojade B staining analysis showed that there is a dose-related increase in degenerating neurons 1-week after administration when compared to controls. Importantly, this drug also induced changes in monoaminergic systems and cytokine expression, which could further lead to neuroinflammative responses. Indeed, immunohistochemistry after acute consumption of NEP showed increases in density of both astrocytes and microglia, known players of neuroinflammation. This study has shown that NEP can elicit potentially irreversible cognitive and neurological damage to adolescents and young adults, which can raise awareness to increase the regulation of SCs.iMed.ULisboa; Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT)

New philanthropy in education in Portugal: fabricating social inclusion as policy, knowledge and practice

This paper addresses the ways through which new philanthropy in education is being enacted in Portugal, focusing on one of its significant imaginaries: social inclusion. We analyse EPIS (Entrepreneurs for Social Inclusion), a top association dedicated to corporate philanthropy with a growing presence in the education system. Drawing on Popkewitz’s concept of fabrication, it examines EPIS’ programmes and deliverables as technologies that constitute social inclusion as an object of policy, knowledge and practice, targeting students (transforming ‘at-risk’ students into entrepreneurs), teachers and schools (transforming their cultures to become performance-oriented), and the relationship between State and non-State actors (fostering the State’s adoption of a rule-following role, dependent on knowledge generated by non-State actors). This paper suggests that new philanthropies’ social inclusion imaginary enacts a system of reason that promulgates results-oriented and evidence-based approaches to educational policy and knowledge.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Papel da imagiologia no follow-up da Doença de Crohn pediátrica

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 202